[發(fā)明專利]一種從黃乳海參提取海參精多糖的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410009973.1 | 申請日: | 2014-01-09 |
| 公開(公告)號: | CN103755826A | 公開(公告)日: | 2014-04-30 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 李鵬程;李榮鋒;于華華;劉松;邢榮娥;薛偉;岳洋 | 申請(專利權(quán))人: | 中國科學(xué)院海洋研究所 |
| 主分類號: | C08B37/00 | 分類號: | C08B37/00 |
| 代理公司: | 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002 | 代理人: | 周秀梅;李穎 |
| 地址: | 266071*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 海參 提取 多糖 方法 | ||
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及生物技術(shù),具體的說是一種從黃乳海參(Holothuia?fuscogliva)提取海參精多糖的方法。
背景技術(shù)
黃乳海參(Holothuia?fuscogliva),屬棘皮動物門(Echinodermata),海參綱(Holothuroidea),楯手目(Aspidochirotida),海參科(Holothuriidae),海參屬(Holothuria)。多分布于西沙群島和新喀里多尼亞;生活在珊珊礁內(nèi),水深約10-45m;大形種,長度可達500mm,寬130mm。體壁厚而粗糙。口腹位,周圍有疣襟部,具觸手20個。背面散布很小的疣足和管足,身體兩側(cè)各有5-6個很大的乳房狀突起。體壁內(nèi)骨片豐富,包括桌形體和扣狀體。桌形體有兩種:一種底盤邊緣平滑,塔部頂端齒少;另一種桌形體底盤邊緣有瘤狀突起,頂端齒多。有的桌形體大,有立柱5-6個,頂端齒多,幾乎把整個盤都蓋滿。扣狀體有的簡單,有的復(fù)雜,形成有孔中空紡錘形穿孔體。背面灰褐色,并帶小的白色斑塊,兩側(cè)有大的白色斑塊;腹面為淺的栗子褐色。
海參多糖主要存在于海參體壁中,是海參體壁的重要功效成分。目前發(fā)現(xiàn)存在于海參體壁的多糖主要分兩類:一類是海參糖胺聚糖,由N-乙酰氨基半乳糖、D-葡萄糖醛酸、L-巖藻糖和硫酸酯基的重復(fù)單位組成,另一類是海參巖藻多糖,由L-巖藻糖構(gòu)成,分別稱為海參硫酸軟骨素和海參巖藻聚糖硫酸酯,兩者的組成糖基不同,但糖鏈上都有部分羥基發(fā)生硫酸酯化。海參多糖具有非常多的生物活性例如抗腫瘤活性、抗凝血活性、抗氧化活性、提高免疫力、降血脂、抗衰老、促進干細胞增殖、抗病毒等。因此,海參多糖在功能性食品、醫(yī)藥方面展現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景,且黃乳海參是大型參,體積大、產(chǎn)量高、營養(yǎng)豐富,研究黃乳海參中多糖的提取制備工藝能夠為海參多糖食用和藥用以及黃乳海參的高值化利用等方面的應(yīng)用提供有力支撐。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種從黃乳海參提取海參精多糖的方法。
為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用的技術(shù)方案為:
一種從黃乳海參提取海參精多糖的方法,將去除內(nèi)臟、破壁后的海參經(jīng)酶解攪拌離心,酶解上清液中加入乙醇并離心收集,收集沉淀得海參粗多糖;海參粗多糖溶解后調(diào)節(jié)至堿性,而后加入H2O2反應(yīng)至乳白色,冷卻、離心上清液調(diào)節(jié)至酸性,離心向上清液中加入KAc后靜置,沉淀用乙醇洗滌后冷凍干燥即得到海參精多糖。
將去除內(nèi)臟的海參體壁建成小塊并磨成粉末,每克海參干粉中加入10-30mL,0.1M?pH6.9NaAc,5mM?EDTA,5mM半胱氨酸和50-100mg木瓜蛋白酶,于60℃下攪拌反應(yīng)24h-36h,反應(yīng)后5000-7000rpm離心5-15min,取海參酶解上清液;待用。
向海參酶解上清液中加入其2-3倍體積的95%乙醇,4℃靜置12-36h,5000-7000rpm離心5-15min取沉淀;沉淀用95%乙醇洗滌2-4次,冷凍干燥后即得海參粗多糖。
所述海參粗多糖經(jīng)水溶解,溶解液用KOH調(diào)節(jié)pH至9-11,然后加入海參粗多糖溶液的1/7-1/5體積30%H2O2,50-60℃反應(yīng)4-6h至反應(yīng)液為乳白色;然后將反應(yīng)液冷卻后5000-7000rpm離心5-15min,收集上清液,待用。
將反應(yīng)至乳白色的反應(yīng)液離心后上清液冷卻至0℃,并用HCl調(diào)節(jié)pH至1-3,而后5000-7000rpm離心5-15min,收集上清液并加入KAc至終濃度為1.0-1.5M,4℃靜置12-36h,5000-7000rpm離心5-15min,將沉淀分別用95%和100%乙醇洗滌,冷凍干燥即可得到海參精多糖。
本發(fā)明的優(yōu)點:
1.本發(fā)明是一種簡單、快速制備高品質(zhì)海參精多糖的方法,適合工業(yè)化生產(chǎn)。
2.本發(fā)明獲得的海參精多糖分子量低,生物活性強。
附圖說明
圖1為本發(fā)明實施例提供的黃乳海參精多糖的單糖組分分析圖。
圖2本發(fā)明實施例提供黃乳海參精多糖HPLC分子量測定圖。
圖3本發(fā)明實施例提供的紅外光譜測定圖。
具體實施例
實施例1:
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