[發明專利]用于測定髓鞘形成的微柱陣列

在審

• 申請號: 201380066859.6
• 申請日: 2013-12-18
• 公開（公告）號: CN104919095A
• 公開（公告）日: 2015-09-16
• 發明（設計）人: J·R·錢;S·李
• 申請（專利權）人: 加利福尼亞大學董事會
• 主分類號: C40B30/06
• 分類號: C40B30/06;C40B60/04;C12N5/071;C12N5/00;C12N5/02
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 劉曉東

交叉引用

本申請要求2012年12月19日提交的美國臨時專利申請No.61/739,446(所述申請通過引用以其整體并入本文)的權益。

關于政府資助的研究的聲明

本發明是在由美國國家衛生研究院/國家神經疾病研究所頒發的第NS062796號撥款下借助政府資助進行的。政府在本發明中具有一定的權利。

引言

髓磷脂是中樞和外周神經系統的重要組成部分。通過使髓磷脂鞘絕緣對軸突進行系統包裹是在脊椎動物中樞神經系統發育中的重大事件。髓磷脂由70％的脂質和30％的蛋白質組成，其由少突膠質細胞(OL)(在中樞神經系統(CNS)中)和許旺(Schwann)細胞(在外周神經系統(PNS)中)兩者形成。通過起絕緣作用，髓磷脂提高神經信號沿神經軸突傳播的速度并保持神經信號的完整性，從而允許信號在腦與外周的神經之間長距離來回通過。對髓磷脂鞘的損傷可導致多種具有通常毀滅性后果的神經病學病癥。

疾病諸如多發性硬化(MS)中對髓磷脂的損傷導致神經信號的中斷、對軸突的損傷以及最終神經元變性。為了有效地治療這些破壞性病狀，必需開發促進修復的新型方法和途徑。

迄今為止，還沒有用于MS的修復或髓鞘再生的療法，并且僅這一事實就說明了對于MS患者的最大希望和未滿足的需要。對促進髓鞘再生的小分子或生物制劑的功能性篩選代表對MS的合理療法的鑒定和開發的主要障礙。

因此，當務之急是要繼續在高通量篩選平臺的開發中取得可對髓鞘再生的細胞自主機制提供深入了解的技術進步。

發明概述

提供了用于測定髓鞘形成的微柱陣列。所述微柱陣列可用于測定少突膠質細胞前體細胞至少突膠質細胞的分化少突膠質細胞前體細胞分化成少突膠質細胞，和/或提供了少突膠質細胞對微柱的包鞘化和/或包裹。本文中還提供了使用微柱陣列篩選促進少突膠質細胞前體細胞分化成少突膠質細胞和/或少突膠質細胞對微柱的包鞘化和/或包裹的候選劑的方法。還提供了包含微柱陣列和少突膠質細胞前體細胞的系統。

附圖簡述

圖1(a)-1(g)舉例說明不同直徑的納米纖維用于研究髓鞘形成的用途。

圖2描繪納米纖維用于研究在候選小分子存在的情況下的髓鞘形成的用途。

圖3(a)-3(b)舉例說明富馬酸喹硫平對納米纖維的髓鞘形成的作用。

圖4A-4C提供使用微柱陣列的髓鞘形成的二元指征的示意圖。

圖5A-5F描繪微柱的制造和髓鞘形成。

圖6A-6C舉例說明微柱用于測定髓鞘形成的用途。

圖7舉例說明根據本發明的實施方案的微柱和96孔板中的微柱陣列。

圖8(a)-8(d)舉例說明少突膠質細胞前體細胞(OPC)和少突膠質細胞的雙熒光標記的用途。

詳述

在進一步描述本發明之前，應當理解，本發明并不限于所描述的特定實施方案，因此當然可以變化。還應理解，本文中使用的術語僅為了描述具體實施方案的目的，并且不旨在進行限制，因為本發明的范圍將僅由所附的權利要求來限定。

當提供數值范圍時，要理解的是，該范圍的上限與下限之間的每個居間數值(至下限單位的十分之一，除非本文另外清楚地規定)以及所述范圍內的任意其它所述或居間數值都包括在本發明中。這些較小范圍的上限和下限可獨立地包括在較小的范圍內，并且也被包括在本發明內，服從于所述范圍內的任何特別排除的限值。當所述范圍包括上下限值之一或兩者時，排除那些所包括的限值之一或兩者的范圍也包括在本發明中。

除非另有定義，否則本文使用的所有技術和科學術語具有與本發明所屬領域普通技術人員的通常理解相同的含義。盡管在實踐或測試本發明中也能使用與本文描述的那些方法和材料相似或相等的任何方法和材料，但是現在描述優選的方法和材料。本文提及的所有出版物均通過引用并入本文，以公開和描述與所述出版物中引用的相關的方法和/或材料。

必須注意，如本文和所附權利要求中所使用的，除非上下文另有明確說明，否則單數形式“一個/一種(a)”、“一個/一種(an)”和“該/所述(the)”包括復數指示物。因此，例如，提及“一個微柱”包括多個這樣的微柱，以及提及“腔室”包括提及一個或多個腔室和對本領域技術人員來說是已知的等同物，等等。進一步指出的是，可撰寫權利要求來排除任何任選的元素。因此，該陳述意圖用作與權利要求要素的描述聯合使用此類排他性術語如“單獨地”、“僅僅”等或使用“否定(negative)”限制的在先基礎。