[發明專利]用于生物工藝應用的聚合物薄膜

有效

• 申請號: 201380030588.9
• 申請日: 2013-05-09
• 公開（公告）號: CN104349900A
• 公開（公告）日: 2015-02-11
• 發明（設計）人: S.貝克勒;P.W.湯普森
• 申請（專利權）人: 克里奧瓦克公司
• 主分類號: B32B27/30
• 分類號: B32B27/30;B32B27/32;B32B27/34;B32B27/36;C12M1/00;A61J1/10
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 鄒雪梅;梁謀

相關申請的交叉引用

本申請要求2012年5月11日提交的美國臨時專利申請No.?61/645,698的優先權，其被整體并入本文中作為參考。

發明領域

本公開的主題主要涉及適合用于構造用于生物工藝應用的一次性容器的聚合物薄膜。更具體地，本公開的薄膜在低、中和高相對濕度條件下保持示例性的氣體阻隔并且不抑制生物細胞培養物、細胞聚集體、顆粒、組織等的生長。

背景

在醫藥、化學和農業的領域中的許多工藝的發展和商業化需要使用生物工藝容器。細胞通常在體外在玻璃、金屬或硬塑料容器中生長。然而，由于這些培養物容器不是一次性的，它們昂貴而且需要維護。具體地，為了保持細胞培養物的滅菌或無菌環境，所述容器需要滅菌，通常通過高壓釜或無菌性消毒。因此，它們必須在使用之前和/或之后被洗滌和殺菌。另外，因為玻璃、金屬和硬塑料容器不是一次性的，需要具有大量適應儲存的空間。

另外，制備細胞、生物藥品、生物制劑等的費用由于需要對常規生物工藝容器（即金屬、玻璃、或硬塑料容器）進行清潔、殺菌和驗證而加重。已經試圖通過開發由常規包括至少一種乙烯乙烯醇(EVOH)層的柔性不透氣薄膜的片材構造的預殺菌一次性生物工藝容器以增大該結構的氣體阻隔性來解決這個難題。如所熟知的，EVOH的阻隔性適合低濕度條件，但當暴露于高濕度下時基本上降解。另外，通常用于柔性細胞培養物袋的薄膜包括抑制細胞培養物生長的薄膜表面改性添加劑（如防霧劑、抗靜電劑、防粘連劑等）。

因此，提供適合在低、中和高濕度條件下保持阻隔性的生物工藝應用的柔性薄膜是有益的。如果所公開的柔性薄膜不含表面改性添加劑從而支持生物細胞培養物生長也是有利的。

概述

在一些實施方案中，本公開的主題涉及多層薄膜，該多層薄膜包括密封劑層，該密封劑層包含約5-95重量%的具有T_g≥25℃的烯烴聚合物和約95-5重量%的α-烯烴共聚物。所公開的薄膜還包含第一阻隔層，該第一阻隔層包含聚乙醇酸、聚酰胺、EVOH、EVOH共混物、或其組合，其中所述第一阻隔層與所述密封劑層位置相鄰。所述薄膜進一步包括表層，該表層包含PET或PET共混物（其中在所述共混物中的至少一種PET為非晶質的并具有Tg?≥?50℃）、或聚酰胺、或聚酰胺共混物（其中所述共混物中的至少一種聚酰胺為非晶質的并且具有Tg?≥?50℃）。所述薄膜進一步包括第二阻隔層，該第二阻隔層包含EVOH，其中所述第二阻隔層與所述表層位置相鄰。所公開的薄膜具有根據ASTM?D-3985在高、中和低相對濕度條件下在73°F下的小于約500?cc/m²-天-atm的氧氣透過率。

在一些實施方案中，本公開的主題涉及生物工藝容器，該生物工藝容器包括由所公開的薄膜構造的至少第一薄膜和第二薄膜，其中所述容器的側壁被沿著其邊緣密封以界定儲存(housing)產品的內部隔室。例如，本公開的主題可以包括其中4個薄膜網結合在一起以形成雙重壁容器的實施方案。

在一些實施方案中，本公開的主題涉及培養細胞的方法。所公開的方法包括提供所公開的生物工藝容器，將液體介質引入所述容器的內部隔室，用細胞接種所述液體介質，并在合適的條件下在容器內孵育所述細胞以用于細胞生長。

附圖簡述

圖1是示例所公開的薄膜15、17、21和22在100/50%?(內/外)相對濕度和73℉下經過10天時間段的氧氣透過率的線圖。

圖2是示例所公開的薄膜15、17、21和22在100/100%?(內/外)相對濕度和73℉下經過7天時間段的氧氣透過率的線圖。

圖3是示例所公開的薄膜15、31、32、33、34和36在100/100%?(內/外)相對濕度和73℉下經過10天時間段的氧氣透過率的線圖。

圖4是示例由所公開的薄膜67構造的生物工藝容器的人脾腎(HEK)細胞計數和活力相比于商業生物工藝容器的線圖。

圖5是示例由所公開的薄膜67構造的生物工藝容器的中國倉鼠卵巢(CHO)細胞計數和活力相比于商業生物工藝容器的線圖。

詳述

I.　　總論