[發(fā)明專利]基因?qū)胗脫?dān)體和基因?qū)雱┮约八鼈兊闹圃旆椒ā⒁约跋蚣?xì)胞導(dǎo)入基因的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201380040387.7
• 申請(qǐng)日: 2013-05-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104768582A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-07-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 小野寺宏;半田宏;坂本聰;畠山士
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: LSIP基金運(yùn)營(yíng)聯(lián)合公司
• 主分類號(hào): A61K48/00
• 分類號(hào): A61K48/00;A61K9/14;A61K35/76;A61K35/761;A61K47/36;A61K47/48;C12N15/09
• 代理公司: 北京尚誠(chéng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11322
• 代理人: 龍淳

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及基因?qū)雱⑹褂迷摶驅(qū)雱┑幕驅(qū)敕椒ā⒁约霸摶驅(qū)雱┑闹圃旆椒ǖ龋摶驅(qū)雱┑奶卣髟谟冢诒砻娼Y(jié)合肝素或硫酸乙酰肝素，經(jīng)由肝素或硫酸乙酰肝素結(jié)合有基因?qū)胗幂d體。

背景技術(shù)

目前為止，開(kāi)發(fā)了使用重組入目的基因的病毒，在作為靶標(biāo)的細(xì)胞、組織和器官等中使該基因表達(dá)的基因?qū)敕椒ā＠纾_(kāi)發(fā)了將重組入基因的病毒注入血管內(nèi)，通過(guò)血流使其移動(dòng)至靶器官的方法、以及使用注射器等直接注入靶器官的方法。但是，在這樣的方法中，存在如下的問(wèn)題：注入的病毒擴(kuò)散，病毒濃度在所希望的部位降低而無(wú)法獲得足夠的基因表達(dá)水平，以及基因在非希望的部位表達(dá)而有可能引起不良作用。

另外，有使核酸或病毒附著于包覆了生物體分子的磁性顆粒，通過(guò)外部磁場(chǎng)使該磁性顆粒集聚在規(guī)定的地方而導(dǎo)入基因的方法(專利文獻(xiàn)2)。另外，還有使病毒與結(jié)合有肝素的纖維狀結(jié)構(gòu)體結(jié)合，將該纖維狀結(jié)構(gòu)體導(dǎo)入靶器官等，由此選擇性地使病毒感染與該纖維狀結(jié)構(gòu)體接觸的細(xì)胞，從而使基因表達(dá)的方法(專利文獻(xiàn)1)。另外，開(kāi)發(fā)了附加了聚賴氨酸而具有氨基的珠(NH2殘基型珠)，該珠具有神經(jīng)纖維延伸作用。

但是，現(xiàn)在依然需要用于更為安全且自由地導(dǎo)入基因的技術(shù)。特別是由于需要定位手術(shù)且對(duì)患者的負(fù)擔(dān)大，所以例如對(duì)帕金森氏病的基因治療這樣的向腦內(nèi)的基因?qū)胫校枰@樣的技術(shù)。

現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)1：日本特開(kāi)2011-201793號(hào)

專利文獻(xiàn)2：日本國(guó)際公開(kāi)第2005/095621號(hào)

專利文獻(xiàn)3：日本特開(kāi)2006-88131號(hào)

專利文獻(xiàn)4：日本特表2008-500049號(hào)

專利文獻(xiàn)5：日本特開(kāi)2008-127454號(hào)

非專利文獻(xiàn)

非專利文獻(xiàn)1：PNAS,Vol.106,No.1,pp44-49(2009)

非專利文獻(xiàn)2：Infect.Immun.1984,43(2):561

非專利文獻(xiàn)3：Infect.Immun.February?1984vol.43no.2561-566

非專利文獻(xiàn)4：J?Biomed?Mater?Res?A.2005Mar?15；72(4):389-98

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明所要解決的課題

本發(fā)明的目的在于提供一種能夠更加安全且自由地導(dǎo)入基因的新的基因?qū)敕椒āＬ貏e是在于提供一種向器官內(nèi)的特定位置安全且自由地導(dǎo)入基因的方法。

用于解決課題的方法

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，發(fā)明人使肝素經(jīng)由氨基與納米顆粒的表面結(jié)合，再使腺伴隨病毒載體附著，注入大鼠腦內(nèi)的特定位置，結(jié)果發(fā)現(xiàn)腺伴隨病毒載體移動(dòng)到與該納米顆粒接觸的神經(jīng)細(xì)胞，然后該納米顆粒通過(guò)巨噬細(xì)胞的吞噬作用從腦內(nèi)被除去，從而完成了本發(fā)明。

基于該見(jiàn)解，本發(fā)明提供以下的(i)～(xiv)。

(i)一種基因?qū)胗脫?dān)體，其包含納米顆粒和基因?qū)胗幂d體結(jié)合物質(zhì)，具備引發(fā)由細(xì)胞進(jìn)行的吞噬的官能團(tuán)，上述基因?qū)胗幂d體結(jié)合物質(zhì)經(jīng)由上述官能團(tuán)中的一部分與上述納米顆粒的表面結(jié)合，上述官能團(tuán)中的另外一部分以不與上述基因?qū)胗幂d體結(jié)合物質(zhì)結(jié)合的狀態(tài)存在。

(ii)一種基因?qū)雱涫菍⒒驅(qū)胗幂d體與(i)所述的基因?qū)胗脫?dān)體的上述基因?qū)胗幂d體結(jié)合物質(zhì)結(jié)合而成的。

(iii)如(ii)所述的基因?qū)雱渲校鲜龌驅(qū)胗幂d體為選自仙臺(tái)病毒載體、慢病毒載體、逆轉(zhuǎn)錄病毒載體、腺病毒載體和腺伴隨病毒載體中的1種以上。

(iv)如(ii)或(iii)所述的基因?qū)雱渲校鲜龉倌軋F(tuán)帶有正電荷。

(v)如(ii)～(iv)中任一項(xiàng)所述的基因?qū)雱渲校鲜龉倌軋F(tuán)為氨基。

(vi)如(ii)～(v)中任一項(xiàng)所述的基因?qū)雱渲校鲜黾{米顆粒平均粒徑為10nm～1000nm。

(vii)如(ii)～(vi)中任一項(xiàng)所述的基因?qū)雱渲校鲜龌驅(qū)胗幂d體結(jié)合物質(zhì)為肝素和/或硫酸乙酰肝素。

(viii)如(ii)～(vii)中任一項(xiàng)所述的基因?qū)雱渲校鲜黾{米顆粒具有磁性。