[發明專利]一種制作靈長類動物干性年齡相關性黃斑變性疾病模型的方法

在審

• 申請號: 201410012503.0
• 申請日: 2014-01-10
• 公開（公告）號: CN103720524A
• 公開（公告）日: 2014-04-16
• 發明（設計）人: 袁松濤;計江東;劉慶淮
• 申請（專利權）人: 南京醫科大學第一附屬醫院
• 主分類號: A61D7/00
• 分類號: A61D7/00;A61K33/18
• 代理公司: 南京知識律師事務所 32207
• 代理人: 張鉑

技術領域

本發明涉及醫療技術領域，具體的說是一種制作靈長類動物干性年齡相關性黃斑變性疾病模型的方法。?

背景技術

干性年齡相關性黃斑變性(age-related?macular?degeneration,AMD)是發生于中老年人中的常見致盲性眼病之一。研究表明視網膜色素上皮（retinal?pigment?epithelium,RPE）的正常功能對感光細胞的數量和功能具有至關重要的意義，在AMD發生過程中，黃斑區視網膜色素上皮損害是疾病的原發病變，而感光細胞的丟失是繼發的。隨著年齡增長，AMD發病率逐漸上升，所以其危害正隨著我國人口的老齡化而增加。干性老年性黃斑變性當今仍然無明確有效的治療手段，其發病機理和治療方法成為研究熱點，但因為沒有理想的動物疾病模型，極大的阻礙了其研究進展。?

碘酸鈉是一種抗代謝藥，能夠破壞視網膜色素上皮糖代謝有關的酶的活性，因而可以選擇性破壞視網膜色素上皮。通過靜脈注射碘酸鈉，在兔中可以制作出干性年齡相關性黃斑變性模型。靈長類動物與人類結構和功能最為相似，靈長類的疾病模型對人類疾病的研究極為重要，但在靈長類動物中，相應劑量的碘酸鈉靜脈注射并不能取得滿意的干性年齡相關性黃斑變性模型，增加劑量則增加藥物的全身毒性，動物甚至因藥物全身毒性而死亡。文獻《年齡相關性黃斑變性（AMD）實驗模型的研究進展》（江偉，邱春億，《國際眼科雜志》2007年第3期）以及文獻《碘酸鈉誘導非滲出型年齡相關性黃斑變性模型的研究》（江偉，張婉玉，邱春億，《國際眼科雜志》2008年第8期）公開了采用舌下靜脈注射的方式將劑量為30-40mg/kg碘酸鈉用于非滲出型年齡相關性黃斑變性的體內造模。由于靜脈注射碘酸鈉造模的方法，藥物先經靜脈回流到心臟，后再經心臟泵出通過主動脈，頸動脈，眼動脈進入視網膜脈絡膜循環，藥物經過全身循環使到達眼部的藥物濃度已經大幅度降低，而藥物對色素上皮的作用是濃度依賴性的，為了達到破壞色素上皮的目的，要加大給藥劑量，但這樣會相應增加藥物的全身毒性，導致動物血尿，腎衰甚至死亡，而相應的視網膜色素上皮的病變并不明顯。?

發明內容

本發明針對現有技術不足，提供了一種滿意的靈長類動物干性年齡相關性黃斑變性?的疾病模型。通過經頸動脈給藥，藥物經頸動脈到眼動脈，進入視網膜脈絡膜循環，藥物沒有經過全身循環的稀釋，到達眼部的藥物濃度高，從而使用少量的藥物而達到相應目的；可進一步通過控制頸動脈的阻斷時間，還可以控制藥物在眼部停留的時間，延長藥物對色素上皮的作用，可調控視網膜色素上皮損傷的范圍和程度。?

本發明的目的是通過以下技術方案解決的：?

一種制作靈長類動物干性年齡相關性黃斑變性疾病模型的方法，將碘酸鈉以頸動脈注射的方式施于靈長類動物，上述碘酸鈉的劑量為15mg/kg。?

申請人發現，在本發明所述靈長類動物干性年齡相關性黃斑變性疾病模型的制作過程中，模型效果以及病變的程度不僅與碘酸鈉的劑量有直接關系，還與碘酸鈉藥物濃度以及推注速度有關，優選碘酸鈉的濃度為10mg/ml，推注速度為0.1ml/s。?

上述方法中，頸動脈注射可采用頸動脈穿刺的方式給藥。在進行注射時，一般采用平臥位，將動物頸部墊高，頭向后仰，盡量暴露頸部，頭偏向于穿刺部位的對側，進行常規的皮膚消毒后，用左手食指或食指、中指固定其搏動明顯處的血管，右手食指和拇指固定準針柄部位，進針點為甲狀軟骨下緣以下，進針時要注意進針方向，其垂直角度以與頸動脈垂直方向為準，刺入后，有搏動性鮮血噴入針管內，即可注入藥物。藥物注射完畢壓迫止血，可通過進一步按壓阻斷頸總動脈一定時間，從而進一步延長碘酸鈉在眼部聚集的時間，優選阻斷時間為1分鐘。?

或者，可以采用暴露頸動脈的方式進行注射：1)將動物麻醉，固定，暴露頸部，去毛，消毒；2)喉部正中線皮膚切口，暴露頸總動脈；3)阻斷頸外動脈和頸總動脈血流；4)將碘酸鈉經頸總動脈注入，繼續保持頸總動脈血流阻斷一定時間，優選1分鐘。5)拔針后壓迫止血，縫合切口。?

本發明相比現有技術有如下優點：?

1)造模成功率高，可重復性好，模型穩定；?

2)所需碘酸鈉藥物量少，避免了大劑量碘酸鈉對動物的全身損傷，動物長期存活，為后續試驗提供可能；?

3)可根據需要做任何一側或雙側模型；?

4)做一側造模時對對側眼沒任何損傷，動物有正常生活視力，保證了動物福利；?

5)可在一只動物上做雙側眼的自身對照，提供了試驗的可信度，減少了試驗動物的需要量。?