[發明專利]使用MES和MOPS作為流動相改性劑從多峰樹脂洗脫生物分子

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• 申請號: 201380067814.0
• 申請日: 2013-10-23
• 公開（公告）號: CN104884147A
• 公開（公告）日: 2015-09-02
• 發明（設計）人: R·戈達瓦特;D·卡明斯;V·瓦里庫
• 申請（專利權）人: 建新公司
• 主分類號: B01D15/38
• 分類號: B01D15/38;C07K1/16
• 代理公司: 北京市嘉元知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11484
• 代理人: 劉彬

1.一種用于純化和富集生物分子的方法，所述方法包括如下步驟：

(a)提供包含所述生物分子的水溶液；

(b)將所述水溶液與多峰(multimodal)樹脂接觸；

(c)任選地用水性洗滌緩沖液洗滌所述多峰樹脂；

(d)通過水性緩沖溶液從所述多峰樹脂洗脫所述生物分子，

其中所述水性緩沖溶液包含如下的一種或多種：

(i)至少15mM的Good's緩沖液；

(ii)0-400mM的丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸或纈氨酸；

(iii)0-400mM的鹽酸胍、硫氰酸胍、氯化銨、硫酸銨、磷酸銨、乙酸銨、氯化鈉、檸檬酸鈉、辛酸鈉、磷酸鈉、碘化鈉、氯化鉀、檸檬酸鉀、硫酸鉀、磷酸鉀、碘化鉀、氯化鎂、硫酸鎂、磷酸鎂、氯化鈣、硫酸鈣、磷酸鈣或?；撬幔缓?/p>

(iv)1％-60％(v/v)的乙二醇或丙二醇或乙二醇和丙二醇的混合物；

和

(e)收集包含生物分子的級分，由此獲得純化或富集形式的生物分子。

2.根據權利要求1的方法，其中所述水性緩沖溶液包含15mM至2.5M的Good’s緩沖液。

3.根據權利要求1或權利要求2的方法，其中所述Good’s緩沖液是MES、MOPS或Tris。

4.根據權利要求1或權利要求2的方法，其中所述Good’s緩沖液是MES。

5.根據權利要求1或權利要求2的方法，其中所述Good’s緩沖液是MOPS。

6.根據權利要求1至5任一項的方法，其中所述生物分子是蛋白。

7.根據權利要求6的方法，其中所述蛋白是酶。

8.根據權利要求7的方法，其中所述酶是糖苷酶。

9.根據權利要求8的方法，其中所述糖苷酶是α-半乳糖苷酶。

10.根據權利要求9的方法，其中所述α-半乳糖苷酶選自下組：阿加糖酶(agalsidase)α和阿加糖酶β。

11.根據權利要求1至10任一項的方法，其中所述多峰樹脂選自下組：Capto^TM?Adhere、Capto^TM?MMC、Pall?PPA?HyperCel^TM、Pall?HEA?HyperCel^TM、Pall?MEP?HyperCel^TM和HCX。

12.一種通過根據權利要求1至11任一項的方法獲得的純化的生物分子。

13.一種制備物，其包含：

(a)生物分子；和

(b)水性緩沖溶液，其包含如下的一種或多種：

(i)至少15mM的Good's緩沖液；

(ii)0-400mM的丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸或纈氨酸；

(iii)0-400mM的鹽酸胍、硫氰酸胍、氯化銨、硫酸銨、磷酸銨、乙酸銨、氯化鈉、檸檬酸鈉、辛酸鈉、磷酸鈉、碘化鈉、氯化鉀、檸檬酸鉀、硫酸鉀、磷酸鉀、碘化鉀、氯化鎂、硫酸鎂、磷酸鎂、氯化鈣、硫酸鈣、磷酸鈣或牛磺酸；和

(iv)1％-60％(v/v)的乙二醇或丙二醇或乙二醇和丙二醇的混合物。

14.根據權利要求13的制備物，其中所述水性緩沖溶液包含15mM和2.5M的Good’s緩沖液。

15.根據權利要求13或14的制備物，其中所述至少一種Good’s緩沖液選自下組：MES、MOPS或Tris。

16.根據權利要求13或14的制備物，其中所述Good’s緩沖液是MES。

17.根據權利要求13或14的制備物，其中所述Good’s緩沖液是MOPS。

18.根據權利要求13至17任一項的制備物，其中所述生物分子是蛋白。