[發(fā)明專利]miR-494通過BIM下調(diào)來調(diào)節(jié)TRAIL誘導(dǎo)的細胞凋亡的用途

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201380056604.1
• 申請日: 2013-09-23
• 公開（公告）號: CN104994883A
• 公開（公告）日: 2015-10-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: C·M·克羅斯;R·朱利亞
• 申請（專利權(quán)）人: 俄亥俄州立大學
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;C12Q1/68
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進委員會專利商標事務(wù)所 11038
• 代理人: 羅菊華

發(fā)明人:Carlo?M.Croce,Giulia?Romano

相關(guān)申請的交叉參考

本申請要求2012年9月23日提交的美國臨時申請?zhí)?1/704,542的權(quán)益，其完整公開內(nèi)容出于所有目的明確地通過引用整體并入本文。

序列表

本申請包含已通過EFS-網(wǎng)站提交并在此通過引用以其整體并入的序列表。將于2013年9月19日創(chuàng)建的ASCII副本命名為604_54418_SEQ_LIST_13072.txt，并且其大小為3,838字節(jié)。

背景

MicroRNA(miRNA或miR)在不同類型的癌癥中的化學敏感性或化學抗性的發(fā)生中具有重要的作用。ERK1/2途徑的激活是多種細胞過程和癌癥發(fā)展的主要決定因素，并且負責幾種重要miRNA的轉(zhuǎn)錄。MiRNA是有吸引力的藥物靶標，因為它們調(diào)控許多細胞蛋白質(zhì)的表達并且常常在惡性細胞中相對于正常細胞差異表達。

TNF相關(guān)細胞凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)是細胞凋亡誘導(dǎo)性細胞因子。TRAIL是有前景的基于細胞凋亡的抗腫瘤劑。然而，許多人癌細胞仍然對TRAIL誘導(dǎo)的細胞凋亡具有抗性。

雖然已經(jīng)提出許多治療方法來治療癌癥，但仍然存在對另外的有效的抗癌劑和載體的需要。需要用于有效和安全的體內(nèi)抗癌治療的方法和材料。需要涉及藥物抗性的生化途徑和發(fā)現(xiàn)藥物的方法的增進的理解。此外，仍然存在對于開發(fā)基因治療載體(其對于治療腫瘤性病癥具有增強的治療活性，最小化的毒性和廣泛目標范圍)的未滿足的醫(yī)療需求。

發(fā)明概述

在第一廣泛的方面，本文中描述了抗-miR-494作為治療劑誘導(dǎo)細胞凋亡的用途。在另一廣泛的方面，本文中描述了抗-miR-494作為治療劑增強藥物敏感性的用途。

在另一廣泛的方面，本文中描述了抗-miR-494和TRAIL作為化學治療劑的共施用(即，抗-miR-494將減小TRAIL抗性)。

在另一廣泛的方面，本文中描述了抗-miR-494調(diào)控BIM的表達以促進腫瘤細胞(諸如，但不限于肺癌、乳腺癌、骨肉瘤、胃腸道腫瘤和黑色素瘤)的細胞凋亡的用途。

在另一廣泛的方面，本文中描述了miR-494靶向BIM?3’UTR的用途。

在另一廣泛的方面，本文中描述了在有此需要的受試者中恢復(fù)ERK1/2活性的所需模式的方法，包括施用足以靶向一個或ERK1/2的有效量的至少一種抗-miR-494。

在另一廣泛的方面，本文中描述了用于在有此需要的受試者中誘導(dǎo)腫瘤抑制基因(TSG)的再表達的方法，包括施用足以誘導(dǎo)TSG表達的有效量的抗-miR-494。

在某些實施方案中，所述TSG包括BIM和TRAIL的一種或多種。

在另一廣泛的方面，本文中描述了用于在有此需要的受試者中體外和體內(nèi)抑制致瘤性的方法，其包括施用足以靶向一種或多種腫瘤抑制基因(TSG)的有效量的抗-miR-494核酸構(gòu)建體。在某些實施方案中，所述受試者為癌癥患者。在某些實施方案中，所述抑制方法包括非小細胞肺癌(NSCLC)的表觀遺傳學調(diào)控。

在另一廣泛的方面，本文中描述了用于增加腫瘤抑制基因(TSG)的表達的方法，所述方法包括：用抗-mir-494核酸構(gòu)建體轉(zhuǎn)染細胞。在某些實施方案中，所述TSG包括BIM和TRAIL的一種或多種。

在另一廣泛的方面，本文中描述了用于上調(diào)細胞中BIM和/或TRAIL的表達水平的方法，包括用抗-miR-494核酸構(gòu)建體轉(zhuǎn)染細胞。

在另一廣泛的方面，本文中描述了用于在體外和體內(nèi)抑制致瘤性的方法，包括抑制miR-494在癌細胞中的表達。

在另一廣泛的方面，本文中描述了通過使用單獨的或與其它治療組合的合成的抗-miR-494以在癌細胞中再活化腫瘤抑制因子和使BIM和/或TRAIL表達的異常模式正常化來開發(fā)表觀遺傳學療法的方法。在某些實施方案中，所述細胞是癌細胞，諸如肺癌、乳腺癌、骨肉瘤和黑色素瘤。

在另一廣泛的方面，本文中描述了在受試者中抑制腫瘤發(fā)生的方法，所述受試者患有或懷疑患有其中至少miR-494在受試者的癌細胞中相對于對照細胞被上調(diào)的癌癥相關(guān)疾病，所述方法包括：當miR-494在癌細胞中被上調(diào)時，對受試者施用有效量的至少一種用于抑制miR-494表達的化合物，以便在受試者中腫瘤發(fā)生被抑制。

在某些實施方案中，所述化合物包括抗-miR-494核酸構(gòu)建體，或其分離的變體或生物活性片段或功能等同物，或與其結(jié)合的抗體。