[發明專利]使用硫酯酶變異體的脂質的制造方法

有效

• 申請號: 201380049117.2
• 申請日: 2013-08-22
• 公開（公告）號: CN104662154B
• 公開（公告）日: 2017-09-01
• 發明（設計）人: 川原彰人
• 申請（專利權）人: 花王株式會社
• 主分類號: C12N15/09
• 分類號: C12N15/09;C12N1/13;C12N1/21;C12N5/10;C12N9/18;C12P7/64
• 代理公司: 北京尚誠知識產權代理有限公司11322
• 代理人: 龍淳

1.一種脂質的制造方法，其中，

包括：在宿主中導入編碼下述(c)的蛋白質的基因從而得到轉化子的工序；和從得到的轉化子中采取脂質的工序，

(c)由序列號1所示的氨基酸序列中第209號的氨基酸由色氨酸置換為蘇氨酸、谷氨酸或者丙氨酸的氨基酸序列構成，并且具有硫酯酶活性的蛋白質。

2.如權利要求1所述的脂質的制造方法，其中，

所述(c)的蛋白質由序列號3、5或者7所示的氨基酸序列構成。

3.如權利要求1所述的脂質的制造方法，其中，

編碼所述蛋白質的基因為下述(e)～(h)的任一種的基因，

(e)具有序列號2的第334號至第1245號的堿基序列、且相當于序列號2的第625號～第627號的堿基由編碼色氨酸的堿基置換為編碼蘇氨酸、谷氨酸或者丙氨酸的堿基的堿基序列，并且編碼具有硫酯酶活性的蛋白質的基因；

(f)具有(e)的基因的堿基序列中相當于序列號2的第625號～第627號的堿基以外的1～10個堿基缺失、置換、插入或者附加后的堿基序列，并且編碼具有硫酯酶活性的蛋白質的基因；

(g)由序列號2所示的堿基序列中編碼第625號～第627號的色氨酸的堿基被置換為編碼蘇氨酸、谷氨酸或者丙氨酸的堿基的堿基序列構成，并且編碼具有硫酯酶活性的蛋白質的基因；

(h)由(g)的基因的堿基序列中第625號～第627號以外的1～10個堿基缺失、置換、插入或者附加后的堿基序列構成，并且編碼具有硫酯酶活性的蛋白質的基因。

4.如權利要求3所述的脂質的制造方法，其中，

所述(g)的基因由序列號4、6或者8所示的堿基序列構成。

5.如權利要求1～4中任一項所述的脂質的制造方法，其中，

所述宿主選自植物、藻類以及微生物。

6.如權利要求1～4中任一項所述的脂質的制造方法，其中，

所述宿主選自擬南芥、藍藻以及大腸桿菌。

7.如權利要求1～4中任一項所述的脂質的制造方法，其中，

所述脂質包含月桂酸。

8.如權利要求1～4中任一項所述的脂質的制造方法，其中，

在所述脂質中含有27質量％以上的月桂酸。

9.如權利要求1～4中任一項所述的脂質的制造方法，其中，

在所述脂質中含有65質量％以上的碳原子數為12～16的脂肪酸。

10.如權利要求1～4中任一項所述的脂質的制造方法，其中，

所述宿主為微生物。

11.如權利要求1～4中任一項所述的脂質的制造方法，其中，

所述宿主為大腸桿菌。

12.一種提高脂質的生產性的方法，其中，

包括在宿主中導入編碼下述(c)的蛋白質的基因，從而得到轉化子的工序，

(c)由序列號1所示的氨基酸序列中第209號的氨基酸由色氨酸置換為蘇氨酸、谷氨酸或者丙氨酸的氨基酸序列構成，并且具有硫酯酶活性的蛋白質。

13.一種轉化子，其中，

所述轉化子為在宿主中導入編碼下述(c)的蛋白質的基因而得到的，

(c)由序列號1所示的氨基酸序列中第209號的氨基酸由色氨酸置換為蘇氨酸、谷氨酸或者丙氨酸的氨基酸序列構成，并且具有硫酯酶活性的蛋白質；

所述宿主為藻類或者微生物。

14.如權利要求13所述的轉化子，其中，

所述(c)的蛋白質由序列號3、5或者7所示的氨基酸序列構成。