[發(fā)明專利]中藥桑杜糖免疫增強(qiáng)劑及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410010826.6
• 申請日: 2014-01-09
• 公開（公告）號: CN103768594A
• 公開（公告）日: 2014-05-07
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 蔣春茂;陳曉蘭;王德云;楊海峰;武彩虹;鄭義;戴建華;陳未;何祥來
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61P37/04;A61K39/17;A61K39/12;A61P31/14
• 代理公司: 北京科億知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種中藥桑杜糖免疫增強(qiáng)劑，由桑葉多糖和杜仲多糖組成，簡稱桑杜糖増免劑，屬于畜禽免疫佐劑領(lǐng)域。

背景技術(shù)

動物的病毒性傳染病，如高致病性禽流感、新城疫、傳染性法氏囊病等，嚴(yán)重危害畜牧業(yè)的發(fā)展，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，一直受到世界的廣泛關(guān)注。免疫接種是防控這些疫病暴發(fā)的最好措施。然而單獨(dú)接種疫苗通常產(chǎn)生相對較弱的免疫力。免疫佐劑能增強(qiáng)疫苗的免疫應(yīng)答，使保護(hù)時間延長。許多免疫佐劑如弗氏佐劑和脂多糖因易引起全身性反應(yīng)（如惡心，發(fā)熱，過敏反應(yīng)，嗜酸性粒細(xì)胞增多，中毒，麻痹以及自身免疫性疾?。┖途植垦装Y反應(yīng)（炎癥，疼痛，腫脹，壞死，潰瘍和膿腫）而限制了其廣泛應(yīng)用。因此，研制高效安全的新型免疫佐劑成為防控動物傳染病的熱點。許多中藥證明具有免疫增強(qiáng)作用，且高效安全。但大多數(shù)組方復(fù)雜，給藥不便。隨著集約化養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，動物群體飲水給藥具有更明顯的優(yōu)勢。本發(fā)明，進(jìn)行了組分藥篩選、方劑篩選和劑量篩選，結(jié)合便于應(yīng)用等方面綜合比較，研制成功由桑葉多糖和杜仲多糖制成的桑杜糖増免劑。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對當(dāng)前動物疫病防控現(xiàn)有技術(shù)中急需高效、安全的免疫增強(qiáng)劑或疫苗佐劑的問題，提供一種由桑葉多糖和杜仲多糖制成的新型中藥免疫增強(qiáng)劑。

本發(fā)明一種新型中藥免疫增強(qiáng)劑，其特征在于，每1000ml藥液由桑葉150g和杜仲皮145g制成。藥液中的桑葉多糖含量不低于0.2%，杜仲多糖的含量不低于0.1%。

生產(chǎn)每1000mL藥液的工藝流程為：桑葉水煎2次，合并濾液，醇沉后干燥，640mL水溶解；杜仲乙醇脫脂后，水煎2次，合并濾液，醇沉后干燥，360mL水溶解。兩種溶液混勻，分裝，即得。

桑葉多糖的提取工藝為桑葉加30倍質(zhì)量水煎煮2次，第一次1.5小時，第二次1小時。杜仲多糖的提取工藝為杜仲皮加4倍質(zhì)量無水乙醇回流脫脂2次，后水煎2次，第一次1.5小時，第二次1小時。

有益效果：本發(fā)明的基礎(chǔ)工作，首先選擇有免疫增強(qiáng)作用的中藥多糖，比較它們的增強(qiáng)免疫作用，篩選出作用較好的桑葉多糖、杜仲多糖，按不同比例組成多個復(fù)方，通過系列試驗比較，證明復(fù)方的效果強(qiáng)于單味藥，篩選出效果最好的組方配比（表1）。

本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以通過正交試驗確定了桑葉多糖和杜仲多糖的提取條件，優(yōu)化多糖溶解性條件，確定了桑杜糖増免劑的生產(chǎn)工藝。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明優(yōu)點如下：

1.與化學(xué)佐劑相比，桑杜糖増免劑效果可靠，且來源于天然中藥，無毒副作用，無藥殘隱患，保障動物源食品安全；生產(chǎn)對環(huán)境無污染，符合綠色環(huán)保的要求。

2.與傳統(tǒng)中藥方劑相比，桑杜糖増免劑處方精煉，成分明確，工藝簡化，質(zhì)量可控，給藥方便，成本較低。

3.與同類中藥成分方劑相比，桑杜糖増免劑功效提高，配合新城疫疫苗免疫雛雞，能顯著增強(qiáng)細(xì)胞免疫和體液免疫，提高疫苗的免疫應(yīng)答。

具體實施方式

1.制備工藝

（1）桑葉多糖的制備以提取物中的桑葉多糖得率為指標(biāo)，對加水量、提取時間、提取次數(shù)、醇沉用乙醇濃度進(jìn)行正交試驗，確定桑葉多糖的最佳提取工藝為加30倍水，煎煮2次，第一次1.5h，第二次1h。取桑葉150g，按以上工藝水煎，合并濾液，加入95%乙醇使醇含量達(dá)75%，靜置12h，沉淀65℃干燥，640mL水溶解，得桑葉多糖水溶液。

（2）杜仲多糖的制備以提取物中的桑葉多糖得率為指標(biāo)，對脫脂乙醇量、加水量、提取時間、提取次數(shù)進(jìn)行正交試驗，確定杜仲多糖的最佳提取工藝為加4倍質(zhì)量95%乙醇回流脫脂2次，加20倍水，煎煮2次，第一次1.5h，第二次1h。取杜仲皮145g，按以上工藝脫脂，水煎，合并濾液，加入95%乙醇使醇含量達(dá)75%，靜置12h，沉淀65℃干燥，360mL水溶解，得桑葉多糖水溶液。

（3）藥液制備將桑葉多糖溶液和杜仲多糖溶液混合，分裝。用苯酚-硫酸法測定多糖含量，HPLC法測定蘆丁和松脂醇二葡萄糖苷的含量。藥液中多糖含量不低于0.3%、蘆丁含量不低于0.025%，松脂醇二葡萄糖苷不低于0.01%。

2.增強(qiáng)免疫效果比較

（1）體外增強(qiáng)免疫效果