[發明專利]D-葡萄糖二酸生產菌及D-葡萄糖二酸的制造方法

有效

• 申請號: 201380029481.2
• 申請日: 2013-06-03
• 公開（公告）號: CN105026548B
• 公開（公告）日: 2019-06-18
• 發明（設計）人: 伊藤哲也;田所宏基;正木久晴;三國克彥;村上洋;木曾太郎;桐生高明
• 申請（專利權）人: 鹽水港精糖株式會社;大阪工業科學與技術研究機構
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/21;C12N9/02;C12N9/04;C12N15/09;C12P7/24;C12P7/42;C12P7/46
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 羅菊華

1.醇脫氫酶ADH(1)，其特征在于，其

為以SDS-PAGE示64,000±5,000、以凝膠過濾層析示120,000±10,000的分子量的吡咯并喹啉醌依賴性酶，且

由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列構成。

2.醛脫氫酶ALDH(2)，其特征在于，其

為以SDS-PAGE示61,000±5,000、以凝膠過濾層析示180,000±10,000的分子量的吡咯并喹啉醌依賴性酶，且

由SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列構成。

3.D-葡萄糖二酸或其鹽的制造方法，其特征在于，

是由選自D-葡萄糖、D-葡萄糖酸、D-葡萄糖醛酸的1種或2種以上的糖質制造D-葡萄糖二酸的方法，且

從這些的糖質生成D-葡萄糖二酸的反應被權利要求1所述的醇脫氫酶ADH(1)及權利要求2所述的醛脫氫酶ALDH(2)這兩者催化。

4.D-葡萄糖二酸或其鹽的制造方法，其特征在于，在選自D-葡萄糖、D-葡萄糖酸、D-葡萄糖醛酸的1種或2種以上的糖質的存在下，使用如下所述的具有催化所述1種或2種以上的糖質而生產D-葡萄糖二酸的功能的微生物或其處理物生產D-葡萄糖二酸：

(A)屬于生糖酮假葡萄糖酸桿菌(Pseudogluconobacter saccharoketogenes)，

(B)有

權利要求1所示的醇脫氫酶ADH(1)活性，和

權利要求2所示的醛脫氫酶ALDH(2)活性，

(C)與酮酸類的生成相關的醛脫氫酶ALDH(3)活性減弱或消失。

5.權利要求4所述的D-葡萄糖二酸或其鹽的制造方法，其中所述微生物是以保藏號FERM BP-10820保藏的生糖酮假葡萄糖酸桿菌(Pseudogluconobactersaccharoketogenes)Rh47-3株。

6.權利要求4所述的D-葡萄糖二酸或其鹽的制造方法，其中

醇脫氫酶ADH(1)的基因編碼序列由SEQ ID NO:7的堿基序列構成，且

醛脫氫酶ALDH(2)的基因編碼序列由SEQ ID NO:8的堿基序列構成。

7.權利要求4所述的D-葡萄糖二酸或其鹽的制造方法，其中所述處理物是選自下列的一種：

以保藏號FERM BP-10820保藏的生糖酮假葡萄糖酸桿菌(Pseudogluconobactersaccharoketogenes)Rh47-3株的清洗菌體、

所述Rh47-3株的細胞破碎液、

所述Rh47-3株的細胞提取液、及

將所述Rh47-3株的細胞破碎液或者所述Rh47-3株的細胞提取液由丙酮處理而得到的粉末。

8.D-葡萄糖二酸或其鹽的制造方法，其特征在于，在選自D-葡萄糖、D-葡萄糖酸、D-葡萄糖醛酸的1種或2種以上的糖質的存在下，使用屬于酵母及生糖酮假葡萄糖酸桿菌(Pseudogluconobacter saccharoketogenes)的基因重組生物或其處理物生產D-葡萄糖二酸，

其中所述基因重組生物導入了

權利要求1所述的醇脫氫酶ADH(1)的基因編碼序列，其為權利要求6中所述的SEQ IDNO:7所示的堿基序列，及

權利要求2所述的醛脫氫酶ALDH(2)的基因編碼序列，其為權利要求6中所述的SEQ IDNO:8所示的堿基序列。

9.權利要求8所述的D-葡萄糖二酸或其鹽的制造方法，其中所述處理物是選自下列的一種：

所述基因重組生物的細胞破碎液、

所述基因重組生物的細胞提取液、及

將所述基因重組生物的細胞破碎液或者所述基因重組生物的細胞提取液由丙酮處理而得到的粉末。

10.D-葡萄糖二醛的制造方法，其特征在于，使用權利要求1所述的醇脫氫酶ADH(1)從D-葡萄糖生產作為中間體A的D-葡萄糖二醛。

11.L-古洛糖醛酸或其鹽的制造方法，其特征在于，在選自D-葡萄糖、D-葡萄糖酸的1或2種糖質的存在下，使用權利要求1所述的醇脫氫酶ADH(1)及權利要求2所述的醛脫氫酶ALDH(2)這兩者生產作為中間體B的L-古洛糖醛酸。