[發明專利]與真核細胞調節劑相關的方法和組合物

有效

• 申請號: 201380057193.8
• 申請日: 2013-08-16
• 公開（公告）號: CN105452546B
• 公開（公告）日: 2018-05-29
• 發明（設計）人: 張洪凱;伊恩·A·威爾森;理查德·A·勒納
• 申請（專利權）人: 斯克利普斯研究院
• 主分類號: C40B50/06
• 分類號: C40B50/06;C12N5/00;C12P21/06
• 代理公司: 上海勝康律師事務所 31263
• 代理人: 樊英如;李獻忠

1.一種用于鑒定真核細胞類型的表型的調節劑抗體的方法，包括(a)在所述真核細胞類型的細胞群中表達分泌的或膜整合的候選抗體或其抗原結合片段的庫，以產生經修飾的表達抗體的細胞的異質群體，以及(b)以自分泌的方式選擇具有與未經修飾的所述真核細胞類型的對照細胞相比經修改的表型的特定表達抗體的細胞；從而將在特定表達抗體的細胞內表達的候選抗體鑒定為所述真核細胞類型的調節劑。

2.如權利要求1所述的方法，其中所述候選抗體庫在每種細胞表達不超過3種不同的抗體種類的條件下在所述細胞內被表達。

3.如權利要求1所述的方法，其中所述候選抗體庫是分泌的抗體的組合庫。

4.如權利要求3所述的方法，其中所述組合抗體庫通過慢病毒載體或逆轉錄病毒載體在所述細胞內被表達。

5.如權利要求1所述的方法，其中所述真核細胞類型是哺乳動物細胞類型。

6.如權利要求1所述的方法，其中在選擇期間在擴散限制介質中培養所述表達抗體的細胞。

7.如權利要求1所述的方法，其進一步包括測定所述經鑒定的候選抗體的重鏈可變區和輕鏈可變區的氨基酸序列。

8.如權利要求1所述的方法，其中所述表型是所述細胞的細胞反應或信號傳導活動。

9.如權利要求1所述的方法，其中所述細胞類型是干細胞類型，以及所述表型是細胞分化。

10.如權利要求1所述的方法，其中通過靶分子介導所述表型。

11.如權利要求10所述的方法，其中由腫瘤抑制基因或致癌基因編碼所述靶分子。

12.如權利要求10所述的方法，其中所述靶分子是分泌的激素或細胞因子。

13.如權利要求12所述的方法，其中所述分泌的激素或細胞因子是促紅細胞生成素、促血小板生成素或IL-1。

14.如權利要求10所述的方法，其中所述靶分子是所述細胞類型的信號傳導受體。

15.如權利要求14所述的方法，其中所述受體是分泌激素或細胞因子的受體。

16.如權利要求10所述的方法，其中所述經鑒定的抗體是異二聚體雙特異性抗體。

17.如權利要求16所述的方法，其中所述雙特異性抗體結合靶分子上的兩種不同表位。

18.如權利要求10所述的方法，其中所述調節劑抗體激活所述靶分子。

19.如權利要求10所述的方法，其中所述調節劑抗體拮抗所述靶分子或拮抗所述靶分子的抑制劑。

20.如權利要求19所述的方法，其中所述選擇是在所述抑制劑的存在下實施的。

21.如權利要求10所述的方法，其進一步包括在所述結合劑抗體被表達在所述用于表型選擇的細胞群內之前，篩選候選抗體的庫，以鑒定所述靶分子的結合劑。

22.如權利要求21所述的方法，其中通過噬菌體展示鑒定所述靶分子的所述結合劑抗體。

23.如權利要求1所述的方法，其中所述表型是靶分子或標志基因在所述細胞類型中的表達。