[發(fā)明專利]干細(xì)胞微粒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201380038368.0
• 申請(qǐng)日: 2013-07-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104703609B
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-02-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 約翰·辛登;拉臘·斯泰瓦納托;倫道夫·考特林
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘭諾龍有限公司
• 主分類號(hào): A61K31/711
• 分類號(hào): A61K31/711;C12N5/0797;A61P25/28;A61P11/00;A61P9/00;A61K35/30
• 代理公司: 上海弼興律師事務(wù)所 31283
• 代理人: 薛琦

1.一種從部分分化的細(xì)胞制備干細(xì)胞微粒的體外方法，其包括以下步驟：

(i)在允許干細(xì)胞分化的環(huán)境中培養(yǎng)干細(xì)胞；

(ii)收集所述部分分化的細(xì)胞產(chǎn)生的微粒；

其中所述的部分分化的細(xì)胞是神經(jīng)干細(xì)胞，所述神經(jīng)干細(xì)胞表達(dá)標(biāo)記物Nestin、Sox2、GFAP、βIII-微管蛋白、DCX、GALC、TUBB3、GDNF和IDO中的一種或多種；和/或，其中所述微粒是外來(lái)體且所述外來(lái)體表達(dá)DCX、GFAP、GALC、TUBB3、GDNF和IDO中的一種或多種。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述允許干細(xì)胞分化的環(huán)境是在多隔室生物反應(yīng)器中培養(yǎng)。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中所述多隔室生物反應(yīng)器含有被一個(gè)或多個(gè)膜或隔層分隔的至少兩個(gè)隔室，所述膜或隔層將含有細(xì)胞的隔室與一個(gè)或多個(gè)含有氣體和/或培養(yǎng)基的隔室分隔開(kāi)。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中所述培養(yǎng)超過(guò)7天。

5.根據(jù)權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述的方法，其還包括從干細(xì)胞條件培養(yǎng)基中分離微粒。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中所述干細(xì)胞條件培養(yǎng)基包含刺激干細(xì)胞將微粒釋放到培養(yǎng)基中的一種或多種添加劑組分或藥劑。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中所述一種或多種添加劑組分選自轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)、干擾素-γ(INF-γ)和/或腫瘤壞死因子-α(TNF-α)。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中所述干細(xì)胞在低氧條件下培養(yǎng)。

9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中所述干細(xì)胞與不同類型細(xì)胞共培養(yǎng)。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其中所述不同類型細(xì)胞是內(nèi)皮細(xì)胞。

11.根據(jù)權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述的方法，其中所述干細(xì)胞是神經(jīng)干細(xì)胞。

12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中所述干細(xì)胞為神經(jīng)干細(xì)胞系。

13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中所述神經(jīng)干細(xì)胞系是條件永生化的。

14.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中所述神經(jīng)干細(xì)胞系是具有ECACC登記No.04091601的CTX0E03；或具有ECACC登記No.04110301的STR0C05；或具有ECACC登記No.04092302的HPC0A07。

15.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中所述神經(jīng)干細(xì)胞系生長(zhǎng)于無(wú)血清培養(yǎng)基中。

16.根據(jù)權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述的方法，其中所述微粒中至少有兩、三、四、五、六或七種miRNA與在標(biāo)準(zhǔn)T-175燒瓶中培養(yǎng)的相應(yīng)干細(xì)胞中相比被上調(diào)或下調(diào)；所述上調(diào)或下調(diào)通過(guò)倍數(shù)調(diào)節(jié)所計(jì)算。