[發明專利]由向日葵獲得富含咖啡酰奎寧酸的提取物的方法

在審

• 申請號: 201380053559.4
• 申請日: 2013-10-08
• 公開（公告）號: CN104717892A
• 公開（公告）日: 2015-06-17
• 發明（設計）人: E·邦巴爾代利;F·科爾蒂
• 申請（專利權）人: 因德納有限公司
• 主分類號: A23L1/30
• 分類號: A23L1/30;A61K36/28;A61P3/10
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 隋曉平;黃革生

技術領域

本發明涉及用于預防和治療血脂異常、高血糖和高血壓、代謝綜合征和2型糖尿病的去油向日葵(helianthus?annuus)的種子提取物。本發明還涉及制備所述提取物的方法及含有所述提取物的組合物。本發明的提取物可以顯著降低超重或肥胖患者的餐后和基線血糖水平以及血液甘油三酯水平。當本發明的提取物與大分子復合，并加至富含淀粉性碳水化合物的食物中后，可以降低其血糖指數。

背景技術

向日葵提取物極少用于中醫和對抗療法中；但是，向日葵種子卻被廣泛用于油的工業化生產中，生物質耗盡的殘渣主要被用作動物飼料或用于生產沼氣。

向日葵油是一種極佳的種子油，特征在于甘油酯含量非常可觀，它可以調節脂肪的腸吸收。當種子為完整的或剝離了其外殼后，它們包含了變量的以奎寧酸的單和二酯形式存在的咖啡酰奎寧酸，其中綠原酸占優勢。

發明內容

現已驚奇地發現，通過以下所述的提取方法，可以得到咖啡酰奎寧酸含量較高的提取物，該提取物具有有效降低餐后血糖和基線血糖水平的活性。

因此，本發明涉及向日葵提取物、其制備方法及含有該提取物的組合物。

根據本發明的方法包括：

a)用脂肪醇水混合物對向日葵的工業殘渣進行提取；

b)真空濃縮得自步驟a)的水醇溶液至乙醇溶劑完全除去，然后濾除不溶物和殘余的脂相；

c)將得自步驟b)的水溶液的pH值調節至約4.5±1；

d)通過400Da的有機膜對得自步驟c)的水溶液進行超濾；

e)對得自步驟d)的溶液進行色譜或納濾(nanofiltration)；

f)真空或通過霧化濃縮得自步驟e)的截留物。

在步驟a)中，“向日葵的工業殘渣”指用已烷進行熱提取、隨后在100℃以上的溫度下去除溶劑(“去溶劑化”)后得到的向日葵種子提取物。

根據本發明的一個優選方面，步驟a)的提取過程在能夠將pH值保持在2以下的有機酸或無機酸(優選稀硫酸)存在下用乙醇/水混合物進行至單-和二-咖啡酰喹尼酸耗盡，優選80％v/v的乙醇/水混合物。

根據本發明的一個優選方面，在步驟c)中，水溶液的pH值采用碳酸鈣調節至約4.5±1。

得自步驟c)的水溶液，在使用聚苯乙烯樹脂和/或離子交換和吸附樹脂上進行吸附樹脂色譜，或者采用截留值為400～600Da的陶瓷膜進行納濾，以除去鹽和不需要的低分子量產物。截留物中保留咖啡酰奎尼酸，而鹽和糖則保留在滲透物中。

本發明的制備方法具有特別的工業意義，因為生物質實質上是可以無限獲得的而且其成本可以忽略不計，所以從方法的經濟學而言具有顯著的意義并可顯著降低獲得提取物的最終成本。

通過本發明方法得到的提取物的特征在于該提取物具有高含量的咖啡酰奎寧酸，對餐后和基線血糖水平顯示有效的降糖活性。如果將適量的本產品加至富含碳水化合物的食物中，所述作用仍可被保持，此為這種新提取物在飲食領域中的主要應用。

去溶劑化中使用的熱處理方法和提取步驟中的酸處理可以使結構得以修飾，由此使提取物的生物學活性在抗氧化和促新陳代謝效應方面得到提升。處理方法裂解了蛋白結構之間的化學鍵，轉變為醌形式的咖啡酰奎寧酸在Michael反應中與蛋白質的SH基團結合或與常常存在于植物多酚中的氨基反應。

優選按照本發明的方法獲得的向日葵提取物中的咖啡酰奎寧酸含量范圍為40％－80％，優選50％－60％。

本發明的提取物可被方便地配制為富含甘油二酯的油用于人類疾病的治療，制劑可以含有或不含有磷脂作為表面活性劑載體，或者將該提取物加至各種食物中，例如面包、各種類型的餅干和一般不能耐受高溫水洗的食物，這是由于活性成分可自由地溶于水。有鑒于此，咖啡酰奎寧酸可以通過與植物或動物蛋白質形成復合物變得不溶于水，這些蛋白通過熱變性后可以穩定形式摻入。蛋白質被酶水解后在腸中釋放出活性產物，該活性產物可以在腸內與其他底物相互作用并改善糖的吸收，抑制6磷酸合成酶。

已經觀察到，當將提取物添加至富含淀粉性碳水化合物的食物中時，該提取物可以顯著降低餐后血糖水平。

根據本發明，提取物以營養制劑的形式與含有淀粉性碳水化合物一起每餐服用時的劑量范圍通常為50－500mg，優選250mg。

臨床試驗結果如下。

餐后血糖水平