[發明專利]酸性條件下分析物測定用方法和試劑盒

有效

• 申請號: 201380051645.1
• 申請日: 2013-10-03
• 公開（公告）號: CN104718453A
• 公開（公告）日: 2015-06-17
• 發明（設計）人: M·因加納斯;P·萊赫托寧
• 申請（專利權）人: GYROS專利公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N33/84
• 代理公司: 北京林達劉知識產權代理事務所(普通合伙) 11277
• 代理人: 劉新宇;李茂家

1.一種通過包括將分析物結合至能夠特異性結合所述分析物的配體的免疫測定來定量測定流體樣品中所述分析物的方法，其中至少部分所述分析物作為分析物復合體存在，和其中所述方法包括下述步驟：

a)使所述樣品處于第一酸性pH，從而至少實質上解離存在的任何分析物復合體并將實質上所有分析物以游離形式提供，

b)將所述第一酸性pH升高至第二酸性pH，其中防止復合體的再形成，但其中允許分析物與所述配體的結合，和

c)測定分析物與所述配體的結合以定量測定所述樣品中的所述分析物。

2.根據權利要求1所述的方法，其中所述配體為抗體。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其中將所述配體固定化至固體支承體。

4.根據權利要求1、2或3所述的方法，其中所述分析物選自蛋白A、蛋白G、蛋白A/G、蛋白L、及其衍生物，和其中所述樣品包含IgG。

5.根據權利要求1至4任一項所述的方法，其中所述第一酸性pH選自在約1.5至約3.2的范圍內，和所述第二酸性pH選自在約2.7至約4.5、優選約2.8至約4.5的范圍內。

6.根據權利要求5所述的方法，其中所述第一酸性pH選自在約2.3至約2.5的范圍內和/或所述第二酸性pH選自在約2.8至約3.2的范圍內。

7.根據權利要求4或5所述的方法，其中所述第二酸性pH選自在約3.0至約3.2的范圍內。

8.根據權利要求1至7任一項所述的方法，其包括當測定所述分析物的濃度時使用響應相對于分析物濃度的標準曲線，其中所述標準曲線使用包含分析物和能夠與所述分析物復合的至少一種物質的樣品制備。

9.根據權利要求1至8任一項所述的方法，其中所述方法在微流體系統中進行。

10.根據權利要求9所述的方法，其中所述微流體系統包含在可旋轉盤中，和其中流體輸送可通過離心力完成。

11.一種試劑盒，其用于進行分析物的免疫測定，所述分析物至少部分以復合體形式存在于流體樣品中，所述試劑盒包括：

檢測劑，其能夠結合至所述分析物，

第一酸性緩沖液，其具有在約1.5至約3.2范圍內的pH，和

第二酸性緩沖液，其具有在約2.7至約4.5范圍內的pH。

12.根據權利要求11所述的試劑盒，其中所述分析物能夠結合至固定化于固相的配體，和其中所述試劑盒還包括針對所述分析物的捕獲劑，其中所述捕獲劑能夠結合至所述固相。

13.根據權利要求11或12所述的試劑盒，其中所述捕獲劑是生物素化的，且所述配體為親和素或鏈霉親和素。