[發明專利]一種活體提取蛇足石杉生物總堿的方法

有效

• 申請號: 201410011624.3
• 申請日: 2014-01-10
• 公開（公告）號: CN103705548A
• 公開（公告）日: 2014-04-09
• 發明（設計）人: 姚茂君;駱冰潔
• 申請（專利權）人: 吉首大學
• 主分類號: A61K36/11
• 分類號: A61K36/11;A01G7/06;A01G1/00
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• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種蛇足石杉生物總堿的提取方法，具體指采用蛇足石杉活體為原料，提取完生物總堿的蛇足石杉又在原生境下重新栽活的方法。

背景技術

蛇足石杉俗名千層塔，屬石杉科石杉屬，是一種多年生蕨類植物。蛇足石杉全草可供藥用，味辛、平、甘，民間用于治療跌打損傷、肌肉痙攣、坐骨神經痛、神經性頭痛等疾病。

蛇足石杉中最有價值的藥效成分為石杉堿甲、石杉堿乙等生物總堿，提取生物總堿是蛇足石杉最主要的資源利用方式，但蛇足石杉也是國家一級瀕危保護植物，對生境要求苛刻、繁殖難度大、生長極其緩慢，近年來的開發利用已經使得野生資源面臨枯竭，蛇足石杉干草的價格已從過去的20元/公斤猛增至200元/公斤，增長勢頭仍在延續。

人工栽培是保護和利用蛇足石杉資源的較佳途徑，但由于蛇足石杉生長極其緩慢，使得常規的栽培利用沒有實用價值。活體提取蛇足石杉生物總堿是將蛇足石杉從生長地拔除，提取完生物總堿后又在原生境重新栽活的資源利用方法，非常有利于蛇足石杉這類生長緩慢、繁殖難度大、附加值高的植物資源保護和利用，而且，通過提取生物總堿對植物體產生刺激，還會加速蛇足石杉進行次生代謝，產生更多的生物總堿。

提取完后重新栽活，栽活一段時間后又提取，如此循環往復，是一種十分理想的蛇足石杉資源保護和利用方式，要實現這樣的資源保護和利用方式，現階段還存在提取率低、操作麻煩、提取完生物總堿的蛇足石杉難以重新栽活等技術難題，因而，現有技術不能滿足蛇足石杉資源保護和利用的需要。?

發明內容

為解決上述從蛇足石杉活體提取生物總堿又重新栽活的現有技術存在的難題，本發明人經過大量的科學實踐，終于發明出一種具有一定提取率、操作相對簡單、蛇足石杉成活率相對較高、具有較強實用價值的方法。

本發明包括以下幾個步驟：

（1）植株采收前的準備：在植株采收前3-7天用稀釋1000-1500倍的杜邦易保+質量分數為0.1-0.2%的磷酸二氫鉀溶液噴施采收植株一次。杜邦易保是美國杜邦公司生產的一種新型高效保護性殺菌劑，是由化合物惡唑烷二酮與代森猛鋅復配而成，本發明優選的杜邦易保是68.75%水分散粒劑，其中代森猛鋅質量分數為64%，霜尿氰質量分數為8%。

（2）植株的采收和生物總堿提取：將采收植株連根拔起，洗去根部的泥土，根部朝下，放入竹筐固定，將竹筐放入提取罐，以質量分數為0.3-1.5%的酒石酸溶液為溶劑，溶劑與蛇足石杉植物體的體積質量比為5：1-20：1，常溫下溫和提取5-60分鐘，提取液過濾后上大孔陽離子交換樹脂吸附生物堿，吸附后流出液進入提取罐循環提取，體積質量比中體積的單位為毫升，質量的單位為克。

經檢測，上述提取過程中蛇足石杉生物總堿的轉移率可達20-50%，已具備很強的實用價值。

（3）植株的重新栽培：將提取完的植株用無菌水淋洗，洗去殘留的有機酸，將植株的根部用質量分數為0.05-0.15%的萘乙酸+質量分數為0.01-0.02%的6-BA（6-芐氨基嘌呤）+1-2ppm的BR(蕓苔素內酯)浸泡3-10秒，此法可有效促進生根和萌芽，處理完后，將植株重新栽培在采收的地方，并噴施稀釋1000-2000倍的杜邦易保+質量分數為0.1-0.2%的磷酸二氫鉀溶液一次。

經檢測，運用本發明對蛇足石杉重新栽培，成活率達到了80%以上，少量未成活的植株可再次用于提取有效成分，不會浪費資源，具備很強的實用性。

與現有技術相比，本發明的有益效果是：通過對植株采收前進行獨特的預處理、提取時運用適合的條件進行生物總堿提取、提取完后又用獨特的手段進行處理，既保證了蛇足石杉生物總堿具備一定的提取率，又保證了植株80%以上的重新栽培成活率，并且操作相對簡單，具備創造性和很強的實用價值。

本發明有效解決了蛇足石杉資源保護與資源利用的矛盾，對于保護、開發和利用蛇足石杉植物資源具有顯著意義，對于其它珍惜植物資源的保護與利用也有很好的啟示，應用前景廣闊。

具體實施方式

以下對一種活體提取蛇足石杉生物總堿的方法進行詳細說明。

實施例1：

（1）植株采收前的準備：在植株采收前5天用稀釋1100倍的杜邦易保+質量分數為0.11%的磷酸二氫鉀溶液噴施采收植株一次。其中杜邦易保是68.75%水分散粒劑，其中代森猛鋅質量分數為64%，霜尿氰質量分數為8%。