[發明專利]一種馬尾松根際解磷真菌瓜納卡斯特青霉JP-NJ2及其應用

有效

• 申請號: 201410004110.5
• 申請日: 2014-01-03
• 公開（公告）號: CN103789214A
• 公開（公告）日: 2014-05-14
• 發明（設計）人: 吳小芹;喬歡;魏偉;葉建仁
• 申請（專利權）人: 南京林業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/04;A01P21/00;B09C1/10;C12R1/80
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 邱興天

技術領域

本發明屬于微生物技術領域，具體涉及一種馬尾松根際解磷真菌瓜納卡斯特青霉（Penicillium?guanacastense）JP-NJ2及其應用。

背景技術

馬尾松是我國重要的造林先鋒樹種。磷是植物生長發育所需的大量和限制性元素之一，磷可以加速苗木的生長，并在一定程度上提高苗木的抗逆性和抗病性。由于土壤中磷素的供應不足，導致我國南方地區許多馬尾松人工林生長不良，生物量下降，衰退現象較嚴重。在自然條件下，土壤中90%以上的磷為無效磷，植被難以直接吸收利用，施入的磷肥又多與土壤中金屬離子結合形成難溶性磷酸鹽，同時磷肥過多施用會導致水體富營養化，破壞生態平衡。目前，通過以解磷微生物肥料來提高林地土壤磷的利用率成為人們關注的熱點之一。

土壤中能夠將植物難以吸收利用的磷轉化為可吸收利用形態的微生物稱為解磷微生物（phosphate-solubilizing?microorganisms，PSMs），其種類包括真菌、細菌及放線菌等。研究表明解磷真菌（Solubilizing?phosphorus?fungus）在數量和種類上都少于解磷細菌，但解磷真菌的溶磷能力一般要強于細菌，甚至是細菌的幾十倍，且遺傳性狀更加穩定，同時解磷真菌還可在一定程度上促進植株生長，在微生物肥料應用方面具有極大潛力。然而目前對解磷真菌的研究很少，且主要篩選自農作物根際土壤，從林地生態系統進行篩選研究及報道較少。目前，如何挖掘土壤磷庫資源，提高土壤中磷的利用效率是我國林業生產中急需解決的問題。因此，從林地根際土壤中篩選高效解磷真菌，是改善林地土壤養分，促進松樹生長的一條有效途徑。

發明內容

發明目的：針對現有技術中存在的不足，本發明的目的是提供一種馬尾松根際解磷真菌瓜納卡斯特青霉JP-NJ2，其具有較強的解磷能力。本發明的另一目的是提供一種上述馬尾松根際解磷真菌瓜納卡斯特青霉JP-NJ2在促進馬尾松苗生長中的應用。

技術方案：為了實現上述發明目的，本發明采用的技術方案如下：

一種馬尾松根際解磷真菌，其分類命名為瓜納卡斯特青霉（Penicillium?guanacastense）JP-NJ2，已保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號CCTCCNO：M2013476，保藏日期為：2013年10月17日，保藏地址為：中國武漢，武漢大學。

所述的馬尾松根際解磷真菌瓜納卡斯特青霉JP-NJ2在促進馬尾松苗木生長中的應用。

所述的馬尾松根際解磷真菌瓜納卡斯特青霉JP-NJ2在溶解難溶性無機磷酸鹽及難溶性有機磷中的應用。

所述的無機磷酸鹽包括磷酸鋁、磷酸鐵和磷酸鈣。

所述的有機磷包括卵磷脂和草甘膦。

瓜納卡斯特青霉JP-NJ2，是從江蘇省林業科學研究院內50年生馬尾松的根際土壤中篩選獲得的。

JP-NJ2的生物學特征：JP-NJ2菌株在CYA培養基上25℃培養7d，菌落直徑33mm左右，近于平坦，質地呈絮狀兼絨狀，有時有規則的放射狀皺紋，分生孢子面呈灰綠色，近于煙灰色，中間部分呈現橘褐色，滲出液少量，黃褐色（圖1）；菌落反面呈橘黃色（圖2）。分生孢子梗具帚狀分枝，分生孢子球形或近球形。

菌落在NBRIP培養基上，25℃培養7d，菌落直徑20-23mm之間，溶磷圈直徑32-38mm之間。菌落較為平坦，質地呈絮狀，中間呈煙灰色；菌落中間菌絲密集，有大量孢子產生，菌落外圍分生孢子較少，較稀疏，呈現橘黃色（圖3）；整個菌落反面呈橘黃色（圖4）。

JP-NJ2菌株18SrDNA?ITS序列，見SEQ?ID?NO.1所示。將序列與GenBank數據庫中的序列進行BLAST比對。結果表明，JP-NJ2菌株與Penicillium?guanacastense的相似度為95%。結合形態特征和18SrDNA?ITS序列分析，JP-NJ2菌株鑒定為瓜納卡斯特青霉（Penicillium?guanacastense）JP-NJ2。

上述的瓜納卡斯特青霉JP-NJ2對磷酸三鈣具有很強的解磷能力。菌劑盆栽接種試驗表明，JP-NJ2菌株可將土壤中難溶性無機磷轉變為有效態磷供馬尾松苗木吸收利用，明顯促進馬尾松苗木的生長。