[發(fā)明專利]一種誘導(dǎo)水稻防衛(wèi)反應(yīng)的蛋白、其編碼基因、制備方法和用途在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410010747.5 | 申請日： | 2014-01-09 |
| 公開（公告）號： | CN103789323A | 公開（公告）日： | 2014-05-14 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 陳華民;劉瑩;田芳;于清;何晨陽 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所 |
| 主分類號： | C12N15/29 | 分類號： | C12N15/29;C07K14/415;C12N15/70;A01N57/16;A01N47/44;A01P1/00;A01P3/00 |
| 代理公司： | 北京瑞恒信達知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11382 | 代理人： | 李渤;張偉 |
| 地址： | 100094 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 誘導(dǎo) 水稻 防衛(wèi) 反應(yīng) 蛋白 編碼 基因 制備 方法 用途 | ||
1.一種植物免疫活性物質(zhì)的編碼基因，其特征在于，所述編碼基因具有如SEQ?ID?NO.1所示的核苷酸序列。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的編碼基因，其特征在于，所述編碼基因具有如SEQ?ID?NO.2所示的核苷酸序列；
優(yōu)選地，所述編碼基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1或SEQ?ID?NO.2所示。
3.一種用于誘導(dǎo)水稻防衛(wèi)反應(yīng)的蛋白，其特征在于，所述蛋白具有如SEQ?ID?NO.7所示的氨基酸序列；
優(yōu)選地，所述蛋白的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.7所示。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的蛋白的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟：
（1）獲取根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的編碼基因；
（2）使用步驟（1）得到的編碼基因構(gòu)建蛋白表達載體，并將其轉(zhuǎn)化大腸桿菌；
（3）誘導(dǎo)步驟（2）得到的經(jīng)轉(zhuǎn)化的大腸桿菌表達所述蛋白。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（1）包括：
以燕麥嗜酸菌Acidovorax?avenae?CGMCC?No.8661的基因組DNA為模板，采用PCR方法擴增根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的編碼基因。
6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（2）包括：
使用限制性內(nèi)切酶BamH?I和Hind?III分別雙酶切步驟（1）得到的編碼基因與載體pET-28a，之后以T4連接酶連接得到的片段，從而構(gòu)建重組蛋白表達質(zhì)粒，然后將其轉(zhuǎn)化到感受態(tài)大腸桿菌菌株中。
7.根據(jù)權(quán)利要求4至6中任一項所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（3）包括：
以0.5mM的IPTG誘導(dǎo)培養(yǎng)步驟（2）得到的經(jīng)轉(zhuǎn)化的大腸桿菌BL21，得到51kD的蛋白；
優(yōu)選地，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)的條件為10℃，轉(zhuǎn)速150rpm。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的編碼基因或者根據(jù)權(quán)利要求3所述蛋白在制備植物免疫制劑中的用途。
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