[發明專利]來自粗糙脈孢菌的β-葡糖苷酶

在審

• 申請號: 201380056656.9
• 申請日: 2013-10-30
• 公開（公告）號: CN104812896A
• 公開（公告）日: 2015-07-29
• 發明（設計）人: B·S·鮑爾;M·K·福達拉
• 申請（專利權）人: 丹尼斯科美國公司
• 主分類號: C12N9/42
• 分類號: C12N9/42
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 胡志君;黃革生

1.一種重組多肽，所述重組多肽包含與SEQ?ID?NO:2或SEQ?ID?NO:3的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，其中所述多肽具有β-葡糖苷酶活性。

2.根據權利要求1所述的重組多肽，其中當所述重組多肽和里氏木霉(Trichoderma?reesei)Bgl1用于水解木素纖維素生物質底物時，與所述里氏木霉(Trichoderma?reesei)Bgl1相比，所述多肽具有改善的β-葡糖苷酶活性。

3.根據權利要求1或2所述的重組多肽，其中所述改善的β-葡糖苷酶活性是增強的纖維二糖酶活性。

4.根據權利要求1至3中任一項所述的重組多肽，其中所述改善的β-葡糖苷酶活性是在相同的糖化條件下，從木素纖維素生物質獲得增加的葡萄糖收率。

5.根據權利要求4所述的重組多肽，其中所述木素纖維素生物質在糖化之前進行預處理。

6.根據權利要求1-5中任一項所述的重組多肽，其中所述多肽包含與SEQ?ID?NO:2或SEQ?ID?NO:3的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列。

7.根據權利要求1-5中任一項所述的重組多肽，其中所述多肽包含與SEQ?ID?NO:2或SEQ?ID?NO:3的氨基酸序列具有至少90％同一性的氨基酸序列。

8.一種組合物，所述組合物包含根據權利要求1-7中任一項所述的重組多肽，還包含一種或多種其他纖維素酶。

9.根據權利要求8所述的組合物，其中所述一種或多種其他纖維素酶選自無或一種或多種其他β-葡糖苷酶、一種或多種纖維二糖水解酶和一種或多種內切葡聚糖酶。

10.包含根據權利要求1-7中任一項所述的重組多肽的組合物，還包含一種或多種半纖維素酶。

11.根據權利要求8或9所述的組合物，還包含一種或多種半纖維素酶。

12.根據權利要求11所述的組合物，其中所述一種或多種半纖維素酶選自一種或多種木聚糖酶、一種或多種β-木糖苷酶、以及一種或多種L-阿拉伯呋喃糖苷酶。

13.一種核酸，所述核酸編碼根據權利要求1-7中任一項所述的重組多肽。

14.根據權利要求13所述的核酸，其中所述多肽還包含信號肽序列。

15.根據權利要求14所述的分離的核酸，其中所述信號肽序列選自SEQ?ID?NO:13-42。

16.一種表達載體，所述表達載體包含與調控序列有效組合的根據權利要求13-15中任一項所述的分離的核酸。

17.一種宿主細胞，所述宿主細胞包含根據權利要求16所述的表達載體。

18.根據權利要求17所述的宿主細胞，其中所述宿主細胞為細菌細胞或真菌細胞。

19.一種組合物，所述組合物包含根據權利要求17或18所述的宿主細胞以及培養基。

20.一種制備β-葡糖苷酶的方法，包括：將根據權利要求17或18所述的宿主細胞在合適的條件下培養于培養基中以產生所述β-葡糖苷酶。

21.一種組合物，所述組合物包含根據權利要求20所述的方法產生于所述培養基上清液中的所述β-葡糖苷酶。

22.一種用于水解木素纖維素生物質底物的方法，包括：使所述木素纖維素生物質底物與根據權利要求1-7中任一項所述的多肽或者根據權利要求21所述的組合物接觸，以得到葡萄糖和其他糖。