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[發明專利]快速方法生產高純度癌干細胞和高純度癌干細胞群在審

專利信息
申請號: 201380053912.9 申請日: 2013-08-06
公開(公告)號: CN105051187A 公開(公告)日: 2015-11-11
發明(設計)人: A.科恩富思;M.麥克加里 申請(專利權)人: 新干細胞腫瘤學有限責任公司
主分類號: C12N5/095 分類號: C12N5/095;C12N5/078;A61K39/00
代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001 代理人: 初明明;黃希貴
地址: 美國*** 國省代碼: 美國;US
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 快速 方法 生產 純度 干細胞
【說明書】:

優先權

本申請要求2012年10月25日提交的標題為“RapidProductionofHighPurityCancerStemCellsandPopulationofHighPurityCancerStemCells(高純度癌干細胞和高純度癌干細胞群的快速生產)”的美國臨時順序號61/718,643(其由此以其整體結合到本文中)和2012年8月15日提交的標題為“RapidMethodtoProduceHighPurityCancerStemCellsandPopulationofHighPurityCancerStemCells(生產高純度癌干細胞和高純度癌干細胞群的快速方法)”的美國臨時順序號61/683,477(其也由此以其整體結合到本文中)的優先權。

本公開內容的領域

本公開內容涉及癌干細胞、用于細胞純化的方法和試劑、用于刺激免疫應答的方法和用于給予受試者的方法。組合物和相關方法可刺激針對腫瘤性病癥特有的抗原或針對表達所述抗原的細胞的免疫應答。本公開內容的腫瘤性病癥包括黑素瘤、肝癌、胃癌和卵巢癌。

背景

在實體瘤中,少部分細胞具有引發與親代腫瘤相同的組織學異質性的腫瘤的能力。這些細胞被稱為“癌干細胞”。這些亦稱為腫瘤引發細胞或癌引發細胞。癌干細胞可通過一組性質定義。第一,它們具有使自身更新的能力。第二,在移植時它們能夠建立新的腫瘤。第三,它們可被描述為休眠的或慢循環的(細胞周期)腫瘤細胞。第四,它們可能是造成腫瘤對化學療法或放射療法的抗性的原因。第五,它們依賴保持其更新和產生更分化的祖細胞的能力的特殊微環境,其中所述環境保持癌干細胞的未分化狀態。這種微環境可包括間充質干細胞、組織相關成纖維細胞和內皮細胞。例如,在結腸癌干細胞的情況下,該微環境包括腫瘤相關成肌纖維細胞的存在。(Schmidt等(2011)Oncotarget.2:313-320;Borovski等(2011)CancerRes.71:634-639;Korkaya等(2011)J.Clin.Inv.121:3804-3809)。體外培養時形成球體(sphere)的能力是又一個特征,其可有助于鑒定特定細胞為癌干細胞(Perego等(2011)J.Inv.Dermatol.11:546-547)。癌干細胞的一個非限制性定義是能夠復制親代腫瘤的完全異質性,并且甚至在多次傳代后仍繼續生長的細胞(Civenni等(2011)CancerRes.71:3098-3109)。

已表明癌干細胞抑制免疫應答,其中抑制機制包括T調節細胞(Treg)的誘導、T細胞活化和增殖的損害(Wei等(2010)Clin.CancerRes.16:461-473)。

癌干細胞通過其不斷自我更新的能力建立和保持腫瘤塊。另外,腫瘤干細胞還在稱為上皮-至-間充質變換狀態中遷移。自我更新和遷移或侵襲特性的這些特征被認為是癌癥毒力的主要原因(Greaves等(2012)Clonalevolutionincancer(癌癥的克隆進化).Nature.481(7381):第306-13頁)。另外,癌干細胞具有免疫抑制性質(Wu等(2010)Gliomacancerstemcellsinduceimmunosuppressivemacrophages/microglia(神經膠質瘤癌干細胞誘導免疫抑制巨噬細胞/小膠質細胞).Neuro.Oncol.12:1113-1125)。因此,已研究通過例如消滅癌干細胞的試劑和方法,使癌干細胞作為抗癌療法的靶標。

根據標志物和在小鼠中進行的連續移植異種移植物測定法,在多種實體瘤中鑒定出推定的腫瘤干細胞。在黑素瘤中,幾種表面標志物可鑒定腫瘤干細胞,但當在手術切開術后測定時,這些標志物的表達在腫瘤之間是可變的。生物標志物CD271是與神經嵴源的細胞有關的生長因子受體。CD271可用于鑒定推定的黑素瘤干細胞,其中這些黑素瘤干細胞可在系列稀釋下在小鼠模型中增殖(Civenni等(2011)HumanCD271-positivemelanomastemcellsassociatedwithmetastasisestablishtumorheterogeneityandlong-termgrowth(與轉移有關的人CD271-陽性黑素瘤干細胞建立腫瘤異質性和長期生長).CancerRes.71:3098-3109)。

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