[發(fā)明專利]治療性凋亡細胞制劑、其制備方法以及其用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201380071109.8
• 申請日: 2013-12-05
• 公開（公告）號: CN105102612B
• 公開（公告）日: 2020-11-17
• 發(fā)明（設計）人: D·梅沃拉克;I·賴納
• 申請（專利權(quán)）人: 恩立夫克治療有限責任公司
• 主分類號: C12N5/0783
• 分類號: C12N5/0783;C12N5/0786;C12N5/078;A61K35/17;A61K35/15;A61P37/06;A61P29/00;A61P1/00;A61P1/04
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 王健

1.一種穩(wěn)定并且高產(chǎn)率的早期凋亡單個核細胞富集的細胞群體，其包含經(jīng)受凋亡誘導的初始數(shù)目的細胞中至少40％單個核細胞處于早期凋亡狀態(tài)的產(chǎn)率，其中所述早期凋亡細胞群體穩(wěn)定至少24小時并且沒有細胞集合體，且其中所述穩(wěn)定的早期凋亡細胞群體的制備包括以下步驟：

(a)將單個核細胞富集的細胞群體在包含抗凝劑的冷凍培養(yǎng)基中冷凍；

(b)使所述單個核細胞富集的細胞群體解凍；以及

(c)在所述解凍的單個核細胞富集的細胞群體中誘導凋亡，所述誘導包括在包含甲潑尼龍和抗凝劑的培養(yǎng)基中孵育所述群體，所述細胞群體包含不超過15％的CD15^高表達細胞。

2.如權(quán)利要求1所述的細胞群體，所述細胞群體包含選自由以下各項組成的組的至少一種細胞類型：淋巴細胞、單核細胞以及自然殺傷細胞。

3.如權(quán)利要求1至2中任一項所述的細胞群體，其中所述單個核細胞是通過白細胞分離術(shù)來采集的。

4.如權(quán)利要求1至2中任一項所述的細胞群體，其中所述單個核細胞對需要所述細胞群體的受試者而言是自體的。

5.如權(quán)利要求1至2中任一項所述的細胞群體，其中所述單個核細胞對需要所述細胞群體的受試者而言是同種異基因的。

6.一種藥物組合物，所述藥物組合物包含如權(quán)利要求1至5中任一項所述的細胞群體。

7.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其中所述組合物還包含抗凝劑。

8.一種用于制備藥物組合物的方法，所述藥物組合物包含穩(wěn)定并且高產(chǎn)率的早期凋亡單個核細胞富集的細胞群體，其包含經(jīng)受凋亡誘導的初始數(shù)目的細胞中至少40％單個核細胞處于早期凋亡狀態(tài)的產(chǎn)率，其中所述早期凋亡細胞群體穩(wěn)定至少24小時并且沒有細胞集合體，所述方法包括以下步驟：

(a)將單個核細胞富集的細胞群體在包含抗凝劑的冷凍培養(yǎng)基中冷凍；

(b)使所述單個核細胞富集的細胞群體解凍；以及

(c)在所述解凍的單個核細胞富集的細胞群體中誘導凋亡，所述誘導包括在包含甲潑尼龍和抗凝劑的培養(yǎng)基中孵育所述群體，所述細胞群體包含不超過15％的CD15^高表達細胞。

9.如權(quán)利要求8所述的方法，其中所述單個核細胞是通過白細胞分離術(shù)來采集的。

10.如權(quán)利要求8至9中任一項所述的方法，其中所述單個核細胞對需要所述細胞群體的受試者而言是自體的。

11.如權(quán)利要求8至9中任一項所述的方法，其中所述單個核細胞對需要所述細胞群體的受試者而言是同種異基因的。

12.包含穩(wěn)定并且高產(chǎn)率的早期凋亡單個核細胞富集的細胞群體用于制備藥物組合物的用途，其中所述細胞群體包含經(jīng)受凋亡誘導的初始數(shù)目的細胞中至少40％單個核細胞處于早期凋亡狀態(tài)的產(chǎn)率，其中所述早期凋亡細胞群體穩(wěn)定至少24小時并且沒有細胞集合體，所述藥物組合物用于治療、預防或改善免疫性疾病或炎癥性疾病，且其中所述穩(wěn)定的早期凋亡細胞群體的制備包括以下步驟：

(a)將單個核細胞富集的細胞群體在包含抗凝劑的冷凍培養(yǎng)基中冷凍；

(b)使所述單個核細胞富集的細胞群體解凍；以及

(c)在所述解凍的單個核細胞富集的細胞群體中誘導凋亡，所述誘導包括在包含甲潑尼龍和抗凝劑的培養(yǎng)基中孵育所述群體，所述細胞群體包含不超過15％的CD15^高表達細胞。

13.如權(quán)利要求12所述的用途，其中所述免疫性疾病是GVHD。

14.如權(quán)利要求13所述的用途，其中所述GVHD是高分級GVHD。