[發(fā)明專利]相轉(zhuǎn)變分離純化溫敏性羥丁基殼聚糖的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410007429.3
• 申請日: 2014-01-08
• 公開（公告）號: CN104761657B
• 公開（公告）日: 2017-09-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 魏長征;奚宏偉;侯春林
• 申請（專利權(quán)）人: 上海其勝生物制劑有限公司
• 主分類號: C08B37/08
• 分類號: C08B37/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種溫敏性羥丁基殼聚糖的分離純化方法，該方法適用于溫敏性羥丁基殼聚糖衍生物的基礎(chǔ)研究和大規(guī)模生產(chǎn)，該方法的使用擺脫了傳統(tǒng)的濃縮沉淀方法無法有效沉淀的弊端，使溫敏性羥丁基殼聚糖的大規(guī)模生產(chǎn)和質(zhì)量控制成為可能。

背景技術(shù)

溫敏性殼聚糖是一類對外界溫度的變化刺激可以做出智能性響應(yīng)的一類殼聚糖衍生物，其主要的特點是低溫下為流動的液體，而當(dāng)溫度升高時，溫敏性羥丁基殼聚糖可以發(fā)生智能性的相轉(zhuǎn)變，轉(zhuǎn)化為不流動的凝膠；其發(fā)生相轉(zhuǎn)變的溫度被稱為最低臨界溶液溫度，該溫度可以從10-37℃不等，且該溫度可以調(diào)節(jié)。

溫敏性殼聚糖發(fā)生相轉(zhuǎn)變的機理主要是溶液體系中的各種物理作用力之間的動態(tài)平衡。即溫敏性殼聚糖溶液體系中之間存在親水-疏水、氫鍵以及范德華力等多種物理作用力，溶液體系中這三種作用力之間存在著一個動態(tài)平衡，共同維持著殼聚糖溶液體系的穩(wěn)定，當(dāng)溫度升高時，氫鍵作用力被破壞，親水-疏水作用占據(jù)主導(dǎo)地位，因而動態(tài)平衡被打破，溶液體系轉(zhuǎn)變?yōu)槟z體系。

目前溫敏性殼聚糖主要包括羥丁基殼聚糖、殼聚糖-甘油磷酸鹽以及PEG-殼聚糖等，在國內(nèi)也有諸多專利開展上述工作，其中研究的熱點為羥丁基殼聚糖，其主要原因是殼聚糖-甘油磷酸鹽體系的最低臨界溶液溫度過高，不適合體內(nèi)的拓展應(yīng)用，且溶液-凝膠過程不可回復(fù)。羥丁基殼聚糖作為一種新型的殼聚糖衍生物，最近得到了飛速的發(fā)展，“一種溫敏性殼聚糖衍生物-羥丁基殼聚糖的制備方法”（ZL200810033699.6）、“一種預(yù)防腦脊液漏的醫(yī)用級溫敏性羥丁基殼聚糖封閉劑的制備方法”（201110430139.6）等多項專利均涉及到羥丁基殼聚糖的制備及其應(yīng)用。

羥丁基殼聚糖為一種兩親性高分子多糖，由于分子鏈中引入了親水性基團-羥丁基，其水溶性明顯改善，且乳化性能也得到了極大的改善。在羥丁基殼聚糖的產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化過程中，產(chǎn)品的安全性是最重要的控制指標(biāo)之一，而傳統(tǒng)的工藝是對其進行分離純化去除產(chǎn)品中的有毒雜質(zhì)，最常用的方法為酒精分級沉淀，而低濃度下的羥丁基殼聚糖在酒精的溶解度大大提高限制了該方法的應(yīng)用，因而針對上述難題提供一套科學(xué)完整的分離純化方案是羥丁基殼聚糖產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化中首當(dāng)其沖的問題。而在國內(nèi)公開或授權(quán)的專利中并沒有出現(xiàn)專門針對溫敏性羥丁基殼聚糖及其衍生物純化的發(fā)明專利。

本發(fā)明專利為我們申請的有關(guān)羥丁基殼聚糖的系列專利之一，主要是為了解決產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化過程中的實際難題，加強產(chǎn)品的質(zhì)量控制，提高產(chǎn)品的安全性。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明是針對低濃度溫敏性羥丁基殼聚糖溶于酒精這一特殊現(xiàn)象，提供一套分離純化的工藝流程。

為了實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明提供一種純化溫敏性羥丁基殼聚糖的方法具體步驟如下：

第一步：分別配制不同濃度梯度的NaCl溶液，即低、中、高濃度，待用；

第二步：將濃度為0.1-5%（m/v）的溫敏性羥丁基殼聚糖加入濃度為1-5%的NaCl溶液充分?jǐn)嚢柽M行初級沉淀，；

第三步：將第二步得到的沉淀進行粉碎處理，然后放入濃度為10-15%的NaCl溶液中繼續(xù)攪拌，進行二級沉淀；

第四步：將第三步得到的沉淀轉(zhuǎn)入濃度為20-25% 的NaCl溶液中繼續(xù)攪拌脫水進行三級沉淀，得到白色狀沉淀，然后結(jié)固液分離，得到粗品；

第五步： 將得到的粗品通過有機溶劑的梯度洗脫去除NaCl，梯度分別為70%、80%、90%、100%得到粉狀去鹽沉淀；

第六步：粉狀去鹽沉淀40℃真空干燥去除有機溶劑和水分，得到溫敏性羥丁基殼聚糖精制干粉。

通過上述步驟，可以有效去除小分子片段及副產(chǎn)物雜質(zhì)，提高溫敏性羥丁基殼聚糖的純度。

本發(fā)明的優(yōu)點：

1.本發(fā)明提供的方法解決了溫敏性羥丁基殼聚糖低濃度溶液無法有機溶劑沉淀的難題

2.本發(fā)明提供的方法充分利用溫敏性羥丁基殼聚糖的相轉(zhuǎn)變機理，通過梯度NaCl溶液進行分級沉淀，達到了濃縮和純化的目的。

3.本發(fā)明提供的方法提高了溫敏性羥丁基殼聚糖的分子量并縮小了分子量的分布，達到了純化的效果。

說明書附圖

圖1 純化后的溫敏性羥丁基殼聚糖FT-IR圖譜

圖2 未純化前的溫敏性羥丁基殼聚糖的分子量及其分子量分布

圖3 純化后的溫敏性羥丁基殼聚糖的分子量及其分子量分布。

具體實施方式

現(xiàn)結(jié)合實施例，對本發(fā)明作了詳細(xì)描述：

實施例一