[發明專利]用于CD4+T細胞群之抗原特異性擴增的標準化離體平臺

有效

• 申請號: 201380033983.2
• 申請日: 2013-05-08
• 公開（公告）號: CN104428411B
• 公開（公告）日: 2018-11-23
• 發明（設計）人: 道格拉斯·韋恩·埃特爾
• 申請（專利權）人: 健康科學西部大學
• 主分類號: C12N5/0784
• 分類號: C12N5/0784
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 林曉紅

1.將人胚胎干細胞(hESC)分化為成熟的專職抗原呈遞細胞(APC)的方法，其包括：

誘導所述hESC分化為共同髓系祖細胞；

誘導所述髓系祖細胞分化為未成熟樹突細胞；

將編碼融合蛋白的核酸引入到所述未成熟樹突細胞，其中所述融合蛋白包含通過肽接頭與HLA-DRAα鏈肽相連的單一肽抗原，其中所述單一肽抗原結合到所述HLA-DRAα鏈肽的結合口袋，并且其中所述HLA-DRAα鏈肽包含SEQ ID NO：5的氨基酸序列；和

誘導所述未成熟樹突細胞分化為成熟樹突細胞，其中所述成熟樹突細胞是呈遞所述單一肽抗原的成熟的專職抗原呈遞細胞。

2.擴增肽抗原限定性CD4⁺T細胞群的方法，其包括以下步驟：

從對象的全血分離CD4⁺T細胞群；和

用權利要求1所述的成熟樹突細胞培養所述CD4⁺T細胞足夠長的時間以允許CD4⁺T細胞經歷至少3個細胞分裂周期，其中由所述成熟樹突細胞呈遞的單一肽抗原特異性地與至少一種CD4⁺T細胞的T細胞受體相互作用。

3.制備成熟的專職抗原呈遞細胞(APC)的方法，其包括：

將編碼融合蛋白的核酸引入到未成熟樹突細胞群，其中所述融合蛋白包含通過肽接頭與HLA-DRAα鏈肽相連的單一肽抗原，其中所述單一肽抗原結合到所述HLA-DRAα鏈肽的結合口袋，并且其中所述HLA-DRAα鏈肽包含SEQ ID NO：5的氨基酸序列；和

誘導所述未成熟樹突細胞分化為成熟樹突細胞，其中所述成熟樹突細胞是呈遞所述單一肽抗原的成熟的專職抗原呈遞細胞。

4.制備成熟的專職抗原呈遞細胞(APC)的方法，其包括：

將編碼融合蛋白的核酸引入到成熟樹突細胞群，其中所述融合蛋白包含通過肽接頭與HLA-DRAα鏈肽相連的單一肽抗原，其中所述單一肽抗原結合到所述HLA-DRAα鏈肽的結合口袋，并且其中所述HLA-DRAα鏈肽包含SEQ ID NO：5的氨基酸序列，并且其中所述成熟樹突細胞是呈遞所述單一肽抗原的成熟的專職抗原呈遞細胞。