[發明專利]用于產生遺傳上優質的動物的方法

有效

• 申請號: 201380066450.4
• 申請日: 2013-10-18
• 公開（公告）號: CN104994728B
• 公開（公告）日: 2019-02-15
• 發明（設計）人: P.K.卡西納桑;H.魏;M.F.艾倫;D.C.法伯
• 申請（專利權）人: 移卵基因有限公司
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 初明明;黃希貴

遺傳檢驗，例如全基因組分析(WGA)已經用于鑒定遺傳上優質的胚胎。在等待對胚胎的一部分實施的遺傳檢驗的結果的時候，本公開的方法延長所述胚胎的體外培養時間。在植入受體之前，本公開的方法還幫助擴充各個胚胎中的細胞的數量。

發明背景

本發明的公開內容涉及用于動物生產的方法。更具體而言，所述公開內容涉及具有某些需要的性狀的動物的選擇性的生產。

選擇遺傳上優質的動物的傳統方法一般涉及使兩只動物繁殖并檢驗產生的子代以鑒定用于普遍用途的最佳種畜。雖然此方法是可靠的，但它具有較大的缺點。例如，子代檢驗從構想到完成一般花費若干年。傳統方法還與高度的浪費和高成本相關，因為僅僅10%的公牛被選為終產品。基因組選擇技術的出現允許飼養員在比傳統方法的年齡更早的年齡鑒定遺傳上優質的動物。例如，可在出生前的不同階段進行各種分子檢驗以鑒定具有需要的性狀的子代。

有若干實用的方法，用以改進選擇具有重要性狀的優質的雄性和雌性牛的過程。這些方法包括，例如，(1)增加選擇的準確性；(2)增加選擇的強度；和/或(3)減少世代間隔。世代間隔一般指當子代降生時母體的平均年齡。世代間隔是在育種計劃中影響遺傳進展速率的最重要的因素。最短可能的世代間隔是性成熟年齡和世代長度的總和。許多技術可用于規避由世代間隔強加的限制。例如，先進的生殖技術例如從青春期前的幼年小母牛取出卵、體外受精(IVF)和對產生的胚胎進行全基因組評價，已經用于縮短世代間隔。

盡管自青春期前的小母牛的卵母細胞采集可用于縮短世代間隔，但以這樣的方式采集的卵母細胞的質量通常差，并趨向于產生低質量胚胎。大部分的全基因組分析需要通過胚胎活檢采集胚胎的一些胚胎細胞，所述胚胎活檢可以是侵入性的并可損害胚胎的發育潛力。此外，活檢樣本的全基因組分析可花費數星期，這需要在知道全基因組分析的結果之前冷凍胚胎或將胚胎轉移到受體。

發明概述

本發明提供用于選擇具有需要的性狀的胚胎的改進的方法。在一個實施方案中，公開了擴充胚胎的細胞數量用于基因組評價和子代產生的方法。

因為冷凍正在發育的胚胎影響產仔效率，胚胎通常被新鮮地(即，不冷凍)轉移至受體動物用于子代的產生。在體外受精(IVF)之后通常將胚胎體外培養約７天。當在此階段將胚胎轉移至同步化的受體時，每個胚胎一般含有約100 - 200個細胞。具有這種類型的胚胎轉移的產仔效率是大約40%，并且從這些子代獲得優質的動物的速度是非常低的。在本文中公開用于體外培養胚胎的改進的方法以幫助解決此問題。更具體而言，可將用于體外培養胚胎的時間延長一個星期、兩個星期、三個星期、一個月或更長以擴充每個胚胎中的細胞數量（圖1）。

因此，在一方面中，本發明的特征在于用于在哺乳動物中選擇遺傳上需要的性狀的方法。該方法可包括以下步驟：(a)體外培養胚胎，其中在步驟(a)開始時所述胚胎包含1-約500個細胞（例如，約100-約200個細胞，例如，約150-約200個細胞）；(b)將步驟(a)的胚胎分成兩個或更多個等分部分；(c)對步驟(b)的所述兩個或更多個等分部分的至少一個進行遺傳分析；和(d)基于從步驟(c)中獲得的結果選擇來自步驟(b)的一個或多個等分部分，其中所述選擇的一個或多個等分部分攜帶遺傳上需要的性狀。

在一個實施方案中，在步驟(a)之后，所述方法可包括將胚胎（即，體外培養的胚胎）轉移入雌性受體。在一些實施方案中，在約10-40天之后（例如，在轉移后約10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39或40天后）自所述雌性受體采集胚胎。在一些實施方案中，在轉移后約21 - 26天之后自所述雌性受體采集所述胚胎。在一些實施方案中，在轉移后約21天之后自所述雌性受體采集所述胚胎。在其它實施方案中，在轉移后超過40天的時期之后自所述雌性受體采集所述胚胎。