[發明專利]生物精煉系統、其方法和組合物

有效

• 申請號: 201380037019.7
• 申請日: 2013-07-12
• 公開（公告）號: CN104685060B
• 公開（公告）日: 2019-11-01
• 發明（設計）人: J·西爾弗曼;S·M·雷斯尼克;M·門德斯;R·薩維爾;S·李;L·阮
• 申請（專利權）人: 凱利斯塔公司
• 主分類號: C12P7/64
• 分類號: C12P7/64;C12N1/21;C12N15/63
• 代理公司: 北京市鑄成律師事務所 11313
• 代理人: 孟銳

1.一種重組C₁代謝非光合微生物，其中所述重組C₁代謝非光合微生物包含編碼硫酯酶、丙二酰基CoA-?；d體蛋白轉酰酶、乙酰基-CoA羧化酶或其任何組合的異源多核苷酸，且其中與親本C1代謝非光合微生物相比，所述異源多核苷酸的表達在所述重組C1代謝非光合微生物中引起增加水平的脂肪酸的積累，其中所述C1代謝非光合微生物是選自莢膜甲基球菌Bath(Methylococcus capsulatus Bath)、發孢甲基彎菌OB3b(Methylosinustrichosporium OB3b)、甲基單胞菌屬16a(Methylomonas sp.16a)、生孢甲基彎菌(Methylosinus sporium)、小甲基孢囊菌(Methylocystis parvu)、甲烷甲基單胞菌(Methylomonas methanica)、白色甲基單胞菌(Methylomonas albus)、莢膜甲基細菌Y(Methylobacter capsulatus Y)、鞭毛甲基單胞菌(Methylomonas flagellata)、極端嗜酸甲烷氧化菌(Methylacidiphilum infernorum)、嗜堿甲基微菌(Methylomicrobiumalcaliphilum)或其高度生長變異體的專性甲烷營養菌。

2.根據權利要求1所述的重組C₁代謝非光合微生物，其中所述硫酯酶針對所述C₁代謝非光合微生物進行密碼子優化。

3.根據權利要求2所述的重組C₁代謝非光合微生物，其中所述丙二?；鵆oA-?；d體蛋白轉酰酶是密碼子優化的大腸桿菌fabD。

4.根據權利要求1-3中任一項所述的重組C₁代謝非光合微生物，其中所述乙?；?CoA羧化酶是密碼子優化的大腸桿菌accA、accB、accC、accD或其任何組合。

5.根據權利要求1-3中任一項所述的重組C₁代謝非光合微生物，其中所述重組C₁代謝微生物進一步包含最小化或消除脂肪酸-CoA連接酶活性的突變。

6.根據權利要求1所述的重組C1代謝非光合微生物，其中所述甲烷營養菌選自莢膜甲基球菌Bath(Methylococcus capsulatus Bath)、甲基單胞菌屬16a(Methylomonassp.16a)或發孢甲基彎菌OB3b(Methylosinus trichosporium OB3b)。

7.根據權利要求1-6中任一項所述的重組C₁代謝非光合微生物的生物質，其中所述生物質的δ¹³C在-40‰到-60‰的范圍內。

8.根據權利要求7所述的生物質，其中所述生物質包含(a)權利要求1的所述重組C₁代謝非光合微生物的培養物以及所述重組C₁代謝非光合微生物生長所處的培養基；(b)從所述培養基生長并回收的所述重組C₁代謝非光合微生物；或(c)從所述重組C₁代謝非光合微生物的培養物回收的消耗的培養基上清液組合物。

9.根據權利要求8所述的生物質，其中油組合物是從(c)所述消耗的培養基上清液組合物中提取或濃縮。

10.制備油組合物的方法，所述方法包括：

(i)通過分批或連續培養在C₁底物上生長權利要求1-6中任一項的重組C₁代謝非光合微生物；和

(ii)從所述重組C₁代謝非光合微生物的細胞膜提取所述油組合物或從培養物上清液回收所述油組合物，或其組合。