[發(fā)明專利]一種重組菌株與制備堿性β-甘露聚糖酶的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410008696.2
• 申請(qǐng)日: 2014-01-08
• 公開（公告）號(hào): CN104762243A
• 公開（公告）日: 2015-07-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 薛燕芬;陶勇;馬延和
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院微生物研究所
• 主分類號(hào): C12N1/21
• 分類號(hào): C12N1/21;C12N15/70;C12N9/42;C12R1/19
• 代理公司: 北京潤(rùn)平知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11283
• 代理人: 李婉婉;張苗

1.一種重組菌株，其特征在于，該重組菌株為含有編碼堿性β-甘露聚糖酶的基因的重組大腸桿菌，且所述基因的堿基序列如SEQ?ID?NO:1所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組菌株，其中，所述重組菌株的出發(fā)菌株為大腸桿菌BW25113。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的重組菌株，其中，所述重組菌株含有表達(dá)載體，所述表達(dá)載體為在pBAD載體的NcoI酶切位點(diǎn)和XhoI酶切位點(diǎn)之間插入堿基序列如SEQ?ID?NO:1所示的基因而得到的表達(dá)載體。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的重組菌株，其中，所述表達(dá)載體中的啟動(dòng)子為阿拉伯糖誘導(dǎo)型啟動(dòng)子。

5.一種制備堿性β-甘露聚糖酶的方法，其特征在于，該方法包括將權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)所述的重組菌株接種至液體發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵，獲得含有堿性β-甘露聚糖酶的發(fā)酵液。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中，所述發(fā)酵的方式為：在35-38℃下，將所述重組菌株培養(yǎng)至發(fā)酵液的OD₆₀₀值達(dá)45-55，然后，在28-32℃下，往發(fā)酵液中添加阿拉伯糖，繼續(xù)發(fā)酵8-35h。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中，在繼續(xù)發(fā)酵過程中，控制發(fā)酵體系中的溶氧量為30-50%。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中，所述阿拉伯糖的添加量為1.5-2.5g/L發(fā)酵液。