[發明專利]防治小麥禾谷孢囊線蟲病的生防菌株09B18、制備生防菌劑的方法及其應用

無效

• 申請號: 201410016968.3
• 申請日: 2014-01-15
• 公開（公告）號: CN103789233A
• 公開（公告）日: 2014-05-14
• 發明（設計）人: 張潔;李洪連;李永輝;袁虹霞;邢小萍;胡艷峰
• 申請（專利權）人: 河南農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/00;A01P5/00;A01C1/06;C12R1/085
• 代理公司: 鄭州優盾知識產權代理有限公司 41125
• 代理人: 張紹琳;張真真

技術領域

本發明屬于植物保護領域，涉及一種防治小麥禾谷孢囊線蟲的生防菌株09B18及其應用。

背景技術

禾谷孢囊線蟲病(Cereal?Cyst?Nematode，CCN)是一種危害嚴重的全球性植物線蟲病害，也是近年來我國發生的一種新的小麥土傳病害。病原為小麥禾谷孢囊線蟲(Heterodera?avenae?group)，屬線蟲綱，墊刃線蟲目，異皮線蟲科，異皮線蟲屬，為害小麥、大麥、燕麥、黑麥等禾谷類作物和紫羊茅、牛尾草、羊茅等40余種牧草。病原線蟲主要危害小麥的根部，侵入小麥根系并在其中繁殖，使根系形成球瘤狀根結，從而抑制植株對營養的吸收，造成小麥地上部分葉片發黃，植株矮化，最終影響產量。

國內外對于小麥禾谷孢囊線蟲病的防治主要措施有：采取與非寄主作物的輪作；種植抗耐病性品種；使用有效的殺線蟲化學藥劑等綜合有效的防治措施，來控制小麥禾谷孢囊線蟲病的危害。但是在我國廣大小麥種植區，與非寄主作物的輪作往往因為多種原因難以大面積實施；一些研究發現，我國生產上大面積推廣的小麥品種中對小麥禾谷孢囊線蟲的抗病品種很少，大多數品種屬于感病或高感品種；化學農藥的篩選雖然取得了一些進展，但能夠有效防治小麥禾谷孢囊線蟲病的藥劑毒性大、成本高等原因，從而受到很大程度的限制，生物防治因為自身的優點受到越來越多的重視，但如今對小麥禾谷孢囊線蟲的生物防治研究方面報道還是很少，針對我國小麥禾谷孢囊線蟲病防治中存在的問題及生產的需要，開發高效穩定且能夠大規模生產的生防制劑是可持續農業發展的需求。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術中沒有對小麥禾谷孢囊線蟲病有較高防效的生防制劑的現狀，提供開發一種防治小麥禾谷孢囊線蟲病的單一生防菌株及其菌劑，該菌劑對小麥禾谷孢囊線蟲的室內防治效果達到70%以上。一種防治小麥禾谷孢囊線蟲的生防菌株09B18，所述防治小麥禾谷孢囊線蟲的生防菌株09B18，分類命名：蠟質芽孢桿菌，拉丁文學名：Bacillus?Cereus。保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏單位簡稱：CGMCC，保藏單位地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏日期：2013年12月23日，保藏號為CGMCC?NO：8632。

本發明的技術方案是：所述的防治小麥禾谷孢囊線蟲的生防菌株09B18制備生防菌劑的方法，09B18菌株在LB培養液中30℃，180rpm震蕩培養32-36小時，然后將培養液用無菌水進行稀釋制成菌劑，菌劑成品中活菌總濃度為1×10⁸-1×10⁹CFU/ml，制成生防菌劑。

所述的生防菌劑在防治小麥孢囊線蟲病中的應用。

所述的生防菌劑在小麥增產中的應用。

所述的生防菌劑進行8-10?ml/kg拌種處理。

本發明的有益效果是：本發明是專門針對小麥孢囊線蟲病開發的生防菌劑，由于是生物制劑，完全沒有因化學農藥的使用所帶來的一系列問題，因而有利于小麥作物的無公害生產，農民可以不用或者少用其他化學農藥的用量，這樣不僅可以為農民節省開支，而且有利于提升糧食品質。防治試驗驗證了09B818菌劑對小麥孢囊線蟲病具有較好的防治效果，在室內和田間試驗中孢囊減退率分別達到75.9%和43.47%。同時，該菌劑還有增產功能，可以為農民增加收入。

附圖說明

圖1為09B18菌落特征；

圖2為09B18菌體及芽孢（革蘭氏染色為紫色）；

圖3為09B18菌體電鏡照片；

圖4為菌株09B18基于16s-rRNA序列同源性的系統發育樹。

具體實施方式

一種防治小麥禾谷孢囊線蟲病的單一生防菌株及其菌劑，該菌劑對小麥禾谷孢囊線蟲的室內防治效果達到70%以上。一種防治小麥禾谷孢囊線蟲的生防菌株09B18，所述防治小麥禾谷孢囊線蟲的生防菌株09B18，分類命名：蠟質芽孢桿菌，拉丁文學名：Bacillus?Cereus。保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏單位簡稱：CGMCC，保藏單位地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏日期：2013年12月23日，保藏號為CGMCC?NO：8632。

所述的防治小麥禾谷孢囊線蟲的生防菌株09B18制備生防菌劑的方法，09B18菌株在LB培養液中30℃，180rpm震蕩培養32-36小時，然后將培養液用無菌水進行稀釋制成菌劑，菌劑成品中活菌總濃度為1×10⁸-1×10⁹CFU/ml，制成生防菌劑。