[發明專利]一種黃曲霉毒素的測定方法

有效

• 申請號: 201410001661.6
• 申請日: 2014-01-03
• 公開（公告）號: CN103954714A
• 公開（公告）日: 2014-07-30
• 發明（設計）人: 丁紅梅;施炎炎;陳丹丹;張霞;朱云;楊俊;金維列;胡楠;王琳琳;陸陽;陳飛
• 申請（專利權）人: 南通市產品質量監督檢驗所
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 北京一格知識產權代理事務所(普通合伙) 11316
• 代理人: 滑春生

1.一種黃曲霉毒素的測定方法，包括樣品提取、標準溶液測定和樣品測定步驟，其特征在于：所述樣品提取步驟采用乙腈-水的提取液提取，其中乙腈和水的體積比為84:16；所述標準溶液測定步驟中取黃曲霉毒素B₁、G₁標準儲備液用乙腈定容，制備標準系列溶液，處理后利用液相色譜儀進行測定；所述樣品檢測采用高效液相色譜法，利用多功能凈化柱檢測樣品中的黃曲霉毒素。

2.根據權利要求1所述的一種黃曲霉毒素的測定方法，其特征在于：所述樣品提取步驟具體為稱取樣品10g，精確至0.0001g，加入乙腈-水的提取液攪拌30分鐘，其中乙腈和水的體積比為84:16，然后用定性濾紙過濾。

3.根據權利要求1所述的一種黃曲霉毒素的測定方法，其特征在于：所述標準溶液測定步驟具體為取黃曲霉毒素B₁、G₁標準儲備液10μg/mL，用乙腈定容至5mL，混勻，2～8℃保存三個月；使用時乙腈配成0.025μg/mL、0.05μg/mL、0.1μg/mL、0.15μg/mL、0.2μg/mL、0.25μg/mL系列標準溶液，吸取標準系列溶液各200μL，在60℃水浴下氮氣吹干，加200mL正己烷和100mL三氯乙酸混勻，30s后于40℃烘箱衍生15min，室溫下放入干燥器中1min后以200uL水-乙腈溶解，混勻后全部進自動進樣瓶中，利用液相色譜儀進行測定。

4.根據權利要求1所述的一種黃曲霉毒素的測定方法，其特征在于：所述樣品測定步驟采用高效液相色譜法檢測樣品中的黃曲霉毒素；

色譜條件：色譜柱：Agilent?SB?C-18（25cm×4.6mm）；流動相：體積百分比為85%的乙腈和15%的水；柱溫：30℃，進樣量：25μL；流速：1.0mL/min，熒光檢測器：激發波長：360nm，發射波長：440nm；

取8mL提取過濾液至Mycosep^TM228多功能凈化柱，凈化柱的收集池內轉移2mL凈化液到衍生瓶中，60℃下氮吹后，加200mL正己烷和100mL三氯乙酸混勻，30s后于40℃烘箱衍生15min，室溫下放入干燥器中1min后以200μL水-乙腈溶解，混勻后全部進自動進樣瓶中，利用液相色譜儀進行測定。

5.根據權利要求1所述的一種黃曲霉毒素的測定方法，其特征在于：黃曲霉毒素的含量通過如下方法計算：黃曲霉毒素按照G₁、B₁?的順序出峰，以標準系列的峰面積對濃度分別繪制每種黃曲霉毒素的標準曲線，標準曲線的相關系數r大于0.995，試樣通過與標準色譜圖保留時間的比較確定每一種黃曲霉毒素的峰，根據每種黃曲霉毒素的標準曲線及試樣中的峰面積計算試樣中各種黃曲霉毒素含量：

其中：X——試樣中每種黃曲霉毒素含量，單位為μg/kg；

A——試樣按外標法在標準曲線中對應的濃度，單位為μg/mL；

V——試樣提取過程中提取液的體積，單位為mL；

m——試樣的取樣量，單位為g；

f——濃縮倍數。

6.根據權利要求1所述的一種黃曲霉毒素的測定方法，其特征在于：所述步驟（1）中多功能凈化柱為Mycosep^TM228多功能凈化柱。