[發(fā)明專利]使用桿狀病毒載體的膀胱癌治療方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201380030337.0
• 申請日: 2013-04-10
• 公開（公告）號: CN104797261A
• 公開（公告）日: 2015-07-22
• 發(fā)明（設計）人: 王朔;吳春曉;趙瑩;李幸慰
• 申請（專利權）人: 新加坡科技研究局
• 主分類號: A61K31/7088
• 分類號: A61K31/7088;A61K35/76;A61P35/00;C12N15/86
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 余穎

相關申請的交叉引用

本申請要求2012年4月10日提交的美國臨時申請第61/622,376號的優(yōu)先權和權益，其內容通過引用納入本文。

技術領域

本發(fā)明涉及使用桿狀病毒載體治療或預防膀胱癌的方法。

發(fā)明背景

膀胱癌是尿道中最常見的惡性腫瘤形式。在美國，2011年預計有69,000例新增病例和近15,000人死亡(Siegel?R等，2011)。在新加坡，膀胱癌是男性中第9大常見癌癥。

幾乎所有膀胱癌都是從變移上皮產(chǎn)生的且因此稱為變移細胞癌(TCC)。大部分的膀胱TCC在初始診斷中是淺表性的、非肌肉浸潤性的。然而，尿道切除后表面TCC的復發(fā)率可以高達70％，必需進行輔助治療以控制復發(fā)和進展。

輔助治療通常使用卡介苗(BCG)以膀胱內免疫治療的形式給予具有中度或高度癌癥復發(fā)風險的患者。BCG由減毒的活牛結核菌生成并可激活CD4+Th1細胞因子(如白介素2(IL-2)、IL-12、IL-18和干擾素γ(INF-γ))介導的先天免疫應答。然而，由于BCG難治性、耐藥性、復發(fā)或不耐受，多達40％的患者會在第一年中發(fā)生BCG免疫治療失敗(Zlotta?AR等，2009；Chiong和Esuvaranathan，2010)。因此，存在開發(fā)新的輔助療法以提高淺表性膀胱癌患者治療結果的需要。

已被開發(fā)作為可能的膀胱癌輔助治療的基于病毒載體的基因治療包括疫苗病毒(Lee?SS等，1994；Gomella?LG等，2001；Siemens?DR等，2003；Fodor?I等，2005)、腺病毒(Morris?BD等，1994；Sutton?MA等，2007；Kuball?J等，2002；Siemens?DR等，2003；Pagliaro?LC等，2003；PU等，2010)、金絲雀痘病毒(Siemens?DR等，2003)、呼腸孤病毒(Hanel?EG等，2004)、逆轉錄病毒(Shiau?AL等，2001；Kimura?T等，2003；Dumey?N等，2005；Kikuchi?E等，2007)、慢病毒(Kikuchi?E等，2004)和水泡性口炎病毒(Hadaschik?BA等，2008)。已報道了至少5個臨床實驗，其涉及使用復制型疫苗病毒和腺病毒載體治療膀胱癌(Gomella?LG等，2001；Kuball?J等，2002；Pagliaro?LC等，2003；Burke?J，2010；PU等，2010)。

經(jīng)測試用于癌癥基因治療的多種類型病毒載體中有反轉錄病毒。反轉錄病毒的生命周期包括宿主基因組中的整合狀態(tài)，從而允許治療基因的長期、穩(wěn)定表達。關于反轉錄病毒使用的一個主要問題是這些載體優(yōu)先整合至基因組的轉錄活躍區(qū)域，這會導致插入突變、癌基因激活和細胞轉化。進行SCID-X1的基因治療后法國和英國數(shù)名兒童發(fā)生白血病(Hacein-Bey-Abina等，2003)使得病毒載體相關的潛在風險受到嚴格審查。

腺病毒和腺相關病毒(AAV)來源的病毒載體具有低得多的插入突變風險且已經(jīng)過癌癥基因治療的測試(Cross和Burmester，2006；Palmer等，2006)。還在動物模型和至少4個早期臨床試驗中對腺病毒載體進行了膀胱癌基因治療的廣泛測試(Kuball?J等，2002；Pagliaro?LC等，2003；Burke?J，2010；PU等，2010)。然而，作為感染性人病毒，腺病毒和AAV激活人免疫系統(tǒng)(CalcedoR等，2009；Huang和Yang，2009；Nayak和Herzog，2010)。AAV載體有效地激活B細胞(Huang和Yang，2009)且根據(jù)年齡組和地理位置，在35至80％的個體中檢測到了針對AAV2的特異性抗體(Calcedo?R等，2009)。雖然處于非常低的頻率，AAV衣殼特異性CD8+記憶T細胞存在于人中并可在AAV轉導后被重新激活(Nayak和Herzog，2010)。針對腺病毒的預存免疫甚至是更普遍的(Bessis?N等，2004；Nayak和Herzog，2010)。在超過97％的人中檢測到了針對C群腺病毒的預存抗體，并在約50％的人中檢測到了通常用于產(chǎn)生腺病毒載體的針對血清型2腺病毒的預存抗體(Nayak和Herzog，2010)。對于T細胞介導的免疫，在人外周血中檢測到了針對不同腺病毒血清型的CD4+和CD8+交叉反應性T細胞(Nayak和Herzog，2010)。