[發(fā)明專利]麻風樹屬植物的直接和間接器官發(fā)生

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201380065542.0
• 申請日: 2013-10-30
• 公開（公告）號: CN104883874A
• 公開（公告）日: 2015-09-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: M·S·坦卡拉伊薩拉馬爾;S·拉馬錢德蘭
• 申請（專利權(quán)）人: 淡馬錫生命科學研究院有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 左路

1.通過器官發(fā)生再生麻風樹屬植物的方法，包括以下步驟：

(a)將麻風樹屬植物外植體在固體枝芽誘導培養(yǎng)基上培養(yǎng)，誘導枝芽形成，其中所述麻風樹屬植物外植體是葉柄、花梗、花序梗或花序軸外植體的薄切片或來自所述葉柄、花梗、花序梗、或花序軸外植體的愈傷組織，其中所述枝芽誘導培養(yǎng)基包含MS基礎(chǔ)鹽、B5維生素、吲哚-3-丁酸(IBA)、噻苯隆(TDZ)、6-芐基氨基嘌呤(BA)、硫代硫酸銀(STS)和酪蛋白水解物；

(b)將枝芽在固體枝芽增殖和發(fā)育培養(yǎng)基上培養(yǎng)，以使枝芽增殖和發(fā)育，其中所述枝芽增殖和發(fā)育培養(yǎng)基包含MS基礎(chǔ)鹽、B5維生素、IBA、TDZ、BA、玉米素(Zn)、硫酸腺嘌呤(AdSO₄)和酪蛋白水解物；

(c)將從發(fā)育的枝芽衍生而來的枝芽叢在固體芽伸長培養(yǎng)基上培養(yǎng)，以使芽伸長，其中所述芽伸長培養(yǎng)基包含MS基礎(chǔ)鹽、B5維生素、IBA、激動素(Kn)、赤霉酸(GA₃)、硫酸腺嘌呤(AdSO₄)和酪蛋白水解物；

(d)將從所述枝芽叢分離出的伸長的芽在固體芽成熟培養(yǎng)基上培養(yǎng)，以使芽成熟，其中所述芽成熟培養(yǎng)基包含MS基礎(chǔ)鹽、B5維生素、IBA、Kn、GA₃、硫酸腺嘌呤(AdSO₄)和酪蛋白水解物；和

(e)將成熟的芽在液體生長調(diào)節(jié)劑溶液中浸漬，將浸漬過的芽轉(zhuǎn)移到土里，以使麻風樹屬植物生長，其中所述液體生長調(diào)節(jié)劑溶液包含MS基礎(chǔ)鹽、B5維生素和IBA。

2.權(quán)利要求1所述的方法，其在步驟(a)之前進一步包括以下步驟：

將外植體的薄切片在固體愈傷組織誘導培養(yǎng)基上培養(yǎng)，以誘導器官發(fā)生性愈傷組織，其中所述固體愈傷組織誘導培養(yǎng)基包含MS基礎(chǔ)鹽、B5維生素、IBA、2,4-二氯苯氧基乙酸(2,4-D)、TDZ、BA和脯氨酸。

3.權(quán)利要求2所述的方法，其中所述固體愈傷組織誘導培養(yǎng)基包含：

IBA，含量為約0.05μM-約4.90μM；

2,4-D，含量為約0.05μM-約4.53μM；

TDZ，含量為約0.05μM-約2.27μM；

BA，含量為約0.04μM-約4.44μM；和

脯氨酸，含量為約10mg/l-約500mg/l。

4.權(quán)利要求3所述的方法，其中所述固體愈傷組織誘導培養(yǎng)基包含：

IBA，含量為約0.49μM；

2,4-D，含量為約0.45μM；

TDZ，含量為約0.45μM；

BA，含量為約0.66μM；和

脯氨酸，含量為約100mg/l。