[發明專利]表皮生長因子受體激酶結構域中的新型突變

在審

• 申請號: 201380062994.3
• 申請日: 2013-12-02
• 公開（公告）號: CN104812916A
• 公開（公告）日: 2015-07-29
• 發明（設計）人: 李艷;劉為民;A.詹
• 申請（專利權）人: 霍夫曼－拉羅奇有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 杜艷玲;黃希貴

1.一種經分離的寡核苷酸，其與SEQ?ID?NO:?1中含有突變2240_2264>CGAAAGA或2252_2277>GAGAAGCC的核酸特異性雜交。

2.權利要求1的寡核苷酸，其包含與天然序列不匹配的至少一個核苷酸。

3.權利要求2的寡核苷酸，其與選自SEQ?ID?NO:?6-8和9-12的序列至少90%相同。

4.權利要求3的寡核苷酸，其由選自SEQ?ID?NO:?6-8和9-12的序列組成。

5.權利要求3的寡核苷酸，其能夠引發在SEQ?ID?NO:?1中含有所述突變2240_2264>CGAAAGA的核酸而不是非突變型SEQ?ID?NO:?1的選擇性擴增。

6.權利要求3的寡核苷酸，其能夠引發在SEQ?ID?NO:?1中含有突變2252_2277>GAGAAGCC的核酸而不是非突變型SEQ?ID?NO:?1的選擇性擴增。

7.一種確定癌癥患者對酪氨酸激酶抑制劑療法的應答可能性的方法，其包括：

（a）就所述患者樣品中的EGFR基因中的突變2240_2264>CGAAAGA或2252_2277>GAGAAGCC測試所述患者的樣品，并且如果存在所述突變，

（b）則確定所述患者可能響應所述酪氨酸激酶抑制劑療法。

8.權利要求7的方法，其中所述酪氨酸激酶抑制劑療法包含西妥昔單抗、帕木單抗、厄洛替尼或吉非替尼。

9.權利要求7的方法，其中所述測試使用與選自SEQ?ID?NO:?6-8和9-12的序列至少90%相同的寡核苷酸執行。

10.權利要求7的方法，其進一步包括就所述EGFR基因中下述突變中的一個或多個測試所述患者的樣品：G719A、G719C、K745-A750?del?K?ins、E746V、E746K、L747S、E749Q、A750P、A755V、S768I、L858P、L858R、E746-R748?del、E746-S752?del?V?ins、L747-E749?del、L747-A750?del?P?ins、L747-T751?del、L747-T751?del?P?ins、L747-P753?del?S?ins、L747-S752?del、R748-P753?del、T751-I759?del?T?ins、S752-I759?del、P753-K757?del、M766-A767?del?AI?ins、S768-V769?del?SVA?ins、G779S、P848L、G857V、L858R、L861Q、L883S、D896Y、2236_2248>ACCC、2237_2244>CGCCC、2252_2277>AC、2240-2264>CGAAAGA、2239_2240?TT>CC、2264?C>A和E746-A750?del?AP?ins；并且在步驟（b）中，如果所述突變中的任一個報告為存在，則確定所述患者可能響應所述酪氨酸激酶抑制劑療法。

11.一種用于檢測人EGFR基因中的突變2240_2264>CGAAAGA或2252_2277>GAGAAGCC的試劑盒，其包含與SEQ?ID?NO:1中的突變2240_2264>CGAAAGA或2252_2277>GAGAAGCC特異性雜交而不與非突變的SEQ?ID?NO:1特異性雜交的一種或多種寡核苷酸。

12.權利要求11的試劑盒，其包含與選自SEQ?ID?NO:?6-8和9-12的序列至少90%相同的寡核苷酸。

13.權利要求11的試劑盒，其進一步包含核酸前體、核酸聚合酶以及支持所述核酸聚合酶活性必需的試劑和溶液。

14.權利要求11的試劑盒，其進一步包含一種或多種寡核苷酸，所述寡核苷酸與SEQ?ID?NO:1中的下述突變特異性雜交而不與非突變的SEQ?ID?NO:1特異性雜交：G719A、G719C、K745-A750?del?K?ins、E746V、E746K、L747S、E749Q、A750P、A755V、S768I、L858P、L858R、E746-R748?del、E746-S752?del?V?ins、L747-E749?del、L747-A750?del?P?ins、L747-T751?del、L747-T751?del?P?ins、L747-P753?del?S?ins、L747-S752?del、R748-P753?del、T751-I759?del?T?ins、S752-I759?del、P753-K757?del、M766-A767?del?AI?ins、S768-V769?del?SVA?ins、G779S、P848L、G857V、L858R、L861Q、L883S、D896Y、2236_2248>ACCC、2237_2244>CGCCC、2252_2277>AC、2240-2264>CGAAAGA、2239_2240?TT>CC、2264?C>A和E746-A750?del?AP?ins。