[發明專利]沉默DNMT基因的雙鏈siRNA分子及其應用

有效

• 申請號: 201410021188.8
• 申請日: 2014-01-17
• 公開（公告）號: CN103757021A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發明（設計）人: 肖文華;董偉偉
• 申請（專利權）人: 肖文華
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及生物醫藥技術領域，具體涉及雙鏈siRNA分子及其應用，更具體地，本發明針對人腫瘤細胞DNMT基因的核苷酸序列設計合成siRNA，所述siRNA轉入肝癌細胞后能明顯促進免疫原性相關蛋白的表達。

背景技術

DNA甲基轉移酶(DNA?methyltransferases，DNMTs)是催化DNA甲基化修飾的酶。具有催化甲基化功能的DNMTs有3種，分別為DNMT1、DNMT3a及DNMT3b[Plass,C.Cancer?epigenomics.Human?Molecular?Genetics,2002；11：2479-2488]。DNA甲基化是調控免疫細胞的分化及功能表達。甲基化調節免疫分子和腫瘤抗原的表達與腫瘤的免疫原性和免疫反應性有明確的關系，因此，合理的去甲基化是克服免疫耐受和免疫逃逸的有效手段[Teitella,M.,et?al.DNA?methylation?in?immune?system.Clinical?immunology,2003；109：2-5]。

癌／睪丸抗原(cancer／testis?antigen，CTA)是一種腫瘤相關抗原，目前已確定19個CTA家族的基因產物，均具有較強的免疫原性(如CT10(cancer／testis10)，有多個HLA-I(human?leukocyte?antigen)I類抗原限制的免疫表位，體內外實驗證實能夠誘導功能性的淋巴細胞毒性反應，促進腫瘤的消退，在HCC患者的肝癌組織中，CTA表達非常高[Zhao?L,et?al.Progress?and?prospects?in?hepatocellular?carcinoma?surgery.Ann?Chir,1988；52：558-563]，因此針對CTA的抗腫瘤免疫治療符合肝癌及其其他腫瘤病人進行免疫的理想選擇[Chen?YT.，et?al.A?testicular?antigen?aberrantlye?expressed?in?human?cancers?detected?by?autologous?antibody?screening.Proc?Natl?Acard?Sci?USA,1997；94：1914-1918Korangy?F.,et?al.Spontaneous?tumor-specific?humoral?and?cellular?immune?responses?to?NY-ESO-l?in?Hepatocellular?carcinoma.Clin?Cancer?Res,2004；10：4332-4341Oh?BK.,et?al.DNA?methyltransferase?expression?and?DNA?methylation?in?human?hepatocellular?carcinoma?and?their?clinicopathological?correlation]。雖然已有報道稱，CTA和HLA基因的表達均受甲基化調控，通過抑制DNMT，可促進其表達[Guo?ZS.,et?al.De?novo?induction?of?a?Cancer／Testis?Antigen?by5-Aza-2'-Deoxycytidine?Augments?Adoptive?Immunotherapy?in?a?Murine?Tumor?Mode.Cancer?Res.,2006；66：1105-1113]。但是在肝癌細胞中CTA、HLA是否受甲基化調控還不太清楚。