[發明專利]蛋內禽胚胎性別、活力和/或發育階段確定

在審

• 申請號: 201380046983.6
• 申請日: 2013-07-30
• 公開（公告）號: CN104704360A
• 公開（公告）日: 2015-06-10
• 發明（設計）人: W·M·施圖特海姆;W·S·布魯因斯
• 申請（專利權）人: 因奧沃私人有限公司
• 主分類號: G01N33/50
• 分類號: G01N33/50;G01N33/68
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 王健

本發明涉及非破壞性的確定蛋內禽胚胎的性別、發育階段和/或活力的方法，包括(a)在蛋開始孵育直至孵化的時間段內檢測選自糖和/或氨基酸、其前體和代謝物的蛋內至少第一發育標志物化合物；(b)測量至少第一檢測的發育標志物化合物的量，和(c)將所述量與確立的雌性和雄性、胚胎的發育階段、和/或活的和死的或未發育胚胎的基準線比較，以確定胚胎是否是活的、雄性和/或雌性、和/或胚胎的發育階段。

技術領域

本發明涉及確定蛋內禽胚胎性別、發育階段和/或活力的方法，通過測定蛋內，更具體地說是尿囊液中發育標志物的存在。本發明方法進一步涉及確定禽胚胎活力、和選擇雄蛋和雌蛋、以及應用這些選擇的蛋生產疫苗和/或雛禽(chick)的方法。

背景技術

大多數禽類的受精卵，尤其是那些商業飼養的禽類的受精卵，如家雞(Gallusgallus domesticus)、鴨、鵝及火雞傾向于最終孵化出大致均等分布的雄性和雄性雛禽。在孵化場管理中，可能期望在各種特性尤其是性別的基礎上分離禽類。舉例來說，可能期望給雄性和雌性禽類接種不同的疫苗，或者在雄禽和雌禽的生長速率以及營養需求存在差異的情況下分離群體以獲得飼養效率、提高處理均一性并降低生產成本。而且更進一步，對于商業化的蛋生產，雄性雛禽的孵育和飼養是極不可取的，導致每年撲殺數十億雄性雛禽。

此外，有部分蛋沒有受精，或在孵育階段開始便不含活的胚胎，這大大降低孵化場的孵化箱的能力。到目前為止，活的胚胎的確定通常采用一種稱為“透光檢驗”的技術進行，如EP-A-2369336和US7950349中所公開。

其中，用光源檢查蛋，所述光源發射能夠至少部分通過蛋的波長的光。

盡管這可以鑒定蛋是否含有活的胚胎，然而，為了得到可靠的結果，需要所述蛋發育到至少第11天，或甚至是其發育更后期。并且，雖然這種技術可以區分活的和無活力的蛋，它不能可靠地確定未孵化鳥類的性別和其他特征。

因此，目前所需要的雛禽農場的孵化能力是有早期性別選擇，能夠僅主要選擇雌性雛禽胚胎所需的至少兩倍大。

相應地，通過減少所需能源和其他資源的量，將對環境將有很大價值，但同樣對消除不必要的雄性雛禽撲殺，以及減少新孵化禽類的壓力也有很大價值，如果有早期方法允許在孵育期之前確定禽胚胎的性別，也能大大增加孵化場的能力。

如果該方法還能夠在未受精和/或其他無活力的蛋中選擇活的胚胎的話，另一益處是將進一步提高孵化過程的效率。

Y.Feng等人在Appl.Magn.Reson.(2007),32,257-268公開了通過900MHz超高場強NMR波譜分析第9天雞蛋尿囊液中的代謝物。

Gu D.-C.等人，Chinese Journal of Animal Science,Vol.7,23-25公開了通過HPLC分析蛋養殖孵育期間尿囊液及羊水中游離天冬氨酸、谷氨酸、精氨酸和亮氨酸濃度。但是，該公開方法未超出產生一個基準線，用于比較非特定產蛋日期的蛋，僅簡單建立四種氨基酸的基準線。此外，該公開的檢查方法是破壞性的，因為有活胚胎的蛋在檢查后不能成熟至孵化，或用于其他用途，例如疫苗生產。

US-A-2003/0096319和WO-A-2006124456公開了通過測定胚胎流體樣品如來自禽類蛋的尿囊液或血液中雌激素類固醇化合物的存在確定蛋內禽胚性別的方法。雖然不用破壞蛋是可行的，但雌激素類固醇的量很少，而且只有生殖腺發育后測試才會成功，即在胚胎發育的一個相對較晚的點。更進一步，WO-A-2006124456的方法似乎也需要對每個種類及其亞類的熒光標記進行修飾，或對這些種類進行遺傳修飾。

Ohta Y.等人，Poultry Science,Vol.80,Nr.10,1430-1346公開了蛋內施加氨基酸的效應，以觀察這如何影響胚胎的氨基酸濃度和來自肉雞種蛋的其他蛋內容物。然而，這不是一種確定性別、活力和/或禽蛋的發育階段的方法。