[發明專利]抗氧化劑在用于血液樣品中靶分子檢測的方法和裝置中的用途

有效

• 申請號: 201380053390.2
• 申請日: 2013-08-08
• 公開（公告）號: CN104704373B
• 公開（公告）日: 2018-11-16
• 發明（設計）人: F.K.德泰耶;J.L.M.維瑟斯
• 申請（專利權）人: 微型照顧私人有限公司
• 主分類號: G01N33/74
• 分類號: G01N33/74;G01R33/12
• 代理公司: 北京國昊天誠知識產權代理有限公司 11315
• 代理人: 南霆;程爽

本發明涉及用于在血液中至少一種靶分子的檢測的方法，其包括至少以下步驟：（a）提供血液樣品；（b1）使所述樣品與抗氧化劑接觸并且將所述樣品施加到過濾器以將血細胞從所述樣品分離；和/或（b2）將所述樣品施加到過濾器以從所述樣品分離血細胞，其中所述過濾器包含抗氧化劑；（c）在所述藥筒中將所述樣品與第一結合分子接觸，其中所述第一結合分子連接于磁性顆粒，并且其中所述第一種結合分子能夠特異地結合于所述至少一種靶分子；（d）使所述樣品與第二結合分子接觸，其中所述第二結合分子連接于傳感器表面，并且其中所述第二結合分子能夠特異地結合于所述至少一種靶分子；并且（e）檢測所述傳感器上的磁性顆粒。本發明同樣涉及抗氧化劑在血液樣品中至少一種靶分子的檢測方法中的用途以及用于插入測定裝置用于血液樣品中至少一種靶分子的檢測的藥筒。

發明領域

本發明涉及用于在血液樣品中檢測至少一種靶分子的方法。本發明同樣涉及抗氧化劑在血液樣品中至少一種靶分子的檢測的方法中的用途以及用于插入測定裝置用于血液樣品中至少一種靶分子檢測的藥筒（cartridge）。

發明背景

體外診斷由于對更有效果和更有效率的醫療保健的增加的需求而顯得日益重要。在一方面，這樣的診斷檢驗在中央化實驗室執行，集中了由專業技術人員操作的很多種儀器，而在另一方面，這樣的診斷檢驗在實驗室環境之外的即時檢驗場景（point-of-caresetting）執行，例如在手術室中、在醫生辦公室、在醫院病床邊、在救護車中或在患者家中。即時檢驗，除了快速以外，還需要是敏感的，因為對某一疾病的生物標記物檢驗需要在皮摩爾濃度的范圍內完成檢測。已經證明在夾心免疫測定（sandwich immunoassay）中使用磁性顆粒作為標簽適合此目的。

為了在實驗室環境外檢驗，檢驗的簡潔和強勁與高易用性搭配是進一步必要的。因此，對提供具有盡可能少的用戶輔助步驟（user-aided step）的即時檢驗場景存在強烈的需求。

發明目標和概述

本發明解決了這些需求并且提供了用于在血液樣品中至少一種靶分子的快速和易用的檢測的方式和方法。

上述目標具體通過包括至少以下步驟的用于在血液樣品中檢測至少一種靶分子的檢測的方法實現：（a）提供血液樣品；（b1）將所述樣品與抗氧化劑接觸并且將所述樣品施加到過濾器以從所述樣品分離血細胞；和/或（b2）將所述樣品施加到過濾器以從所述樣品分離血細胞，其中所述過濾器包含抗氧化劑；（c）檢測靶分子。靶分子的檢測包括步驟（c1）在藥筒腔內將所述樣品與第一結合分子接觸，其中所述第一結合分子連接到磁性顆粒，并且其中所述第一結合分子能夠特異地結合于所述至少一種靶分子；（c2）將所述樣品與第二結合分子接觸，其中所述第二結合分子連接到傳感器表面，并且其中所述第二結合分子能夠特異地結合于所述至少一種靶分子；并且（c3）在傳感器表面上檢測磁性顆粒。

一個優勢是在血液樣品中靶分子的所述檢測可以不進行離心步驟執行。樣品通過過濾方式將血細胞從血液樣品移除。可插入手持測定裝置的一次性藥筒，從而可以裝備有專用過濾器，使得使用者只需要將血液樣品添加至藥筒中，所述藥筒中已經存在全部所述檢驗所需的預處理和試劑。

然而，已經觀察到對靶分子諸如甲狀旁腺激素（PTH），血液樣品的過濾可以導致相比于通過離心獲得的血漿減少的測定應答。已經發現向樣品添加抗氧化劑增加了對過濾的血液樣品的測定應答。特別地，本申請的實例證明了抗氧化劑的添加導致從血液和血漿中獲得的檢驗結果約為1的相關性。這意味著通過過濾移除血細胞得到的血液與通過離心得到的血漿的測定應答是相同的。

不希望受到理論的限制，對于觀察到的過濾的血液樣品的測定性能降低的一種可能的解釋是靶分子與過濾器和/或在過濾期間濃縮的血細胞接觸后，靶分子變得被氧化并且導致更難檢測，例如，不再被結合分子識別。這樣，靶分子不被在樣品容器中發生的測定所識別。將氧化劑添加至血液樣品針對氧化作用保護了靶分子。

在本發明優選的實施方案中同時執行如上文描述的方法中的步驟（c1）和（c2）。