[發(fā)明專利]快速方法生產(chǎn)高純度癌干細(xì)胞和高純度癌干細(xì)胞群在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201380053912.9 | 申請(qǐng)日: | 2013-08-06 |
| 公開(公告)號(hào): | CN105051187A | 公開(公告)日: | 2015-11-11 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | A.科恩富思;M.麥克加里 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 新干細(xì)胞腫瘤學(xué)有限責(zé)任公司 |
| 主分類號(hào): | C12N5/095 | 分類號(hào): | C12N5/095;C12N5/078;A61K39/00 |
| 代理公司: | 中國(guó)專利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 初明明;黃希貴 |
| 地址: | 美國(guó)*** | 國(guó)省代碼: | 美國(guó);US |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 快速 方法 生產(chǎn) 純度 干細(xì)胞 | ||
優(yōu)先權(quán)
本申請(qǐng)要求2012年10月25日提交的標(biāo)題為“RapidProductionofHighPurityCancerStemCellsandPopulationofHighPurityCancerStemCells(高純度癌干細(xì)胞和高純度癌干細(xì)胞群的快速生產(chǎn))”的美國(guó)臨時(shí)順序號(hào)61/718,643(其由此以其整體結(jié)合到本文中)和2012年8月15日提交的標(biāo)題為“RapidMethodtoProduceHighPurityCancerStemCellsandPopulationofHighPurityCancerStemCells(生產(chǎn)高純度癌干細(xì)胞和高純度癌干細(xì)胞群的快速方法)”的美國(guó)臨時(shí)順序號(hào)61/683,477(其也由此以其整體結(jié)合到本文中)的優(yōu)先權(quán)。
本公開內(nèi)容的領(lǐng)域
本公開內(nèi)容涉及癌干細(xì)胞、用于細(xì)胞純化的方法和試劑、用于刺激免疫應(yīng)答的方法和用于給予受試者的方法。組合物和相關(guān)方法可刺激針對(duì)腫瘤性病癥特有的抗原或針對(duì)表達(dá)所述抗原的細(xì)胞的免疫應(yīng)答。本公開內(nèi)容的腫瘤性病癥包括黑素瘤、肝癌、胃癌和卵巢癌。
背景
在實(shí)體瘤中,少部分細(xì)胞具有引發(fā)與親代腫瘤相同的組織學(xué)異質(zhì)性的腫瘤的能力。這些細(xì)胞被稱為“癌干細(xì)胞”。這些亦稱為腫瘤引發(fā)細(xì)胞或癌引發(fā)細(xì)胞。癌干細(xì)胞可通過一組性質(zhì)定義。第一,它們具有使自身更新的能力。第二,在移植時(shí)它們能夠建立新的腫瘤。第三,它們可被描述為休眠的或慢循環(huán)的(細(xì)胞周期)腫瘤細(xì)胞。第四,它們可能是造成腫瘤對(duì)化學(xué)療法或放射療法的抗性的原因。第五,它們依賴保持其更新和產(chǎn)生更分化的祖細(xì)胞的能力的特殊微環(huán)境,其中所述環(huán)境保持癌干細(xì)胞的未分化狀態(tài)。這種微環(huán)境可包括間充質(zhì)干細(xì)胞、組織相關(guān)成纖維細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞。例如,在結(jié)腸癌干細(xì)胞的情況下,該微環(huán)境包括腫瘤相關(guān)成肌纖維細(xì)胞的存在。(Schmidt等(2011)Oncotarget.2:313-320;Borovski等(2011)CancerRes.71:634-639;Korkaya等(2011)J.Clin.Inv.121:3804-3809)。體外培養(yǎng)時(shí)形成球體(sphere)的能力是又一個(gè)特征,其可有助于鑒定特定細(xì)胞為癌干細(xì)胞(Perego等(2011)J.Inv.Dermatol.11:546-547)。癌干細(xì)胞的一個(gè)非限制性定義是能夠復(fù)制親代腫瘤的完全異質(zhì)性,并且甚至在多次傳代后仍繼續(xù)生長(zhǎng)的細(xì)胞(Civenni等(2011)CancerRes.71:3098-3109)。
已表明癌干細(xì)胞抑制免疫應(yīng)答,其中抑制機(jī)制包括T調(diào)節(jié)細(xì)胞(Treg)的誘導(dǎo)、T細(xì)胞活化和增殖的損害(Wei等(2010)Clin.CancerRes.16:461-473)。
癌干細(xì)胞通過其不斷自我更新的能力建立和保持腫瘤塊。另外,腫瘤干細(xì)胞還在稱為上皮-至-間充質(zhì)變換狀態(tài)中遷移。自我更新和遷移或侵襲特性的這些特征被認(rèn)為是癌癥毒力的主要原因(Greaves等(2012)Clonalevolutionincancer(癌癥的克隆進(jìn)化).Nature.481(7381):第306-13頁(yè))。另外,癌干細(xì)胞具有免疫抑制性質(zhì)(Wu等(2010)Gliomacancerstemcellsinduceimmunosuppressivemacrophages/microglia(神經(jīng)膠質(zhì)瘤癌干細(xì)胞誘導(dǎo)免疫抑制巨噬細(xì)胞/小膠質(zhì)細(xì)胞).Neuro.Oncol.12:1113-1125)。因此,已研究通過例如消滅癌干細(xì)胞的試劑和方法,使癌干細(xì)胞作為抗癌療法的靶標(biāo)。
根據(jù)標(biāo)志物和在小鼠中進(jìn)行的連續(xù)移植異種移植物測(cè)定法,在多種實(shí)體瘤中鑒定出推定的腫瘤干細(xì)胞。在黑素瘤中,幾種表面標(biāo)志物可鑒定腫瘤干細(xì)胞,但當(dāng)在手術(shù)切開術(shù)后測(cè)定時(shí),這些標(biāo)志物的表達(dá)在腫瘤之間是可變的。生物標(biāo)志物CD271是與神經(jīng)嵴源的細(xì)胞有關(guān)的生長(zhǎng)因子受體。CD271可用于鑒定推定的黑素瘤干細(xì)胞,其中這些黑素瘤干細(xì)胞可在系列稀釋下在小鼠模型中增殖(Civenni等(2011)HumanCD271-positivemelanomastemcellsassociatedwithmetastasisestablishtumorheterogeneityandlong-termgrowth(與轉(zhuǎn)移有關(guān)的人CD271-陽(yáng)性黑素瘤干細(xì)胞建立腫瘤異質(zhì)性和長(zhǎng)期生長(zhǎng)).CancerRes.71:3098-3109)。
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