[發(fā)明專利]一種消除乳糜干擾的膠乳免疫比濁法胃蛋白酶原Ⅰ檢測試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410010750.7
• 申請日: 2014-01-09
• 公開（公告）號: CN103698525A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發(fā)明（設計）人: 李雪;劉紅春;歐陽卓君
• 申請（專利權）人: 北京萬泰德瑞診斷技術有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種膠乳免疫比濁法檢測血清胃蛋白酶原Ⅰ的檢測試劑盒，其特征在于，包含試劑1、試劑2和校準品；

所述試劑1包括電解質、乳糜消除劑、促凝劑、穩(wěn)定劑、表面活性劑、防腐劑及緩沖液；

所述試劑2包含抗人胃蛋白酶原Ⅰ抗體包被的膠乳顆粒、防腐劑及緩沖液；

所述校準品包含電解質、防腐劑、穩(wěn)定劑、胃蛋白酶原Ⅰ抗原、人血清及緩沖液；

所述電解質選自無機鹽；?

所述乳糜消除劑，選自脂肪酶或1～5%的聚乙二醇-硫酸菊聚糖鎂試劑；

所述促凝劑選自PEG-4000、PEG-6000、PEG-8000或硫酸葡聚糖鈉；

所述穩(wěn)定劑選自牛血清白蛋白、酪蛋白、魚皮明膠蛋白、山梨醇或乙二胺四乙酸二鈉；

所述表面活性劑選自吐溫系列、脂肪醇聚乙二醇醚、聚氧乙烯苯基醚、聚氧乙烯月桂醚系列；

所述防腐劑選自疊氮鈉、苯酚、對羥基苯甲酸、對羥基苯甲酸乙酯、Proclin系列；

所述緩沖液選自Tris-HCl緩沖液、甘氨酸-NaOH緩沖液、磷酸鹽緩沖液、HEPES-NaOH緩沖液、MOPSO緩沖液；

所述抗人胃蛋白酶原Ⅰ抗體為單克隆抗體與多克隆抗體的混合，其中單抗/多抗的比值范圍為5～10，抗體種類選自IgG?抗體或IgY?抗體；

所述的膠乳顆粒為聚苯乙烯膠乳，直徑范圍為150～250nm，膠乳顆粒的表面修飾有功能團，修飾的功能團選自羧基、氨基、羥基、酰肼或氯甲基；抗人胃蛋白酶原Ⅰ抗體通過化學交聯(lián)法包被到膠乳顆粒表面，化學交聯(lián)劑選擇碳化亞胺（EDAC）、N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）、N-羥基硫代琥珀酰亞胺（Sulfo-NHS）、酰肼、異氰酸酯中的一種；交聯(lián)緩沖液選自MES、MOPSO、MOPS、HEPES緩沖液，pH在6.0～8.0之間。

2.根據(jù)權利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述電解質選自氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂或硫酸鎂；

所述抗人胃蛋白酶原Ⅰ抗體選自兔抗人、山羊抗人、綿羊抗人、鼠抗人、雞抗人、鴨抗人。

3.根據(jù)權利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑1中，緩沖液緩沖能力為調節(jié)pH在7.0～9.0之間，濃度范圍為10～100mmol/L；乳糜消除劑為脂肪酶，濃度范圍5～50KU/L；電解質為氯化鈉，濃度范圍為1％～5％；促凝劑為PEG-6000，濃度范圍為2%～6%；穩(wěn)定劑為牛血清蛋白，濃度范圍是0.5%～5%；表面活性劑為吐溫20，濃度范圍為0.1%～1.0%；防腐劑濃度范圍為0.05%～0.1%。

4.根據(jù)權利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑2中，緩沖液緩沖能力為調節(jié)pH在7.0～9.0之間，濃度范圍為10～100mmol/L；抗人胃蛋白酶原Ⅰ抗體為鴨抗人IgY抗體；膠乳顆粒表面修飾羧基，化學交聯(lián)劑為碳化亞胺，交聯(lián)緩沖液為HEPES緩沖液，其致敏的抗體膠乳顆粒濃度范圍為0.5～5mg/ml；防腐劑濃度范圍為0.05%～0.1%。

5.根據(jù)權利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于，所述校準品中，胃蛋白酶原Ⅰ抗原來源于自人體體液提取、純化而得的天然胃蛋白酶原Ⅰ抗原，或自胃癌細胞株培養(yǎng)、純化而得的胃蛋白酶原Ⅰ抗原，其純度≥95％，含量為0～200ng/ml；人血清比例為5%；緩沖液的濃度范圍為10～100mmol/L，pH為6.5～8.5；電解質為氯化鈉，濃度范圍為1%～5%；穩(wěn)定劑的濃度范圍為0.5～5%；防腐劑的濃度范圍為0.01%～0.1%。

6.根據(jù)權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑2中，緩沖液緩沖能力為調節(jié)pH在7.0～9.0之間，濃度范圍為10～100mmol/L；抗人胃蛋白酶原Ⅰ抗體為鴨抗人IgY抗體；膠乳顆粒表面修飾羧基，化學交聯(lián)劑為碳化亞胺，交聯(lián)緩沖液為HEPES緩沖液，其致敏的抗體膠乳顆粒濃度范圍為0.5～5mg/ml；防腐劑濃度范圍為0.05%～0.1%。

7.根據(jù)權利要求6所述的試劑盒，其特征在于所述校準品中，胃蛋白酶原Ⅰ抗原來源于自人體體液提取、純化而得的天然胃蛋白酶原Ⅰ抗原，或自胃癌細胞株培養(yǎng)、純化而得的胃蛋白酶原Ⅰ抗原，其純度≥95％，含量為0～200ng/ml；人血清比例為5%；緩沖液的濃度范圍為10～100mmol/L，pH為6.5～8.5；電解質為氯化鈉，濃度范圍為1%～5%；穩(wěn)定劑的濃度范圍為0.5～5%；防腐劑的濃度范圍為0.01%～0.1%。