[發明專利]腎功能障礙的生物標志物

有效

• 申請號: 201380042859.2
• 申請日: 2013-06-13
• 公開（公告）號: CN104641236B
• 公開（公告）日: 2016-10-12
• 發明（設計）人: 威廉·托馬斯·麥克布萊德;瑪麗蓮·阿姆斯特朗
• 申請（專利權）人: 英國貝爾法斯特女王大學;貝爾法斯特醫療及社會保障信托基金
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司 11262
• 代理人: 王思琪;鄭霞

本發明涉及用于預測腎功能障礙的發展的方法，以及涉及用于進行這種預測的試劑盒。

物理創傷除對身體的直接負面影響(例如由外科手術或汽車撞擊導致的損害、或者由外科程序例如通過心-肺機械的血液轉流導致的損害)之外，遭受物理創傷的受試者經常發展急性腎功能障礙。類似的急性腎功能障礙的其它原因包括延長的低血壓狀態(例如與腸黏膜缺血和從內臟到循環系統的內毒素易位關聯)、敗血癥和敗血性休克綜合征。

在具有正常腎功能的患者的人群中，在與標準或基線GFR比較，腎小球濾過率(GFR)下降的基礎上進行創傷后的、低血壓誘發的、敗血癥誘發的、和/或敗血性休克綜合癥誘發的腎功能障礙的診斷；如例如通過MDRD測試(下面進一步解釋)來測量。基于這些測量的診斷或預后的限制在于，得出MDRD估計的GFR值下降通常花費若干天。當檢測到GFR下降時，經常太遲而不能開始治療措施來避免腎功能的進一步惡化。例如圍術期醫生或重癥監護醫師面臨的挑戰是在這些功能障礙出現之前48小時鑒定腎功能障礙的生物標志物(即此時依然存在在特護病房采取預防措施的可能性；例如對這些患者運行超常血壓，這是其本身對手術后的情形并非沒有風險的介入，除非通過例如可以通過根據本發明的測試鑒定的即將發生的腎衰竭的更大風險的存在來證明有理)。

許多文獻記載對身體的創傷誘發急性的(經常是瞬變的)血漿促炎響應。已經示出該急性的血漿促炎響應的量級與創傷后腎功能障礙相關(Gormley等,Anesthesiology,2000,93)。類似的急性的腎毒性的促炎反應的其他原因包括延長的低血壓狀態(與腸粘膜缺血和從內臟到循環的內毒素易位關聯)、或者敗血癥和敗血性休克綜合癥，其全部通常在由在血液中的促炎介質的急性增加為特征的系統炎癥反應(SIRS)之后或與其關聯。當從血液過濾時這些急性的促炎反應如何損傷腎小管的機制是由Chatterjee提供的，Chatterjee證明了在體外應用于細胞培養物中的近端小管的TNF-α導致細胞損傷(Markewitz,J?Clin?Invest?1993；91；Chatterjee等,Exp?Nephrol?1999；7:438-8)。以炎癥性細胞因子IL-1β、TNF-α和IFN-γ的組合攻擊后，體外近端腎小管細胞展示誘導型NO合酶誘導的時間依賴性增加和對應的NO產生至細胞毒性濃度，該效應被L-NMMA抑制(Chatterjee等,Exp?Nephrol?1999；7:438-8)。利用TNF-α和INF-γ刺激大鼠腎上皮細胞顯著地增加誘導型一氧化氮合酶mRNA的水平(Markewitz,J?Clin?Invest?1993；91)。

大量的出版物示出，尿抗炎細胞因子的水平示出創傷后的顯著增加，以及實際上在促炎反應的水平中反映前述增加。見例如：Gormley等.Cytokine,Jan?2002,2117(2)。另外，已經被證明，抗炎細胞因子的創傷后增加的量級與腎損傷和功能障礙的量級相關。見例如：Litalien等,Pediatr.Nephrol.,Nov?1999,13(9)；Gretchen等,Anesthesiology,Nov?2000，Gormley等,Anesthesiology,2000,93,和歐洲專利公布號1962092A(Renovar,Inc.)。從前述出版物的這些結果的呈現明顯地，相對大的創傷后抗炎細胞因子水平被提出作為腎功能障礙的直接成比例的標志物。

其他的研究改為提出，通過測量從物理創傷之前到物理創傷之后的抗炎細胞因子的水平的變化可以確定腎功能障礙。該分析清晰地要求在物理創傷事件之前和之后采樣和估計抗炎細胞因子水平。

當發明人分析大群的創傷后受試者的抗炎細胞因子反應時，他們驚奇地發現，那些受試者的一個群體僅呈現物理創傷后的相對低的抗炎細胞因子水平，與之前報告的以及大部分受試者所經歷的預期的大的抗炎細胞因子水平不同。對該子組的進一步分析驚奇地發現，相較于物理創傷后示出預期的大的抗炎細胞因子水平的那些成員，這些成員們處于發展腎功能障礙的高風險。該發現與之前公認的大的創傷后尿抗炎細胞因子的水平與腎損傷和功能障礙的量級相關的結論相反。

發明人的令人驚訝的發現還證明，人們可以通過僅在單點即在物理創傷以后采樣和分析抗炎細胞因子來預測腎功能障礙。因而這樣的分析的執行比指示創傷之前和之后的抗炎細胞因子的水平的改變都需要測量的研究簡單。當在非預期的事件例如汽車碰撞導致的物理創傷之后試圖預測腎功能障礙的發展時，即當不可能測量創傷之前的抗炎細胞因子水平時，僅測量創傷后抗炎細胞因子水平尤其有利。