[發明專利]細胞培養物上清液的過濾

有效

• 申請號: 201380038651.3
• 申請日: 2013-07-19
• 公開（公告）號: CN104769102B
• 公開（公告）日: 2020-11-03
• 發明（設計）人: T.格羅斯塞;H.尼伊德克雷格;A.沙亞夫
• 申請（專利權）人: 格林諾瓦森生物技術股份有限公司
• 主分類號: C12N5/04
• 分類號: C12N5/04;C12P21/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 周鐵;石克虎

1.用于將液體上清液從植物細胞分離的方法，其包括以下步驟：

a）提供植物細胞與液體的混合物，

b）用所述混合物充裝內體積為至少2 L的濾器盒，其中在所述濾器盒中，在平的基底面上提供具有范圍為4 μm-50 μm的孔徑的第一濾器，并且所述濾器盒的壁緊密地與篩狀穿孔的平的基底面相連，

c）通過壓縮空氣向所述混合物施加至少0.5 bar的差壓，由此將所述混合物的液體部分擠壓穿過濾器，并且含有植物細胞的濾餅保留在濾器盒中，其中在移除位置的絕對壓力為至少0.7 bar，

d）移除經過濾的液體。

2.權利要求1的方法，其特征在于將至少10 L的上清液過濾。

3.權利要求1或2的方法，其特征在于植物細胞在所述方法中不破裂。

4.權利要求1或2的方法，其特征在于在移除位置的絕對壓力為至少0.8 bar。

5.權利要求1或2的方法，其特征在于差壓為至少0.8 bar。

6.權利要求1或2的方法，其特征在于差壓為至少1 bar。

7.權利要求1或2的方法，其特征在于所述濾器盒是高壓容器。

8.權利要求1或2的方法，其特征在于所述濾器盒是設計用于至少2 bar的壓力的高壓容器。

9.權利要求1或2的方法，其特征在于所述濾器盒是設計用于至少5 bar的壓力的高壓容器。

10.權利要求1或2的方法，其特征在于在所述方法過程中溫度范圍為0℃-40℃。

11.權利要求1或2的方法，其特征在于所述濾餅不用額外的液體洗滌和/或其中通過壓縮空氣將液體從濾餅中排出。

12.權利要求1或2的方法，其進一步包括步驟：e1）用具有比第一濾器孔徑更小的孔徑的第二濾器進一步過濾步驟d）中獲得的經過濾的液體，其中所述第二濾器的孔徑范圍為1μm-20 μm。

13.權利要求1或2的方法，其進一步包括步驟：e2）用具有比第二濾器孔徑更小的孔徑的第三濾器進一步過濾步驟d）或e1）中獲得的經過濾的液體，其中所述第三濾器的孔徑范圍為0.3 μm-10 μm。

14.權利要求13的方法，其進一步包括步驟：f）用具有比第三濾器孔徑更小的孔徑的第四濾器進一步過濾步驟e1）或e2）中獲得的經過濾的液體，其中所述第四濾器的孔徑范圍為0.05 μm-2 μm。

15.權利要求1或2的方法，其特征在于所述植物細胞是苔蘚細胞。

16.權利要求1或2的方法，其特征在于所述植物細胞是葉苔細胞。

17.權利要求1或2的方法，其特征在于所述植物細胞是小立碗蘚細胞。

18.權利要求1或2的方法，其特征在于由所述植物細胞產生的重組蛋白在液體上清液中和/或通過過濾液體純化上清液中的重組蛋白。