[發明專利]前列腺癌和SAR-COV的人血清生物標記物

有效

• 申請號: 201380033615.8
• 申請日: 2013-04-24
• 公開（公告）號: CN104428674A
• 公開（公告）日: 2015-03-18
• 發明（設計）人: 王德農
• 申請（專利權）人: 思研(SRI)國際顧問與咨詢公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N33/563;G01N33/574
• 代理公司: 北京北翔知識產權代理有限公司 11285
• 代理人: 張廣育;姜建成

本發明是在國立衛生研究院授予的基金No.7U01CA128416-04的政府支持下完成的。政府對本發明享有某些權利。

相關申請的交叉引用

本申請要求于2012年4月24日提交的美國申請No.61/637,674和于2013年2月1日提交的美國申請No.61/759,745的優先權，所述申請的公開內容以引用的形式全文納入本文。

背景技術

前列腺癌(PCa)是男性中最常見的非上皮性惡性腫瘤。根據尸檢研究，大量美國男性在他們30多歲的時候已經在他們的前列腺中患有癌癥；該頻率在男性70多歲的時候上升到約80％。盡管PCa有如此高的發病率，但在美國只有8％的男性在他們的一生中表現出影響他們生活質量的臨床重大疾病[Stamey?et?al.1993]，并且在美國所有男性中只有3％死于PCa[Ries?1994]。沒有其他人類癌癥在非常高的惡性腫瘤的微觀發病率和相對較低的死亡率之間具有如此巨大的差異。例如，乳腺癌——主要的女性惡性腫瘤——在5年內具有15％的死亡率[DeSantis?et?al.2011a；DeSantis?et?al.2011b]，同時，肺癌——總體上第三大常見的惡性腫瘤——在5年內具有超過86％的死亡率[Bach?et?al.2004]。

PCa的高發生率和相對較低的死亡率之間的這種顯著差異已經促使本發明人提出以下疑問：1)是否存在實質上降低PCa的死亡率的宿主監視機制；2)是否能建立新的測定方法來檢測PCa的高風險、高死亡率的狀態以使得可以給予這些受試者有效的治療以降低該疾病的死亡率；和3)是否存在在侵襲性癌癥(aPCa)和其他臨床無痛、非侵襲性癌癥(iPCa)之間差異性表達的關鍵免疫學靶標。這類免疫原性要素的鑒定對于建立治療和診斷策略來改善PCa患者的當前健康護理是重要的。

本發明人的小組已經研究了PCa的潛在免疫原性碳水化合物部分。通過對凝集素結合到組織微陣列上的模式進行評估，本發明人觀察到PCa中很多聚糖標志物的異常表達[Wang?et?al.2011]。這些標志物是N-聚糖的前體、核心和內部序列，例如低聚甘露糖、三觸角II型(Galβ1→4GlcNAc)鏈(Tri-II)或多價II型鏈(m-II)[Wang?2012]。這些標志物的常見免疫學特征在于它們通常被其它糖部分遮蓋，并且它們屬于一類通常“隱性的(cryptic)”的糖表位。重要的是，它們的組織表達或曝光量在PCa的不同Gleason分級和腫瘤轉移中看起來明顯不同[Lange?et?al.2012；Wang?et?al.2011]。這具有潛在的臨床意義，因為Gleason分級是確定性手術治療或放射治療后PCa的復發的最有效預測指標(predictor)。

隨后，本發明人在動物模型研究中發現基于腫瘤細胞的疫苗誘發了抗Man9-簇的抗體[Newsom-Davis?et?al.2009]。在這種情況下，Fas-配體轉染的黑素瘤細胞被用于動物免疫接種。通過該免疫接種策略建立的單克隆抗體(mAb)TM10在流式細胞術分析中顯示了獨特的結合性質。TM10不與未轉化的正常細胞的細胞表面結合但是強烈地結合許多小鼠和人腫瘤細胞系(包括來自黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌和卵巢癌的那些)。有趣的是，本發明人的碳水化合物微陣列分析顯示TM10識別由(Man9)n-匙孔血藍蛋白(KLH)和[(Man9)4]n-KLH所呈遞的寡甘露糖基表位[Newsom-Davis?et?al.2009]。最初構建了這些糖綴合物以顯示由mAb?2G12識別的HIV-1中和表位[Ni?et?al.2006]，但是在該研究中發現它們呈遞所述腫瘤相關的TM10-抗原。

通過使用碳水化合物微陣列，本發明人還研究了人免疫系統是否也識別這些腫瘤碳水化合物并引起(mount)抗體應答。本發明人分析了一組來自帶有PCa的男性的血清(N＝17)，與來自帶有良性前列腺增生(BPH)的男性的血清(N＝12)相比較。發現所述兩個TM10-陽性的Man9-綴合物可高度有效地捕獲來自這兩個組的人血清IgG抗體。但是，在癌癥組中捕獲的抗體的水平顯著高于在BPH組中檢測的那些[Wang2012]。