[發明專利]用于檢測分析物或分類樣本的方法和系統

有效

• 申請號: 201380031792.2
• 申請日: 2013-04-15
• 公開（公告）號: CN104380085B
• 公開（公告）日: 2018-12-18
• 發明（設計）人: S·C·特羅威爾;H·戴克斯;N·C·H·黎;M·格爾;Y·朱;N·吳
• 申請（專利權）人: 聯邦科學技術研究組織
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N33/53;C12Q1/66
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 左路

1.一種檢測樣本中的分析物的方法，所述方法包括

i)使以下各物流動通過包括一個或多個微通道的微流體裝置，

a)所述樣本，

b)包含結合所述分析物的結構域、化學發光供體結構域和接受體結構域的傳感器分子，其中在存在和/或不存在分析物下，所述化學發光供體結構域和所述接受體結構域的間隔和相對定向在±50％福斯特距離內，且其中所述傳感器分子未固定于所述裝置，

c)所述化學發光供體的底物，

ii)在所述裝置中混合所述傳感器分子、樣本和底物，以及

iii)使用電光學感測裝置檢測所述化學發光供體對所述底物的修飾，并計算為化學發光的供體結構域和接受體結構域之間出現的能量轉移比率，

其中當所述分析物結合所述傳感器分子時，所述化學發光供體結構域相對于所述接受體結構域的空間位置和/或偶極定向被改變。

2.如權利要求1所述的方法，其中所述方法可用于實時檢測所述分析物。

3.如權利要求1或2所述的方法，其中所述傳感器分子和所述底物通過不同微通道進入所述裝置。

4.如權利要求1或2所述的方法，其中所述化學發光供體結構域和所述接受體結構域的所述福斯特距離是至少5.6nm。

5.如權利要求4所述的方法，其中所述化學發光供體結構域和所述接受體結構域的所述福斯特距離在約5.6nm與約10nm之間。

6.如權利要求1或2所述的方法，其中所述分析物結合所述傳感器分子或從所述傳感器分子釋放導致BRET比率變化≥15％的最大觀察BRET比率。

7.如權利要求1或2所述的方法，其中由所述電光學感測裝置檢測到的量子產率小于約8％、或小于約5％、或小于約2％。

8.如權利要求1或2所述的方法，其中所述接受體結構域具有的斯托克斯位移在約50nm與約150nm之間。

9.如權利要求8所述的方法，其中所述接受體結構域具有約100nm的斯托克斯位移。

10.如權利要求1或2所述的方法，其是在約1s至約100s內執行的。

11.如權利要求1或2所述的方法，其中所述樣本是液體、氣體、乳液或混懸液。

12.如權利要求11所述的方法，其中所述樣本是已用氣體預平衡的液體。

13.如權利要求11所述的方法，其中所述混懸液是或包含無細胞提取物。

14.如權利要求11所述的方法，其中所述混懸液包含細胞。

15.如權利要求1或2所述的方法，其中穿過所述微流體裝置的流動速率在約1μl/小時至約1.5ml/小時之間。

16.如權利要求15所述的方法，其中穿過所述微流體裝置的所述流動速率在約200μl/小時至約1ml/小時之間。

17.如權利要求1或2所述的方法，其中所述傳感器分子包含如G偶聯蛋白質受體的蛋白質受體，且在步驟ii)之后，所述傳感器分子的濃度在約1nM至約10μM之間。

18.如權利要求1或2所述的方法，其中穿過所述微流體裝置的流動是連續流動、批式流動或停止流動。

19.如權利要求1或2所述的方法，其中所述流動是通過以下一項或多項來進行：泵送、真空、水力、抽吸、電動、化學滲透、毛細管力、聲學、電磁、壓電學。