[發(fā)明專利]滅活鉤端螺旋體屬細菌的免疫原性組合物

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201380044247.7
• 申請日: 2013-08-16
• 公開（公告）號: CN104582720B
• 公開（公告）日: 2017-10-27
• 發(fā)明（設計）人: H·L·B·M·克拉亞森;E·O·里克
• 申請（專利權）人: 英特維特國際股份有限公司
• 主分類號: A61K39/02
• 分類號: A61K39/02
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司72001
• 代理人: 李波,萬雪松

發(fā)明領域

本發(fā)明涉及一種組合物，其包含滅活鉤端螺旋體(Leptospira)細菌的免疫原性細胞制劑，一種保護動物預防鉤端螺旋體屬細菌感染的疫苗，以及一種酸用于穩(wěn)定滅活鉤端螺旋體屬細菌的免疫原性制劑的用途。

技術背景

鉤端螺旋體病是由鉤端螺旋體的許多致病血清變型中的任一種感染引起的世界范圍的人畜共患病。所述生物的屬是極其易變的，并且包含超過250個血清變型。單個致病性血清變型的發(fā)病率因不同地區(qū)而異，可能受如氣候、當?shù)貏游锶汉娃r業(yè)實踐等因素的影響。鉤端螺旋體病實際上影響到所有的哺乳動物物種。人類鉤端螺旋體病也很重要，并且在熱帶地方性發(fā)生，且在溫帶氣候中作為流行病發(fā)生。然而，與其他物種不同，人類實質上對于所述疾病的維持并不重要，并且人對人的傳播很罕見。

預防鉤端螺旋體病的人疫苗接種是研究團體的目標，但是進展一直非常緩慢。鑒于犬鉤端螺旋體病是一種重要的疾病，并且犬是鉤端螺旋體病來源的事實，預防該犬疾病的許多疫苗是可得的。商業(yè)的犬鉤端螺旋體病疫苗傳統(tǒng)上包含犬(Canicola)血清組和黃疸出血性(Ictero)血清組的滅活抗原，并且已面市超過五十年。歐洲最近的建議是繼續(xù)在疫苗中包含Canicola和Ictero血清組的抗原，附加包含流感傷寒(Grippo)血清組和澳大利亞(Australis)血清組的抗原。而在美國，目前可獲得具有四種血清組(Canicola、ictero、Grippo和Pomona)的抗原的四種犬疫苗；在歐洲，目前可獲得多種傳統(tǒng)二價疫苗(Canicola、Ictero)和僅一種三價疫苗(Canicola、Ictero和Grippo)。

即使不是全部如此，大多數(shù)可商購的鉤端螺旋體病疫苗包括滅活鉤端螺旋體細菌的免疫原性細胞制劑，例如，如福爾馬林滅活的全細胞。已知這些疫苗在遠低于室溫的貯存溫度，通常在2℃至8℃之間，非常穩(wěn)定。然而，特別是考慮到一個事實，即鉤體螺旋體病是熱帶的地方病，在高于室溫的溫度下具有疫苗穩(wěn)定性將是一個重要的優(yōu)點，因為這將允許在環(huán)境條件下貯存，而不需要任何冷卻設備。在過去，因為存在于這類滅活的全細胞疫苗中的任何蛋白可能是鉤端螺旋體抗原不穩(wěn)定的原因，已經(jīng)測試了將這些蛋白變性(例如通過施加不影響鉤端螺旋體抗原的熱激處理)是否導致穩(wěn)定性的顯著改善。然而，結果是陰性的。

發(fā)明目的

需要顯著提高包含滅活鉤端螺旋體細菌的免疫原性細胞制劑的組合物的穩(wěn)定性，特別是獲得一種組合物，其即使是在高于室溫的溫度下貯存至少3個月后，仍然有效引起免疫應答。特別地，需要一種鉤端螺旋體病疫苗，即使在將所述疫苗在37℃下貯存3個月后，特別是在該溫度下貯存9個月后，其仍然有效，至少幫助防止鉤端螺旋體細菌感染。

發(fā)明概述

為了滿足本發(fā)明的目的，已根據(jù)前文設計了一種組合物，其中所述滅活鉤端螺旋體細菌的免疫原性細胞制劑存在于乙二胺四乙酸溶液中(其中術語“酸”包括所述酸的共軛堿)。已經(jīng)證明，通過使所述抗原存在于該溶液中，所述抗原的穩(wěn)定性顯著提高。在37℃下貯存至少3個月的根據(jù)本發(fā)明的疫苗，保留了足以提供預防鉤端螺旋體細菌感染的近乎完全保護的抗原質量水平。

定義

本發(fā)明意義上的疫苗是一種適合應用于動物(包括人類)的構成，包括一種或多種抗原，通常與藥學上可接受的載體組合，例如含有水的液體，任選包含免疫刺激劑(佐劑)、鹽、緩沖劑、防腐劑、粘度調節(jié)劑等，其在施用于動物后誘導免疫應答，用于治療疾病或病癥，即幫助預防、改善或治療疾病或病癥。

載體是用于攜載抗原以使其能夠以實用形式存在的工具。典型的載體是水或其它親水性液體，但也常使用固體顆粒(例如用于通過干粉霧化器施用的抗原)。

滅活細菌的細胞制劑是實質上含有滅活細菌細胞的制劑，任選地被進一步處理(其可包括至少部分裂解細胞)，例如以獲得更穩(wěn)定的或免疫原性更高的制劑。細胞制劑與包含細菌細胞的提取物(例如提取的表面蛋白和/或多糖)的制劑是相對的。

本發(fā)明的具體實施方式

在一個具體實施方式中，所述溶液每升包含5至50mmol的乙二胺四乙酸。優(yōu)選地，所述溶液每升包含20mmol的乙二胺四乙酸。已經(jīng)證實該范圍導致有效提高穩(wěn)定性，并同時預期在施用后是安全的。

在另一個具體實施方式中，所述溶液含有磷酸氫二鈉。