[發明專利]植物作為功能microRNA和/或功能siRNA運載體、制備方法及其應用

有效

• 申請號: 201380029405.1
• 申請日: 2013-05-15
• 公開（公告）號: CN104394892B
• 公開（公告）日: 2020-02-14
• 發明（設計）人: 張辰宇;洪治;曾科
• 申請（專利權）人: 北京命碼生科科技有限公司
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;C12N15/63
• 代理公司: 31266 上海一平知識產權代理有限公司
• 代理人: 陸鳳;崔佳佳

本發明涉及植物作為功能microRNA和/或功能siRNA運載體、制備方法及其應用。具體地，本發明公開了以植物或其可食用部分或其提取物作為功能microRNA和/或功能siRNA的運載體及其用途。還公開了一種運載功能microRNA和/或功能siRNA的方法，包括步驟：將植物植株或其可食用部分或其提取物口服施用于需要的對象，其中，所述的植物或其可食用部分表達并攜帶功能microRNA和/或功能siRNA運載體，并且所述的提取物含有所述的功能microRNA和/或功能siRNA。

技術領域

本發明涉及生物領域。具體地，本發明涉及將植物作為功能microRNA和/或功能小干擾核糖核酸(siRNA)的運載體、及所述運載體的制備方法和應用。

背景技術

小干擾核糖核酸(siRNA)是一類由20多個核苷酸組成的雙鏈RNA分子，可以通過特異性降解靶基因的信使核糖核酸(messenger RNA，mRNA)起到沉默基因表達的作用，這一過程被稱為RNA干擾(RNA interference，RNAi)，在基因調控和生長發育等方面發揮著重要作用。RNA干擾(RNAi)是一種抗病毒機制。它是由dsRNA介導的序列特異性的同源基因的轉錄后的基因沉默，在細胞內有效作用方式為siRNA。RNA干擾可以利用siRNA或siRNA表達載體特異地沉默靶基因，此方式快速、經濟、簡便，且具有高度的序列專一性，可以獲得功能喪失或減低突變序列特異方式剔除目的基因表達，成為探索基因功能的重要研究手段。由于RNAi可以特異地下調特定基因的表達和復制，已在抗病毒及腫瘤研究方面獲得了許多進展。在利用RNA干擾技術對HIV-1、乙型肝炎、丙型肝炎等進行基因治療研究中發現，選擇病毒基因組中與人類基因組無同源性的序列作為抑制序列可在抑制病毒復制的同時避免對正常組織的毒副作用。同時將抑制序列選擇在特定的位點，可對部分有明確基因突變的惡性腫瘤細胞產生凋亡誘導作用。此外尚可通過使用腫瘤特異性啟動子，引導針對某些癌基因或凋亡分子的siRNA表達，從而達到特異性殺傷腫瘤細胞的目的。

小干擾核糖核酸(siRNA)，可以通過人工設計siRNA序列，更有針對性的抑制靶基因發揮作用而被廣泛應用到基因調控中。雖然RNA干擾已廣泛應用于生物醫學研究各個方面，但目前該技術仍有一些難以解決的問題。其中，遞送siRNA的穩定性差、效率低是妨礙其應用的主要原因。研究表明，小RNA家族中人工合成的siRNA一般很不穩定，易被循環系統中的RNA酶降解，更加不能耐受消化道的酸、堿環境。例如血清中的RNAse A類RNA酶導致siRNA的降解(Haupenthal等，Inhibition of RNAse A family enzymes prevents degradationand loss of silencing activity of siRNAs in serum)，因此，抑制血清中RNAse A可阻止siRNA的降解和沉默效果的減弱。該研究還指出，siRNA的降解與其序列緊密相關。因此在應用siRNA時，為抵抗RNA酶的降解會嘗試多種措施(包括化學修飾、脂質體包裹等)。