[發明專利]苦碟子注射液糖類成分的含量測定方法

有效

• 申請號: 201410021654.2
• 申請日: 2014-01-17
• 公開（公告）號: CN104316630A
• 公開（公告）日: 2015-01-28
• 發明（設計）人: 王暉;張艷君;李遇伯;劉東輝;陳峰
• 申請（專利權）人: 通化華夏藥業有限責任公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 通化旺維專利商標事務所有限公司 22205
• 代理人: 王偉

技術領域

本發明涉及一種中藥注射液的鑒別方法，特別是涉及一種利用GC-MS測定苦碟子注射液糖類成分的測定方法。

背景技術

苦碟子為菊科苦荬菜屬多年生草本植物。近年來隨著中藥越來越受重視，苦碟子的化學成分、藥理活性和臨床研究應用等方面的研究都取得了重大進展。苦碟子注射液為淺黃棕色至黃棕色的澄明液體，臨床上用于冠心病、心絞痛、腦血栓、腦梗塞等。

苦碟子的化學成分比較復雜，據文獻報道其成分主要有萜類、黃酮類和香豆素類、甾醇等。其中主要活性成分，由于受產地、氣候和生態環境等因素的影響，不同產地苦碟子所制成的注射液所含成分詫異很大。研究報道，從各種動植物中提取的多糖具有免疫調節、抗腫瘤、抗病毒、抗衰老、抗病毒、抗輻射、降血脂、降血糖、美容等廣泛的作用。

苦碟子注射液（曾用名：碟脈靈注射液）列入國家藥品標準產品（國藥準字Z20025450），由通化華夏藥業有限責任公司生產。

處方：抱莖苦荬菜1000g，制成1000ml。

制法：取抱莖苦荬菜，加水煎煮二次，第一次1小時，第二次0.5小時，合并煎液，濃縮至每1ml相當于原生藥0.5g，放冷至40℃以下，在攪拌下加10%氧化鈣乳調節pH值至10，放置12小時，離心，離心沉淀物稱重，懸浮于5.3倍量95%乙醇中（使含醇量達80%），加50%硫酸溶液調節pH值至3－4，充分攪拌使反應完全，離心，離心液加40%氫氧化鈉溶液中和pH值至7.0，濾過，濾液回收乙醇，并揮盡乙醇，用注射用水稀釋至每1ml相當于原生藥4g，置-5℃以下放置12小時以上，濾過，濾液加0.1－0.2%藥用活性炭粉末，煮沸15分鐘，置-5℃以下放置24小時以上，濾過，濾液加注射用水稀釋至規定量，調節pH值至7.0－7.5，濾過，灌封，滅菌即得。性狀：本品為淺黃棕色至黃棕色的澄明液體。

含量測定：本品每10ml含總黃酮以無水蘆丁（C₂₇H₃₀O₁₆）計，不得少于4.0mg。含抱莖苦荬菜以腺苷（C₁₀H₁₂N₅O₄）計，不得少于0.025mg。

功能主治：活血止痛，清熱祛瘀。用于瘀血閉阻的胸痹，證見：胸悶、心痛，口苦，舌暗紅或存瘀斑等。適用于冠心病、心絞痛見上述病狀者。亦可用于腦梗塞者。

用法用量：靜脈滴注，一次10－40ml，一日1次；用5%葡萄糖或0.9%氯化鈉注射液稀釋至250－500ml后應用；14天為一療程；或遵醫囑。

規格：每支裝（1）10ml，（2）20ml，（3）40ml。

據文獻報道，苦碟子中含有糖類成分，但是在現有的文獻和報道中卻并沒有有關此物質的質量檢測方法。本發明就提供了一種苦碟子注射液中糖類物質的含量測定的方法。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術中的現狀，提供一種苦碟子注射液中糖類成分的含量測定方法，該方法為苦碟子注射中糖類成分的檢測提供了樣品前處理方法以及糖類成分GC-MS的檢測方法，通過該方法的分析，不僅可以明確苦碟子注射液中糖類成分的組成，還能對其含量進行測定，該方法的建立可為苦碟子注射液質量控制提供依據。

本發明的技術解決方案是：苦碟子注射液糖類成分的含量測定方法，其步驟如下：

（a）樣品的制備

樣品前處理方法：取苦碟子注射液過HyperSep?C18柱后，置于具塞圓底燒瓶中，1M??HCl調pH為1，減壓抽真空后70℃水浴3h，冷卻后加入10%?NaOH?調pH至中性，精密量取每5ml于每支離心管中，冷凍干燥備用。而苦碟子注射液中富含有黃酮苷和核苷類成分，為避免其中糖配基的干擾，建立了苦碟子注射液進行前處理方法，除去其中的苷類成分，使該方法能夠專一性的分析苦碟子注射液中的糖類成分。本方法中樣品前處理步驟簡單易于操作，所得樣品的重復性良好，適用于成批藥物的大量檢測。

稱取上述干燥物置于10?ml?具塞試管中，加入100?mg?鹽酸羥胺和500μl吡啶，在90℃水浴中振蕩反應30min，取出冷至室溫，加入500μl乙酸酐，于90℃水浴中繼續進行乙酰化反應30min，冷卻后即得衍生物。