[發明專利]糖綴合方法

有效

• 申請號: 201380066823.8
• 申請日: 2013-12-13
• 公開（公告）號: CN104870463B
• 公開（公告）日: 2018-09-28
• 發明（設計）人: M·韓;R·K·凱因森;J-H·金;A·K·普拉薩德
• 申請（專利權）人: 輝瑞公司
• 主分類號: C07H3/06
• 分類號: C07H3/06;A61K47/64;C07K1/107;A61K39/09
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 安琪;張曉威

1.制備包含與CRM₁₉₇綴合的肺炎鏈球菌(S.pneumoniae)血清型12F莢膜多糖的糖綴合物的方法，其包括以下步驟：

a)使肺炎鏈球菌血清型12F莢膜多糖在水性溶劑中與穩定的硝酰基化合物和0.5至2.5摩爾當量的氧化劑反應以產生活化的糖，其中所述穩定的硝酰基化合物為帶有TEMPO部分的分子，并且其中所述氧化劑為N-氯代琥珀酰亞胺；以及

b)使所述活化的糖與CRM₁₉₇反應。

2.如權利要求1所述的方法，其中所述硝酰基化合物選自TEMPO、2,2,6,6-四甲基-4-(甲基磺酰氧基)-1-哌啶氧基、4-膦酰氧基-TEMPO、4-氧代-TEMPO、4-甲氧基-TEMPO、4-異硫氰酸基-TEMPO、4-(2-碘乙酰氨基)-TEMPO自由基、4-羥基-TEMPO、4-氰基-TEMPO、4-羧基-TEMPO、4-(2-溴乙酰氨基)-TEMPO、4-氨基-TEMPO、4-乙酰氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶1-氧基。

3.如權利要求1所述的方法，其中所述硝酰基化合物為TEMPO。

4.如權利要求1所述的方法，其中所述穩定的硝酰基化合物以催化量存在。

5.如權利要求1所述的方法，其中所述肺炎鏈球菌血清型12F莢膜多糖與少于約0.3摩爾當量的穩定的硝酰基化合物反應。

6.制備包含與CRM₁₉₇綴合的肺炎鏈球菌血清型12F莢膜多糖的糖綴合物的方法，其包括以下步驟：

a)使肺炎鏈球菌血清型12F莢膜多糖與2,2,6,6-四甲基-1-哌啶氧基(TEMPO)和0.5至2.5摩爾當量的N-氯代琥珀酰亞胺(NCS)在水性溶劑中反應以產生活化的糖；以及

b)使所述活化的糖與CRM₁₉₇反應。

7.如權利要求1至6中任一項所述的方法，其中所述活化的糖的氧化度為3至40。

8.如權利要求7所述的方法，其中所述活化的糖的氧化度為6至14。

9.如權利要求1至6中任一項所述的方法，其中所述肺炎鏈球菌血清型12F莢膜多糖是合成得到的。

10.如權利要求1至6中任一項所述的方法，其中在步驟a)之前，將所述肺炎鏈球菌血清型12F莢膜多糖按尺寸分級。

11.如權利要求10所述的方法，其中將所述肺炎鏈球菌血清型12F莢膜多糖水解或機械地按尺寸分級。

12.如權利要求10所述的方法，其中將所述肺炎鏈球菌血清型12F莢膜多糖水解或通過加壓均化而機械地按尺寸分級以實現50kDa至500kDa的分子量。

13.如權利要求1至6中任一項所述的方法，其中在步驟a)之前，將所述肺炎鏈球菌血清型12F莢膜多糖水解至100kDa至400kDa的分子量。

14.如權利要求13所述的方法，其中將所述肺炎鏈球菌血清型12F莢膜多糖水解至150kDa至350kDa的分子量。

15.如權利要求1至6中任一項所述的方法，其還包括在步驟b)之前純化所述活化的多糖的步驟。

16.如權利要求1至6中任一項所述的方法，其還包括在步驟b)之后添加還原劑的步驟。

17.如權利要求16所述的方法，其中所述還原劑為NaCNBH₃。