[發(fā)明專利]一種結(jié)締組織病早期肺間質(zhì)病變?cè)\斷試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410008133.3
• 申請(qǐng)日: 2014-01-08
• 公開（公告）號(hào): CN103698508A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳娟;史永紅;王小平;葛勝祥;劉永亮
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 陳娟
• 主分類號(hào): G01N33/535
• 分類號(hào): G01N33/535;G01N33/531
• 代理公司: 廈門市首創(chuàng)君合專利事務(wù)所有限公司 35204
• 代理人: 張松亭

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明具體涉及一種結(jié)締組織病早期肺間質(zhì)病變?cè)\斷試劑盒。

背景技術(shù)

肺間質(zhì)病變（Interstitial?lung?disease，ILD）是由多種原因引起的肺間質(zhì)炎癥性疾病，多緩慢進(jìn)展，逐漸喪失肺泡-毛細(xì)血管功能單位，最終發(fā)展為彌漫性肺纖維化和蜂窩肺，導(dǎo)致呼吸功能衰竭而死亡。臨床早期表現(xiàn)為活動(dòng)后氣促，隨著病變進(jìn)展，表現(xiàn)為呼吸困難，心功能不全及反復(fù)肺部感染等一系列癥狀，它是一組發(fā)病率高預(yù)后差的疾病,其中位生存期僅2-3年。導(dǎo)致肺間質(zhì)病變的有多種疾病，如特發(fā)性間質(zhì)性肺炎(IIP)，其中結(jié)締組織病（CTD）是導(dǎo)致肺間質(zhì)病變的重要病因，結(jié)締組織病肺間質(zhì)病變（CTD-ILD）患者約占呼吸科門診量的15%，50%的初發(fā)肺間質(zhì)病變?yōu)榻Y(jié)締組織病肺間質(zhì)病變。結(jié)締組織病肺間質(zhì)病變是導(dǎo)致結(jié)締組織病患者死亡的主要原因。結(jié)締組織病是一組高發(fā)生率、高致殘率、高死亡率、高醫(yī)療費(fèi)用的慢性疾病，如發(fā)病率占人口3%的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）是結(jié)締組織病中發(fā)病率最高、在我國(guó)其致殘率高達(dá)79.4%的慢性疾病。肺部并發(fā)癥直接導(dǎo)致RA10％至20％的死亡率，其與關(guān)節(jié)外并發(fā)癥充血性心力衰竭的是RA兩個(gè)最重要的導(dǎo)致RA患者過早死亡的原因。然而，如果結(jié)締組織病肺間質(zhì)病變得到早期診斷，及時(shí)治療，預(yù)后將明顯改善。肺間質(zhì)病變的早期發(fā)現(xiàn)和早期治療對(duì)改善患者預(yù)后有重要影響。目前診斷肺間質(zhì)病變主要依靠高分辨率肺CT(HRCT)和肺部活檢、肺泡支氣管灌洗物獲得。HRCT檢測(cè)檢測(cè)方法太昂貴，且不易反復(fù)進(jìn)行，不能發(fā)現(xiàn)早期ILD，不易對(duì)結(jié)締組織病進(jìn)行普查；肺活檢為手術(shù)有創(chuàng)檢查，患者不易接受。肺泡支氣管灌洗物方法，需要借助支氣管鏡方法獲得，病人不易接受；因此早期無臨床癥狀肺間質(zhì)病變患者常因漏診而耽誤治療時(shí)機(jī)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)缺陷，提供一種簡(jiǎn)便、易行、可靠的、利用外周血進(jìn)行檢測(cè)MMP7，IP-10，IFN-γ以診斷結(jié)締組織病早期肺間質(zhì)病變的試劑盒。

本發(fā)明的具體技術(shù)方案如下：

一種結(jié)締組織病早期肺間質(zhì)病變?cè)\斷試劑盒，包括檢測(cè)人外周血液MMP7、IFN-γ和IP-10的檢測(cè)組件。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述檢測(cè)組件為ELISA檢測(cè)組件或電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)組件。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述ELISA檢測(cè)組件為雙抗體夾心ELISA檢測(cè)組件。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，包括檢測(cè)人MMP7的第一ELISA檢測(cè)組件、檢測(cè)IFN-γ的第二ELISA檢測(cè)組件和檢測(cè)IP-10的第三ELISA檢測(cè)組件。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述第一ELISA檢測(cè)組件包括包被有MMP7一抗的96孔檢測(cè)板和第一酶標(biāo)二抗，所述MMP7一抗為鼠抗人MMP-7-IgG，所述第一酶標(biāo)二抗為鼠抗人MMP-7-IgG的HRP標(biāo)記抗體。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述第二ELISA檢測(cè)組件包括包被有IFN-γ一抗的96孔檢測(cè)板和第二酶標(biāo)二抗，所述IFN-γ一抗為鼠抗人IFN-γ-IgG，所述第二酶標(biāo)二抗為鼠抗人IFN-γ-IgG的HRP標(biāo)記抗體。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述第三ELISA檢測(cè)組件包括包被有IP-10一抗的96孔檢測(cè)板和第三酶標(biāo)二抗，所述IP-10一抗為鼠抗人IP-10-IgG，所述第二酶標(biāo)二抗為鼠抗人IP-10-IgG的HRP標(biāo)記抗體。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，還包括洗滌液、顯色液和終止液;

所述洗滌液為2%triton的PBS溶液;

所述顯色液包括顯色A液和顯色B液，顯色A液的配方如下：醋酸鈉13.6g，檸檬酸1.6g，30%雙氧水為溶劑，定容500mL；顯色B液的配方如下：乙二胺四乙酸二鈉0.2g，檸檬酸0.95g，甘油50mL，TMB0.15g，蒸餾水為溶劑，定容500mL；

所述終止液為2mol/L的硫酸溶液。

本發(fā)明的有益效果是：

1、本發(fā)明提供了一種靈敏、安全、可靠、易操作的商品化試劑盒，定量測(cè)定人血清中特定蛋白細(xì)胞因子、趨化因子MMP7，IP-10，IFN-r水平，有助于診斷結(jié)締組織病早期肺間質(zhì)病變；

2、與傳統(tǒng)肺間質(zhì)病變?cè)\斷方法高分辨率肺CT、肺功能檢測(cè)及肺泡支氣管灌洗物相比較，外周血檢測(cè)方法具有準(zhǔn)確、快速、經(jīng)濟(jì)的優(yōu)點(diǎn)。

附圖說明

圖1為本發(fā)明實(shí)施例1初篩階段MMP7的檢測(cè)結(jié)果圖；

圖2為本發(fā)明實(shí)施例1初篩階段IFN-γ的檢測(cè)結(jié)果圖；

圖3為本發(fā)明實(shí)施例1初篩階段IP-10的檢測(cè)結(jié)果圖；