[發明專利]鏈霉親和素突變蛋白及其使用方法

有效

• 申請號: 201380070706.9
• 申請日: 2013-11-18
• 公開（公告）號: CN105073770B
• 公開（公告）日: 2019-08-06
• 發明（設計）人: 托馬斯·施密特
• 申請（專利權）人: IBA股份有限公司
• 主分類號: C07K14/36
• 分類號: C07K14/36
• 代理公司: 北京瑞恒信達知識產權代理事務所(普通合伙) 11382
• 代理人: 曹津燕;王瑞琳

1.一種突變蛋白，其選自鏈霉親和素的突變蛋白，其中，所述突變蛋白

(a)包含至少兩個在與氨基酸殘基14至139示于SEQ ID NO:212的野生型鏈霉親和素的氨基酸序列相關的氨基酸位點117至121的區域中的突變，以及

(b)對于包含氨基酸序列Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys(SEQ ID NO:100)的肽配體，具有比以下各蛋白更高的結合親和力

(i)包含氨基酸序列Val⁴⁴-Thr⁴⁵-Ala⁴⁶-Arg⁴⁷(SEQ ID NO:98)的SEQ ID NO:112的鏈霉親和素突變蛋白，或者

(ii)在氨基酸位點44至47包含氨基酸序列Ile⁴⁴-Gly⁴⁵-Ala⁴⁶-Arg⁴⁷(SEQ ID NO:99)的SEQ ID NO:113的鏈霉親和素突變蛋白，或者

(iii)氨基酸殘基示于SEQ ID NO:212的野生型鏈霉親和素，

其中所述突變蛋白在序列位置117至121包含以下氨基酸序列：

如SEQ ID NO:21所示的Tyr¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Phe¹²⁰Met¹²¹，

如SEQ ID NO:22所示的Tyr¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Tyr¹²⁰Ala¹²¹，

如SEQ ID NO:23所示的Ala¹¹⁷---¹¹⁸---¹¹⁹Trp¹²⁰Tyr¹²¹，

如SEQ ID NO:33所示的Tyr¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Gly¹²⁰Phe¹²¹，

如SEQ ID NO:55所示的Gly¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Met¹²⁰Met¹²¹，

如SEQ ID NO:56所示的Glu¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Gly¹²⁰Phe¹²¹，

如SEQ ID NO:57所示的Asp¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Gly¹²⁰Tyr¹²¹，

如SEQ ID NO:58所示的Glu¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Gly¹²⁰Tyr¹²¹，

如SEQ ID NO:59所示的Arg¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Met¹²⁰Met¹²¹，

如SEQ ID NO:60所示的Arg¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Gly¹²⁰Phe¹²¹，

如SEQ ID NO:61所示的Ala¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Pro¹²⁰Ala¹²¹，

如SEQ ID NO:62所示的Ala¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Met¹²⁰Val¹²¹，

如SEQ ID NO:63所示的Gln¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Ser¹²⁰Ala¹²¹，

如SEQ ID NO:64所示的Ala¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Gly¹²⁰Phe¹²¹，

如SEQ ID NO:65所示的Gln¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Met¹²⁰Val¹²¹，

如SEQ ID NO:75所示的Tyr¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Phe¹²⁰Leu¹²¹，

如SEQ ID NO:76所示的Phe¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Phe¹²⁰Leu¹²¹，

如SEQ ID NO:77所示的Tyr¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Leu¹²⁰Trp¹²¹，

如SEQ ID NO:82所示的Thr¹¹⁷---¹¹⁸---¹¹⁹Trp¹²⁰Leu¹²¹，

如SEQ ID NO:83所示的His¹¹⁷---¹¹⁸---¹¹⁹Trp¹²⁰Leu¹²¹，

如SEQ ID NO:84所示的Ile¹¹⁷---¹¹⁸---¹¹⁹Trp¹²⁰Arg¹²¹，

如SEQ ID NO:85所示的His¹¹⁷---¹¹⁸---¹¹⁹Trp¹²⁰Thr¹²¹，

如SEQ ID NO:86所示的Thr¹¹⁷---¹¹⁸---¹¹⁹Trp¹²⁰Arg¹²¹，

如SEQ ID NO:87所示的Ala¹¹⁷---¹¹⁸-_-¹¹⁹Trp¹²⁰Arg¹²¹，

如SEQ ID NO:93所示的Ala¹¹⁷-_-¹¹⁸-_-¹¹⁹Trp¹²⁰Tyr¹²¹，

如SEQ ID NO:94所示的His¹¹⁷---¹¹⁸---¹¹⁹Trp¹²⁰Met¹²¹，

如SEQ ID NO:95所示的His¹¹⁷---¹¹⁸---¹¹⁹Trp¹²⁰Tyr¹²¹，

如SEQ ID NO:96所示的Glu¹¹⁷---¹¹⁸---¹¹⁹Trp¹²⁰Tyr¹²¹，或

如SEQ ID NO:97所示的Gln¹¹⁷---¹¹⁸---¹¹⁹Trp¹²⁰Tyr¹²¹。