[發明專利]用于使用發光檢測生物分子的方法和試劑

在審

• 申請號: 201380070287.9
• 申請日: 2013-12-12
• 公開（公告）號: CN105051539A
• 公開（公告）日: 2015-11-11
• 發明（設計）人: 曼紐爾·阿圖羅·洛佩斯金特拉;費爾南多·多明格斯普恩特;喬斯·M·希梅諾多納克
• 申請（專利權）人: 納米隙亞納米粉末有限公司;潘加埃亞生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/542
• 分類號: G01N33/542;G01N33/58
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 鄭斌;彭鯤鵬

1.復合物，其包含生物素結合分子和通式(I)的至少兩個不同尺寸的金屬原子量子簇(AQC)M_n和M’_n’的電荷轉移復合物(CTC)：

M_n⁺M’_n′^-(I)，

其中

所述金屬AQC的金屬M和M’是相同金屬或不同金屬，

M_n是以其氧化形式M_n⁺存在的較小AQC，

M’_n’是以其還原形式M’_n’^-存在的較大AQC，

M_n⁺和M’_n’^-通過靜電相互作用結合，

n和n′分別為M和M’的金屬原子數目，并且

n小于n′，

其中所述生物素結合分子與所述電荷轉移復合物不共價結合。

2.根據權利要求1所述的復合物，其中所述生物素結合分子是鏈霉親和素或其功能等效變體。

3.根據權利要求1或2所述的復合物，其中所述金屬M和M’獨立地選自過渡金屬或其組合。

4.根據權利要求3所述的復合物，其中所述金屬M和M’獨立地選自過渡金屬Au、Ag、Cu及其組合，更優選Au、Ag及其組合。

5.根據權利要求1至4中任一項所述的復合物，其中n和n′為2至309、2至102、2至55或2至25個金屬原子。

6.根據權利要求1至5中任一項所述的復合物，其中n和n’的差為5至50個原子。

7.根據權利要求1至6中任一項所述的復合物，其中所述電荷轉移復合物還包含與所述原子量子簇M_n和M’_n’連接的ω-羥基酸配體和ω-巰基酸配體。

8.根據權利要求7所述的復合物，其中所述ω-羥基酸具有通式(HO-(CH₂)_m-COOH)，其中m值為2至30，和/或其中所述ω-巰基酸具有通式HS-(CH₂)_p-COOH配體，其中p值為2至30。

9.成套試劑盒，其包含一起的或分開的：

(i)至少兩個不同尺寸的金屬原子量子簇(AQC)M_n和M’_n’的電荷轉移復合物，其中所述電荷轉移復合物具有權利要求1中限定的式I，并且其中所述金屬AQC的M和M’是相同金屬或不同金屬，M_n是以其氧化形式M_n⁺存在的較小AQC，M’_n’是以其還原形式M’_n’^-存在的較大AQC，M_n⁺和M’_n’^-通過靜電相互作用結合，n和n’分別為金屬原子的數目，以及

(ii)生物素結合分子。

10.用于檢測樣品中的生物素化分子的方法，其包括以下步驟：

(i)使所述樣品與根據權利要求1至4中任一項所述的復合物在足以使所述生物素化分子與所述復合物中的生物素結合分子結合的條件下接觸，以及

(ii)在步驟(i)的所述接觸之后檢測在AQC的激發波長下響應于所述樣品的激發的所述AQC的熒光發射強度的變化，

其中所述接觸步驟之后，所述AQC發射的熒光強度的降低指示所述樣品中存在生物素化分子。

11.根據權利要求10所述的方法，其中所述生物素化分子是核酸、多肽或多糖。

12.根據權利要求10或11所述的方法，其中所述生物素結合分子以具有生物素類似物的復合物提供，所述生物素類似物示出的對于生物素結合分子的親和力低于生物素。

13.根據權利要求12所述的方法，其中所述生物素類似物是4-羥基偶氮苯-2-羧酸(HABA)。