[發(fā)明專利]使間質(zhì)干細(xì)胞不分化地增殖的方法、及濃縮間質(zhì)干細(xì)胞的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201380033421.8
• 申請(qǐng)日: 2013-08-08
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104395460B
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-06-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 阿部博幸;川崎廣明
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 阿部博幸;川崎廣明
• 主分類號(hào): C12N5/0775
• 分類號(hào): C12N5/0775
• 代理公司: 中國(guó)國(guó)際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所 11038
• 代理人: 羅菊華

本發(fā)明中涉及的方法濃縮臍帶血中的間質(zhì)干細(xì)胞，將濃縮的間質(zhì)干細(xì)胞使用特定的因子不分化地增殖。

【技術(shù)領(lǐng)域】

本發(fā)明涉及將臍帶血中的間質(zhì)干細(xì)胞濃縮，不分化地增殖的方法、及濃縮臍帶血中的間質(zhì)干細(xì)胞的方法。

【背景技術(shù)】

間質(zhì)干細(xì)胞已知是有向?qū)儆陂g質(zhì)的細(xì)胞(例如，成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、肌細(xì)胞及軟骨細(xì)胞等)的分化能的細(xì)胞。另外，近年報(bào)告，間質(zhì)干細(xì)胞甚至可分化為不是神經(jīng)細(xì)胞及肝臟等的中胚葉性的組織。因此，間質(zhì)干細(xì)胞在再生醫(yī)療中的利用被大地期待。

間質(zhì)干細(xì)胞存在于骨髓及臍帶血等，采集的細(xì)胞集團(tuán)中的間質(zhì)干細(xì)胞所占的比例非常地小。從而，利用間質(zhì)干細(xì)胞時(shí)，一般是濃縮或者分離間質(zhì)干細(xì)胞。例如，作為濃縮間質(zhì)干細(xì)胞的一例，已知從血液除去紅細(xì)胞的HES法、Ficoll法及濾器法等。

【現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)】

【非專利文獻(xiàn)】

非專利文獻(xiàn)1：Pittenger，M.F.et al.，Multilineage Potential of AdultHuman Mesenchymal Stem Cells.Science，284:143-147,1999。

非專利文獻(xiàn)2：Basford，C.et al.，The Cord Blood Separation League Table：aComparison of the Major Clinical Grade Harvesting Techniques for Cord BloodStem Cells.Inter.J.Stem Cells，3:32-45,2010。

非專利文獻(xiàn)3：Yasutake，M.et al.，Stem cell collection filter system forhuman placental/umbilical cord blood processing.Vox Sang.，80:101-105,2001。

【發(fā)明內(nèi)容】

【發(fā)明要解決的技術(shù)課題】

但是，用至今已知的方法無(wú)法充分地濃縮僅微少含有的間質(zhì)干細(xì)胞。從而，例如即使培養(yǎng)濃縮的樣品，也由于大量地含雜質(zhì)，從而無(wú)法得到充分的數(shù)的間質(zhì)干細(xì)胞。

從而，鑒于這樣的課題，本發(fā)明的目的是從臍帶血有效得到充分的數(shù)的間質(zhì)干細(xì)胞。

【解決課題的技術(shù)方案】

為了解決上述課題，本發(fā)明中涉及的方法是使間質(zhì)干細(xì)胞不分化地增殖的方法，其包括：使用特異性地識(shí)別血細(xì)胞的抗體生成濃縮了臍帶血中的間質(zhì)干細(xì)胞的樣品的工序，以及在含SHH、FGF1或FGF2的培養(yǎng)基中培養(yǎng)上述樣品的工序。

為了解決上述課題，本發(fā)明中涉及的方法是濃縮間質(zhì)干細(xì)胞的方法，其包括使用與血細(xì)胞特異性地結(jié)合的抗體珠濃縮臍帶血中的間質(zhì)干細(xì)胞的工序。

【發(fā)明效果】

通過(guò)本發(fā)明可從臍帶血有效得到充分的數(shù)的間質(zhì)干細(xì)胞。

【附圖說(shuō)明】

【圖1】是顯示確認(rèn)從臍帶血分離的細(xì)胞中含間質(zhì)干細(xì)胞的FACS解析的結(jié)果的圖。

【圖2】是顯示由本發(fā)明中涉及的培養(yǎng)方法增殖的細(xì)胞的數(shù)的經(jīng)時(shí)的變化的圖。

【圖3】是顯示確認(rèn)在培養(yǎng)第14天間質(zhì)干細(xì)胞選擇性地增殖的FACS解析的結(jié)果的圖。

【圖4】是顯示通過(guò)比較培養(yǎng)前及培養(yǎng)第14天的間質(zhì)干細(xì)胞，確認(rèn)間質(zhì)干細(xì)胞選擇性地增殖的FACS解析的結(jié)果的圖。

【實(shí)施方式】