[發明專利]具有抗真菌、抗菌和生長促進活性的芽孢桿菌屬(BACILLUSSP.)菌株

有效

• 申請號: 201380042989.6
• 申請日: 2013-08-13
• 公開（公告）號: CN104718281B
• 公開（公告）日: 2017-07-07
• 發明（設計）人: 拉特納卡·阿索爾卡;安娜·露西婭·科爾多瓦-科雷洛斯;克里斯托弗·麥科特;德博拉·維爾克;卡爾利·托德;蘇海;帕梅拉·馬羅內
• 申請（專利權）人: 馬羅內生物創新公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02
• 代理公司: 北京律盟知識產權代理有限責任公司11287
• 代理人: 沈錦華

相關申請案的交叉引用

本申請案主張2012年8月14日申請的美國臨時專利申請案第61/683,174號和2013年3月15日申請的美國專利申請案第13/835,677號的益處；所述專利申請案的公開內容特此出于所有目的以全文引用的方式并入。

技術領域

本發明屬于生物殺蟲劑和害蟲控制；特定言之微生物殺蟲劑和產生所述微生物殺蟲劑的微生物菌株的領域。

背景技術

天然產物是由微生物、植物和其它有機體產生的物質。微生物天然產物提供豐富的化學多樣性來源，并且出于醫藥目的利用天然產物存在悠久的歷史。盡管強調天然產物用于人類治療法，其中超過50％衍生自天然產物，但僅有11％的殺蟲劑衍生自天然來源。盡管如此，天然產物殺蟲劑具有在常規和有機農場兩者中在控制害蟲方面起到重要作用的潛能。由微生物(細菌、放線菌和真菌)產生的二級代謝物提供新穎的化合物，其可以單獨使用或與已知化合物組合使用以有效控制昆蟲害蟲并且降低抗性發展的風險。存在若干成功作為農業殺蟲劑的微生物天然產物的眾所周知的實例(Thompson等人,2000；Arena等人,1995；Krieg等人1983)。

微生物殺蟲劑的發展開始于在純培養物中分離微生物。其隨后在溫室中和在野外使用活體外、活體內或中試規模試驗繼續進行功效和波譜篩選。同時，由微生物產生的活性化合物經分離和識別。為了商業化微生物殺蟲劑，微生物必須通過以工業規模發酵并且與審批通過的生物相容性添加劑一起調配來經濟地生產，以增加功效并且最大化易于應用。隨著對化學殺蟲劑逐漸增加的抗性發展，可用殺蟲劑的范圍變窄。另外，非天然存在的殺蟲劑可能具有有害的環境影響。因此，需要植物病原體尚未對其產生抗性并且具有最低限度環境影響的新的天然存在的殺蟲劑。

發明內容

本文中公開一種具有殺蟲活性的微生物菌株，芽孢桿菌屬(Bacillus sp.)分離物F727。這種菌株產生在控制害蟲和促進植物生長中呈活性的生物活性代謝物。還公開了使用芽孢桿菌屬分離物727和其代謝物用于控制害蟲和促進植物生長的方法。在一具體實施例中，芽孢桿菌屬可以具有NRRL B-50768的識別特征中的至少一個。

此外，芽孢桿菌屬可以具有16S rRNA基因序列，其與在SEQ ID NO:3中闡述的共有序列具有至少99％的一致性并且確切地說99.5％的一致性，并且所述序列包含正向序列，其與在SEQ ID NO:1中闡述的序列具有至少99％的一致性并且確切地說99.5％的一致性，以及反向序列，其與在SEQ ID NO:2中闡述的序列具有至少99％的一致性并且確切地說99.5％的一致性。

更提供實質上純的培養物或全細胞培養液，其包含所述菌株或細胞分離物、提取物、上清液及/或衍生自所述菌株或其提取物的物質或化合物。

更提供用于調節植物的害蟲侵擾的方法，其包含向植物和/或其種子和/或用于生長所述植物的基質施加有效調節所述害蟲侵擾的量的所述芽孢桿菌屬分離物F727(和/或培養物、細胞分離物、提取物、上清液及/或衍生自所述菌株或提取物的物質或化合物)。在某些實施例中，害蟲是植物真菌，例如霜霉屬(Bremia)、葡萄孢屬(Botrytis)、核盤菌屬(Sclerotinia)、單絲殼屬(Sphaerotheca)、絲核菌屬(Rhizoctonia)、炭疽菌屬(Colletotrichum)、鐮孢菌屬(Fusarium)、輪枝孢屬(Verticillium)、疫霉屬(Phytophthora)或離蠕孢屬(Bipolaris)。在其它實施例中，害蟲是細菌，例如歐文菌屬(Erwinia)、假單胞菌屬(Pseudomonas)、黃單胞菌屬(Xanthomonas)、食酸菌屬(Acidovorax)或棍狀桿菌屬(Clavibacter)。

還提供促進植物生長和/或種子發芽的方法，其中所述方法包含向植物和/或其種子和/或用于生長所述植物的基質施加有效促進植物生長和/或種子發芽的量的所述芽孢桿菌屬分離物F727(和/或培養物、細胞分離物、提取物、上清液和/或衍生自所述菌株或提取物的物質或化合物)。

在具體實施例中，所述芽孢桿菌產生選自由以下組成的群組的化合物：

(a)化合物“A”，其

(i)可自芽孢桿菌屬，確切地說芽孢桿菌屬分離物727獲得；

(ii)具有殺蟲活性；