[發(fā)明專利]再生用于在神經(jīng)系統(tǒng)中治療疾病和損傷的功能性神經(jīng)元

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201380048924.2
• 申請日: 2013-07-19
• 公開（公告）號(hào): CN104870634A
• 公開（公告）日: 2015-08-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳功;張磊;吳政;陳昱晨;王帆;郭梓園
• 申請（專利權(quán)）人: 賓夕法尼亞州研究基金會(huì)
• 主分類號(hào): C12N5/10
• 分類號(hào): C12N5/10;A61K35/30;A61P25/00;C12N15/86
• 代理公司: 北京北翔知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11285
• 代理人: 孫占華;張廣育

1.一種在神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中產(chǎn)生神經(jīng)元表型的方法，其包括：

在所述神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中表達(dá)外源NeuroD1，其中所述神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞選自星形膠質(zhì)細(xì)胞、反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞、NG2細(xì)胞和反應(yīng)性NG2細(xì)胞。

2.權(quán)利要求1的方法，其中所述神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞是在體外。

3.權(quán)利要求1的方法，其中所述神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞是在體內(nèi)。

4.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的方法，其中所述神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞是人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。

5.權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)的方法，其中所述神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞是非人哺乳動(dòng)物的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。

6.權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的方法，其中表達(dá)外源NeuroD1包括將包含編碼NeuroD1的核酸的表達(dá)載體遞送到所述神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中。

7.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的方法，其中表達(dá)外源NeuroD1包括將包含編碼NeuroD1的核酸的病毒表達(dá)載體遞送到所述神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中。

8.權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)的方法，其中表達(dá)外源NeuroD1包括將包含編碼NeuroD1的核酸的逆轉(zhuǎn)錄病毒表達(dá)載體遞送到所述神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中。

9.權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)的方法，其中所述神經(jīng)元表型包括如下中的一種或多種：神經(jīng)元形態(tài)、一種或多種神經(jīng)元標(biāo)記物的表達(dá)、神經(jīng)元的電生理特征、突觸形成和神經(jīng)遞質(zhì)的釋放。

10.權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的方法，其中NeuroD1是所述神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中唯一的外源表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子。

11.一種體外神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，其包含外源的NeuroD1。

12.一種體外神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，其包含編碼NeuroD1的表達(dá)載體。

13.權(quán)利要求11或12的體外神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，其具有神經(jīng)元表型，其中所述神經(jīng)元表型包括如下中的一種或多種：神經(jīng)元形態(tài)、一種或多種神經(jīng)元標(biāo)記物的表達(dá)、神經(jīng)元的電生理特征、突觸形成和神經(jīng)遞質(zhì)。

14.權(quán)利要求11-13中任一項(xiàng)的體外神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，其中NeuroD1是所述神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中唯一的外源表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子。

15.一種基本上如本文所述的體外神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。

16.一種基本上如本文所述的在神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中產(chǎn)生神經(jīng)元表型的方法。

17.一種在需要其的受試者中治療神經(jīng)學(xué)病癥的方法，其包括：

將治療有效劑量的NeuroD1給予所述受試者的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞；由此在所述神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中表達(dá)外源NeuroD1，從而在所述神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中產(chǎn)生神經(jīng)元表型以改善所述受試者的神經(jīng)學(xué)病癥。

18.權(quán)利要求17的在需要其的受試者中治療神經(jīng)學(xué)病癥的方法，其中給予治療有效劑量的NeuroD1包括給予包含編碼NeuroD1蛋白的核酸序列的表達(dá)載體。

19.權(quán)利要求18的在需要其的受試者中治療神經(jīng)學(xué)病癥的方法，其中所述編碼NeuroD1蛋白的核酸序列包括選自以下的核酸序列：編碼SEQ?ID?NO:2的核酸序列或其功能性片段；編碼SEQ?ID?NO:4的核酸序列或其功能性片段；SEQ?ID?NO:1或其功能性片段；SEQ?IDNO:3或其功能性片段；以及編碼與SEQ?ID?NO:2或SEQ?ID?NO:4具有70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高同一性的蛋白的核酸序列或其功能性片段。

20.權(quán)利要求17-19中任一項(xiàng)的在需要其的受試者中治療神經(jīng)學(xué)病癥的方法，其中所述神經(jīng)學(xué)病癥的特征是存在反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞。

21.權(quán)利要求17-20中任一項(xiàng)的在需要其的受試者中治療神經(jīng)學(xué)病癥的方法，其中所述神經(jīng)學(xué)病癥是對中樞或周圍神經(jīng)系統(tǒng)的損傷。

22.權(quán)利要求17-21中任一項(xiàng)的在需要其的受試者中治療神經(jīng)學(xué)病癥的方法，其中所述神經(jīng)學(xué)病癥選自阿茲海默病、帕金森病、肌萎縮側(cè)索硬化(ALS)、癲癇和中風(fēng)。