[發明專利]短短芽孢桿菌菌株、其菌株的培養方法及其應用

有效

• 申請號: 201410003514.2
• 申請日: 2014-01-03
• 公開（公告）號: CN103710293A
• 公開（公告）日: 2014-04-09
• 發明（設計）人: 周禮紅;廖瀚峰;丁旭
• 申請（專利權）人: 周禮紅
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F11/02;B09B3/00;C12R1/01
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 吳開磊

技術領域

本發明涉及微生物與環境工程領域，具體而言，涉及短短芽孢桿菌菌株、其菌株的培養方法以及應用。

背景技術

隨著人們環保意識的增強，對環境質量的要求也越來越高，對因惡臭所帶來的污染也更加敏感。產生惡臭的物質不僅可使人產生不快和厭惡感，而且許多惡臭物質還危害著人們的健康甚至生命，因而國外有些國家較早地就開始了該方面的研究，對惡臭實行專項立法，把惡臭污染從大氣污染中單獨分離出來作為公害的一種。

微生物除臭技術是利用能夠轉化或者降解惡臭物質的特殊微生物的高效吸附、吸收和降解作用對惡臭氣體進行凈化，化惡臭為無臭。不含任何化學藥品，也不含轉基因產品成份，不會造成二次污染，代表著生物環保產業發展的方向。

發明內容

本發明的目的在于一種短短芽孢桿菌菌株、其菌株的培養方法及其應用，以解決上述的問題。

在本發明的實施例中提供了一種短短芽孢桿菌（Brevibacillus?brevis）菌株，其保藏名稱為短短芽孢桿菌50L-3a，保藏號為CCTCCNO：M2013597，于2013年11月24日保存于中國典型培養物保藏中心，地址：中國.武漢.武漢大學，郵編：430072。

本發明還提供了所述的短短芽孢桿菌菌株的培養方法，將所述短短芽孢桿菌菌株接種于LB培養基；培養溫度為4-61℃。

優選地，所述LB培養基為LB固體培養基，培養溫度為49-51℃。

優選地，所述LB培養基為LB液體培養基，培養基轉速為80-180rpm。

進一步地，所述培養溫度為49-51℃。

進一步地，所述培養基轉速為160rpm。

此外，本發明還提供了所述的短短芽孢桿菌菌株在除臭方面的應用。

優選地，短短芽孢桿菌菌株在畜禽糞便除臭的應用。

進一步地，所述畜禽包括：雞、鴨、鵝、豬、牛、羊、馬。

優選地，短短芽孢桿菌菌株在生活垃圾除臭的應用。

進一步地，所述生活垃圾包括：城市生活陳腐垃圾和城市生活新鮮垃圾。

本發明實施例提供的短短芽孢桿菌菌株、其菌株的培養方法及其應用，將得到的菌液接種到除臭物上，具有較強的除臭能力，利于微生物除臭的廣泛應用。

具體實施方式

下面通過具體的實施例子對本發明做進一步的詳細描述。

本發明實施例中提供了短短芽孢桿菌菌株、其菌株的培養方法及其應用。

實施例1

一、菌株的分離

（1）培養基

LB固體培養基：酵母提取物5g，蛋白胨10g，氯化鈉5g，瓊脂20g，蒸餾水定容至1000ml，pH7.2。

LB液體培養基：酵母提取物5g，蛋白胨10g，氯化鈉5g，蒸餾水定容至1000ml，pH7.2。

LB培養基為微生物培養常用的培養基，各營養物質若是有其他等同物質的替換或是其含量的變化只要在合理的范圍，均在本發明的保護范圍內。

（2）菌株的獲得

a、從中國貴州省貴陽市的一個垃圾堆取20g陳腐垃圾樣品放于盛有80ml無菌水并帶有玻璃珠的三角瓶中，50℃±1℃，160rpm搖床振蕩24h，靜置30min；

b、取上清液稀釋10000倍，然后取3ml轉入裝有27ml液體LB的三角瓶中，50℃±1℃，60rpm振蕩培養8h；

c、取0.1ml培養液涂布LB固體平板，50℃±1℃恒溫培養48h；

d、挑取單菌落轉接斜面LB固體培養基，50℃±1℃恒溫培養。經過多次重復固體培養基純化步驟，得到一種純化的菌株50L-3a。

（二）形態特征：

將菌株50L-3a接種到LB固體培養基上，50℃±1℃恒溫培養24h，菌落近圓形，0.7-1.1cm，扁平，表面光滑，邊緣整齊，菌落顏色乳白色，不透明；革蘭氏染色為陽性，10×100倍生物顯微鏡下觀察，單個菌體形狀為桿狀，大小為0.6×3.5μm，芽孢中生或端生，芽孢橢圓形，運動性為陽性。

（三）生理生化特征

1、V-P試驗培養基：蛋白胨5g，葡萄糖5g，磷酸氫二鉀5g，蒸餾水定容至1000ml，pH7.2，每管分裝5ml，115℃滅菌30min

將培養24h的菌株50L-3a培養液與40%氫氧化鈉等量相混，加入0.3g肌酸粉末，10min后觀察結果，培養液沒有明顯變化，結果為陰性。