[發明專利]可誘導的DNA結合蛋白和基因組干擾工具及其應用

在審

• 申請號: 201380049665.5
• 申請日: 2013-07-21
• 公開（公告）號: CN105188767A
• 公開（公告）日: 2015-12-23
• 發明（設計）人: F.張;M.布里格哈姆;L.叢;S.科納曼恩;N.E.桑賈納
• 申請（專利權）人: 布羅德研究所有限公司;麻省理工學院;哈佛大學校長及研究員協會
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N15/90
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 杜艷玲;彭昶

1.一種非天然存在或經改造的TALE或CRISPR-Cas系統，其包含至少一種開關，其中所述TALE或CRISPR-Cas系統的活性通過與關于開關的至少一種誘導物能源接觸而加以控制。

2.根據權利要求1的系統，其中關于至少一種開關的控制或者所述TALE或CRISPR-Cas系統的活性得到激活、增強、終止或阻遏。

3.根據前述權利要求中任一項的系統，其中與所述至少一種誘導物能源的接觸導致第一效應和第二效應。

4.根據權利要求3的系統，其中所述第一效應是入核轉運、出核轉運、次級組分（例如效應物分子）的召募、（蛋白質、DNA或RNA的）構象變化、切割、貨物（例如籠裝分子或輔因子）釋放、結合或解離中的一種或多種。

5.根據權利要求3的系統，其中所述第二效應是關于至少一種開關的控制或者所述TALE或CRISPR-Cas系統的活性的激活、增強、終止或阻遏中的一種或多種。

6.根據權利要求3-5中任一項的系統，其中所述第一效應和所述第二效應級聯發生。

7.根據前述權利要求中任一項的系統，其中所述TALE或CRISPR-Cas系統進一步包含至少一種核定位信號（NLS）、出核轉運信號（NES）、功能結構域、彈性接頭、突變、缺失、改變或截短。

8.根據權利要求7的系統，其中所述NLS、NES或功能結構域中的一種或多種有條件地激活或失活。

9.根據權利要求7的系統，其中所述突變是轉錄因子同源區中的突變、DNA結合結構域中的突變（例如堿性螺旋環螺旋的堿性殘基突變）、內源NLS中的突變或內源NES中的突變的一種或多種。

10.根據前述權利要求中任一項的系統，其中所述誘導物能源是熱、超聲、電磁能或化學品。

11.根據前述權利要求中任一項的系統，其中所述誘導物能源是抗生素、小分子、激素、激素衍生物、類固醇或類固醇衍生物。

12.根據前述權利要求中任一項的系統，其中所述誘導物能源是脫落酸（ABA）、多西環素（DOX）、cumate、雷帕霉素、4-羥基他莫昔芬（4OHT）、雌激素或蛻皮激素。

13.根據前述權利要求中任一項的系統，其中所述至少一種開關選自基于抗生素的誘導系統、基于電磁能的誘導系統、基于小分子的誘導系統、基于核受體的誘導系統和基于激素的誘導系統。

14.根據前述權利要求中任一項的系統，其中所述至少一種開關選自四環素（Tet）/DOX誘導系統、光誘導系統、ABA誘導系統、cumate阻遏物/操縱子系統、4OHT/雌激素誘導系統、基于蛻皮激素的誘導系統和FKBP12/FRAP（FKBP12-雷帕霉素復合物）誘導系統。

15.根據權利要求10的系統，其中所述誘導物能源是電磁能。

16.根據權利要求15的系統，其中所述電磁能是可見光的組分。

17.根據權利要求16的系統，其中所述所述可見光的組分具有在450nm-700nm范圍內的波長。

18.根據權利要求17的系統，其中所述所述可見光的組分具有在450nm-500nm范圍內的波長。

19.根據權利要求18的系統，其中所述可見光的組分是藍光。

20.根據權利要求19的系統，其中所述藍光具有至少0.2mW/cm²的強度。

21.根據權利要求19的系統，其中所述藍光具有至少4mW/cm²的強度。

22.根據權利要求17的系統，其中所述所述可見光的組分具有在620-700nm范圍內的波長。

23.根據權利要求22的系統，其中所述可見光的組分是紅光。